Паз вектор 3: Автобус ПАЗ ВЕКТОР-3 (225602) с пробегом — КУПИТЬ в Москве по выгодной цене | Продажа и выкуп автобусов ПАЗ ВЕКТОР-3 (225602) Б/У в России

>

Автобус ВЕКТОР NEXT (ПАЗ-320435-04) Доступная среда в Москве

Базовые характеристики
Тип кузоваполунесущий, вагонной компоновки
Ресурс кузова,  лет10
Колёсная формула4х2
Длина/Ширина/Высота,  мм7645/2445/2915 (3155 с кондиционером)
База,  мм3800
Высота потолка в салоне,  мм1950
Количество/ширина дверей,  мм1/650 + 1/900
Мин. радиус разворота,  м7
Масса снаряженная/технически допустимая масса,  кг6400/10050
Нагрузка на переднюю/заднюю ось от технически допустимой массы,  кг3500/6550
Общее количество мест (в т.ч. посадочных)52 (17…19+1инв.
+1)
Емкость топливного бака,  л95
ШассиC40R13, производства ГАЗ
Рулевой механизмZF, интегрального типа с гидроусилителем
Тормозная систематормозные механизмы – дисковые с автоматической регулировкой зазоров, привод тормозных механизмов – пневматический, с  АВS, ASR
Рулевая колонкас телескопическим рулевым валом, оборудованная замком зажигания с противоугонным устройством, подрулевыми переключателями поворотов, переключением дальнего/ближнего света, стеклоочистителями, стеклоомывателем и звуковыми сигналами.
Подвескапередняя – зависимая, рессорная со стабилизатором поперечной устойчивости; задняя – зависимая, пневматическая управляемая со стабилизатором поперечной устойчивости
Вентиляцияестественная, через форточки в окнах боковины и люки в крыше
Система отоплениянезависимый автономный жидкостный предпусковой подогреватель, фронтальный отопитель и 3 салонных отопителя
Шины245/70 R19,5
Агрегатные характеристики
Двигатель (дизельный)ЯМЗ-53443ЯМЗ-53423
(с системой рециркуляции EGR)
Количество и расположение цилиндров4R, вертикальное
Нормы экологической безопасностиEURO-5
Рабочий объем, л4,433
Мощность двигателя, кВт (л. с.)110,3 (150)
при 2300 мин-1
124,2 (168,9)
при 2300 мин-1
Макс. крутящий момент, Нм490 при 1200…1600 мин-1597 при 1200…1600 мин-1
Расположение двигателяПереднее, продольное
КППМКПП: ГАЗ С40R13, 5-ступ.АКП: Allison 2100, 6-ступ.
Максимальная скорость,  км/ч100

ВТБ Лизинг предлагает автобусы ПАЗ Вектор Next с дополнительной скидкой 300 000 рублей

Для персонализации сервисов и повышения удобства пользования сайтом АО ВТБ Лизинг использует файлы cookie, в которых содержатся данные о прошлых посещениях сайта. Если Вы не хотите, чтобы эти данные обрабатывались, отключите cookie в настройках браузера.

Соглашение об использовании пользовательских данных

Продолжая использовать наш сайт, вы даёте согласие на обработку, в т.

ч. с помощью метрических программ Google Analytics, Яндекс.Метрика, пикселей, скриптов и иных аналогичных по функционалу счетчиков рекламных систем партнеров ВТБ Лизинг, ваших пользовательских данных: файлов cookie, ip-адреса пользователя, id пользователя, сведений о местоположении, типе устройства, времени посещения страницы, сведениях о ресурсах сети Интернет, с которых были совершены переходы на сайт vtb-leasing.ru и сведения о действиях пользователей на сайте vtb-leasing.ru и взаимодействии с кампаниями персонализации.

Обработка представляет собой предусмотренные Федеральным законом от 27.07.2006 г. № 152-ФЗ «О персональных данных» сбор, запись, систематизацию, накопление, хранение, уточнение, извлечение, использование, передачу, обезличивание, блокирование, удаление, уничтожение обрабатываемых данных, и осуществляется АО ВТБ Лизинг и партнерами в целях полноценного функционирования сайта, проведения ретаргетинга, статистических исследований и обзоров, а также, с целью управления размещением рекламных материалов в информационно-телекоммуникационной сети Интернет.

Если вы не хотите, чтобы ваши данные обрабатывались, пожалуйста, ограничьте использование файлов cookie в своём браузере.

В Башкирии продолжается работа по обновлению пассажирского транспорта | ГТРК «Башкортостан» — Новости Уфы и Башкирии

В республике продолжается работа по обновлению пассажирского транспорта. 45 новых автобусов малого и среднего класса сегодня дополнили автопарк частного перевозчика, который работает на 13 городских регулярных маршрутах. Оценил возможности автобусов и Глава Башкортостана. Обо всём подробнее расскажет Диана Гайнуллина.

Последние приготовления перед выездом на линию – автобус моют и проверяют на исправность.

Совсем скоро такие Форды малого класса отправятся по востребованным уфимским маршрутам – с Сипайлово в Черниковку до промзоны.

Фанис Батыров, руководитель транспортной компании:

«Это взамен автобусов марки ПАЗ»

«Вы уже все свои старые автобусы заменили?»

«С конца 2021 года на нашем предприятии старых моделей машин нет».

Поступивший транспорт оснащён маршрутным компьютером, системой отопления и кнопками вызова водителя.

Своё новое рабочее место водители оценили по достоинству.

Фарит Фатыхов, водитель:

«Всё стало удобнее. Машина комфортнее — это и хороший руль, тормоза».

Кроме 30 автобусов малого класса марки Форд Транзит, частный перевозчик закупил ещё 15 автобусов среднего класса марки Вектор Некст.  Осмотреть их приехал Глава Башкортостана.

Эта компания работает в Уфе с 2001 года и возит пассажиров по 13 городским маршрутам. Сейчас её автопарк начитывает 300 автобусов, а к концу февраля поступит ещё 19. Радий Хабиров подчеркнул, что сегодня одна из главных задач — привести в порядок транспортную систему.

Радий Хабиров, Глава РБ:

«Я уже говорил, что в Приволжском федеральном округе у нас один из самых молодых автобусных парков – в среднем 34 года. Так и должно быть. Сейчас главная проблема, что жители жалуются, что нет регулярности.

Будем добиваться регулярности. А это уже более интеллектуальная работа, это не просто купить автобусы, нужно установить глонассы, принимать технические решения. Всё будет, всё сделаем».

Накануне Радий Хабиров осмотрел 35 низкопольных автобусов большого класса марки «Лотос». Они также пришли на смену старым «пазикам». Такой транспорт сможет перевозить до 92 человек. Салон оборудован всем необходимым для маломобильных пассажиров: есть специальные места, пандус и даже отдельное место для собаки-поводыря. А ещё автобус оснащен USB-зарядками для гаджетов, кондиционером и системой обогрева.

На дороги города очередная партия автобусов «Лотос» выйдет уже в начале следующей недели. Новый маршрут, по которому будет курсировать транспорт, соединит уфимскую Черниковку с аэропортом.

Радий Хабиров, Глава РБ:

«Меня радует, что частный бизнес начал вкладывать деньги в это дело, покупать новые автобусы. И с нами вместе выправлять ситуацию. Подчёркиваю, создавая комфортные условия для пассажиров».

В рамках транспортной реформы, которую инициировал Радий Хабиров, на муниципальные маршруты Башавтотранса в 2021 году поступило 220 автобусов, негосударственные компании приобрели 121 автобус средней и большой вместимости. В министерстве транспорта отметили, что частные перевозчики могут получить льготы от государства. В рамках программы «Безопасные и качественные дороги» они могут подать заявку на субсидирование ставки лизинга, и уменьшить её на 60%.

Новости Стерлитамака :: г. Стерлитамак. Стерлитамакский портал (СТЕРЛИТАМАК.РФ, СТР.РФ, СТЕРЛИТАМАК.РУ, СТР.РУ) :: Стерлитамак город

Раздел новости Стерлитамака

. Стерлитамакские новости — это обзор самых интересных событий, происходящих в городе Стерлитамаке. Новости Стерлитамака создаются не только администраторами портала, но и любым жителем, стремящимся к тому, чтобы все в Стерлитамаке были в курсе последних новостей города. Добавляя сообщение в раздел «новости Стерлитамак», каждый из нас вносит свою лепту в то, чтобы все мы были более информированы о событиях города Стерлитамака. Ведь именно новости г.Стерлитамак интересуют нас в жизни больше всего, ведь мы хотим быть в курсе всех событий, и мы не хотим пропустить важные и интереснейшие мероприятия. Добавь новость Стерлитамака сам и расскажи о ней всем гостям и жителям города Стерлитамака.

Поиск:

Самое популярное на STR.RU


Интересное на STR.RU

Витрина Стерлитамака
16. 02  Курьер
15.02  Куплю оптом кабель, провод, дорого, самовывоз
15.02  Куплю кабель и провод по максимальным ценам
15.02  Услуги электрика, электромонтаж, любой сложности
14.02  Металлические кровати армейские, раскладушки
14.02  Качественные металлические кровати, дешевые кровати
14.02  Металлические многоярусные кровати, широкий ассортимент
14.02  Широкий выбор металлических кроватей, одноярусные железные кровати
14.02  Двухъярусные кровати с металлическими спинками различной конфигурации
14.02  Полуторные кровати, Кровати железные, Кровати с ДСП спинками

Автоматическое измерение и оценка канавки с использованием данных лазерного профилирования высокого разрешения

Нарезка канавок широко используется для повышения сопротивления скольжению покрытия взлетно-посадочной полосы аэропорта в сырую погоду. Однако канавки взлетно-посадочных полос со временем изнашиваются из-за комбинированного воздействия транспортной нагрузки, климата и погоды, что создает потенциальную угрозу безопасности во время взлета и посадки самолета. Соответственно, периодические измерения и оценка характеристик канавок имеют решающее значение для обеспечения адекватного сопротивления скольжению взлетно-посадочных полос.Тем не менее, такую ​​оценку трудно осуществить из-за отсутствия достаточных технологий для выявления неглубоких или изношенных канавок и стыков плит. В этой статье предлагается новая стратегия автоматического определения канавок и стыков плит взлетно-посадочной полосы в аэропортах с использованием данных лазерного профилирования с высоким разрешением. Во-первых, фильтр на основе кластеризации K-средних и алгоритм обхода скользящего окна разработаны для обнаружения самой глубокой точки потенциальных провалов (включая шумы, истинные канавки и стыки плит). Впоследствии улучшенный фильтр скользящего среднего и алгоритмы обхода используются для определения положения левой и правой конечных точек каждого идентифицированного провала.Наконец, модифицированный эвристический метод используется для отделения стыков плиты от выявленных провалов, а затем вводится полиномиальная машина опорных векторов, чтобы отличить шумы от канавок-кандидатов (включая шумы и истинные канавки), так что ВПП на основе плит PCC может быть проведена оценка безопасности. Эффективность предложенной стратегии сравнивается с эффективностью двух других методов, и результаты показывают, что новый метод более эффективен при идентификации канавок взлетно-посадочной полосы и стыков с показателем F-меры, равным 0.98. Это исследование будет полезным для оценки безопасности канавок на взлетно-посадочных полосах в аэропортах и ​​последующего технического обслуживания и восстановления взлетно-посадочных полос в аэропортах.

Ключевые слова: Кластеризация K-средних; наивный байесовский классификатор; Машина опорных векторов; Взлетно-посадочная полоса; размер паза; точечный лазер; данные профилирования.

Контуры скорости и векторные графики внутренней циркуляции в каплях…

Контекст 1

… во вспомогательной информации проиллюстрировано несколько дополнительных контуров скорости. а Контуры и поля скорости показаны для вогнутых цилиндрических канавок на рис. 3. В этих случаях наблюдается обратная тенденция и отмечается увеличение средней скорости циркуляции. …

Контекст 2

… отмечается увеличение скорости с увеличением кривизны вогнутости. Примечательно, однако, что при радиусе капли, равном радиусу вогнутой канавки (показан на рис. 3в), скорости резко уменьшаются.Хотя это может показаться нелогичным по сравнению с другими случаями, более тщательный самоанализ обнаруживает физическую последовательность. …

Контекст 3

… настоящий теоретический анализ терпит неудачу, когда радиус капли равен (или меньше) радиусу кривизны для вогнутых систем. Это видно из рисунка 3c (а также из рисунка 6), где скорость значительно уменьшается, когда диаметр капли чуть превышает диаметр канавки. Физически это закономерное наблюдение, так как стенки канавки касаются капли со всех сторон вблизи основания, что препятствует внутреннему течению из-за сдвига на стенке….

Контекст 4

. .. во вспомогательной информации проиллюстрировано несколько дополнительных контуров скорости. а Контуры и поля скорости показаны для вогнутых цилиндрических канавок на рис. 3. В этих случаях наблюдается обратная тенденция и отмечается увеличение средней скорости циркуляции. …

Контекст 5

… отмечено увеличение скорости с увеличением кривизны вогнутости. Примечательно, однако, что при радиусе капли, равном радиусу вогнутой канавки (показан на рис. 3в), скорости резко уменьшаются.Хотя это может показаться нелогичным по сравнению с другими случаями, более тщательный самоанализ обнаруживает физическую последовательность. …

Контекст 6

… настоящий теоретический анализ терпит неудачу, когда радиус капли равен (или меньше) радиуса кривизны для вогнутых систем. Это видно из рисунка 3c (а также из рисунка 6), где скорость значительно уменьшается, когда диаметр капли чуть превышает диаметр канавки. Физически это закономерное наблюдение, так как стенки канавки касаются капли со всех сторон вблизи основания, что препятствует внутреннему течению из-за сдвига на стенке.

Создание шаблонов грувов в Logic Pro

Вы можете создавать сетки квантования, называемые шаблонами грувов , на основе ритмов аудио- или MIDI-регионов. Вы можете использовать шаблоны грувов, чтобы улавливать тонкие временные отклонения, которые придают региону его «ощущение», и применять это ощущение к другим аудио- или MIDI-регионам. Вы даже можете взять ощущение аудиорегиона и применить его к MIDI-региону, например, помогая MIDI-партии клавинета хорошо сочетаться с фанк-гитарой Apple Loop.

Примечание: Чтобы использовать аудио регион для шаблона грува, Flex должен быть активирован на дорожке, содержащей регион.

Вы также можете выбрать несколько регионов для создания шаблона грува, и все они будут вносить свои транзиенты или ноты в новый шаблон грува. Однако при наличии нескольких транзиентов или нот MIDI вокруг одной и той же музыкальной позиции только первая будет оцениваться для шаблона грува.

Совет: Двухтактные MIDI-регионы особенно хорошо подходят для грув-шаблонов, но вы можете использовать MIDI-регионы любой длины. Убедитесь, что исходный MIDI-регион действительно содержит ноту с каждым желаемым значением квантования.

Создать шаблон грува

  1. В Logic Pro выберите аудио- или MIDI-регион или регионы, из которых вы хотите создать шаблон грува.

    Если вы выберете несколько регионов, переходные процессы или ноты из всех выбранных регионов будут использованы для шаблона грува. Однако при наличии нескольких транзиентов или нот MIDI вокруг одной и той же музыкальной позиции только первая будет оцениваться для шаблона грува.

  2. В инспекторе регионов выберите «Квантизация» > «Создать шаблон грува» (или используйте соответствующую горячую команду).

    Новый шаблон грува появляется в нижней части всплывающего меню Quantize. По умолчанию шаблон канавки получает имя выбранной области (первой выбранной области, если выбрано несколько областей).

  3. Чтобы применить новый шаблон грува, выберите регион или регионы, к которым он будет применен, затем выберите шаблон грува во всплывающем меню «Квантизация» в инспекторе регионов.

Важно: Исходный аудио- или MIDI-регион (или регионы), используемые для создания шаблона грува, должны оставаться в вашем проекте. Если вы удалите исходный регион из проекта, имя шаблона грува останется во всплывающем меню Quantize, но выбор имени не даст результата.

Удаление шаблонов грувов из всплывающего меню «Квантизация»

  1. В инспекторе Logic Pro Region откройте всплывающее меню «Квантизация» любого региона и выберите шаблон грува.

  2. Снова откройте всплывающее меню Quantize и выберите «Удалить шаблон грува из списка» (или используйте соответствующую горячую команду).

    Выбранный исходный регион удаляется из списка возможных шаблонов квантования, удаляя его из всплывающего меню Quantize. Регион не удаляется.

    Без изменения фактического квантования этой области (или любой другой области, которая может использовать этот шаблон грува), ранее выбранный шаблон грува удаляется, и для региона устанавливается значение квантования «выкл. » (3840).

Совместное использование шаблона канавки между проектами

  1. В Logic Pro скопируйте или создайте исходные регионы в одном проекте.

  2. Назовите эти регионы с помощью инструмента «Текст».

  3. Откройте всплывающее меню Quantize, затем выберите Make Groove Template для каждого исходного региона (или используйте соответствующую горячую команду).

  4. Упакуйте все эти регионы в папку (и переименуйте папку Grooves , например).

  5. Выберите «Файл» > «Сохранить как шаблон».

Используйте этот шаблон в качестве отправной точки вашего проекта всякий раз, когда вы хотите получить доступ к этим шаблонам квантования.

Создание количественной ПЦР в реальном времени на основе связывающего зонда малой бороздки для обнаружения Borrelia burgdorferi sensu lato и дифференциации Borrelia spielmanii с помощью osp A-специфичной традиционной ПЦР | Parasites & Vectors

Культуры спирохет для последующего выделения ДНК

Спирохеты культивировали для получения геномной ДНК для установления родо- и видоспецифичных Borrelia ПЦР и для определения чувствительности и специфичности. Кроме того, ДНК различных видов Borrelia burgdorferi sl-комплекса служила в качестве положительного контроля для видоспецифичной ПЦР. Культивировали следующие микроорганизмы: B. burgdorferi ss (штамм B31 и LW2), B. afzelii (штамм NE632 и ZQ1), B. garinii (штамм 1B29 и A87SB), B. valaisiana (штамм VS116), B. spielmanii , Treponema sokranskiy , Leptospira grippothyphosa и L.допрашиваемые . Эти спирохеты культивировали в стерильной отфильтрованной модифицированной среде Барбура-Стеннера-Келли (среда BSKH, Sigma-Aldrich, Тауфкирхен, Германия) при 37°С в культуральных колбах на 50 мл (Sarstedt, Нюрмбрехт, Германия). Культуры контролировали два раза в неделю с помощью темнопольного микроскопа и добавляли 15 мл свежей среды. Через 14 дней культуры центрифугировали при 8000× g в течение 10 мин и полученные осадки разбавляли 50 мкл стерильно отфильтрованного PBS. Геномную ДНК выделяли с использованием набора QIAamp ® DNA Blood Mini Kit (Quiagen, Hilden) в соответствии с инструкциями производителя и элюировали 100 мкл деионизированного H 2 O.

Родоспецифичная количественная ПЦР в реальном времени для обнаружения

Borrelia burgdorferi sl

Для родоспецифичной детекции комплекса B. burgdorferi sl был разработан зонд TaqMan™ для связывания малой бороздки (MGB) и соответствующие праймеры. с использованием программного обеспечения Primer Express™ (Applied Biosystems, Дармштадт, Германия). В качестве целевой последовательности был выбран межгенный спейсер (IGS) 5S-23S, а дизайн основан на видах, признанных в Европе, при этом при выборе последовательности учитывалось разнообразие.Выбраны следующие последовательности (номер доступа GenBank и происхождение в скобках): B. burgdorferi ss (AF497981, Чехия; DQ393308, Франция; AY583237, Россия), B. afzelii (AF497984, Чехия; DQ111066, Франция; DQ020300). , Россия), B. garinii (AF497993, Чехия; AY163784; Латвия; AY163784, Россия), B. valaisiana (AF497988, Чехия; AF497989, Чехия; U78150, Нидерланды) и B. lusitaniae (AB091801, Турция; AB091799, Турция; DQ111065, Франция).

Разработанные последовательности праймеров и соответствующий зонд TaqMan™-MGB также были проверены на соответствие последовательностям B. spielmanii (AF497994, Чешская Республика; AM160603, Германия; AM183337, Франция) и B. bissettii (FJ431140, Чешская Республика). ; FJ431142, Чехия; EF015627 США) после наличия последовательности в базе данных Национального центра биотехнологической информации (NCBI). Нуклеотидные последовательности праймеров и зондов приведены в таблице 4. Зонд был приобретен у Applied Biosystems (Дармштадт, Германия), а праймеры — у Invitrogen (Карлсруэ, Германия).

Таблица 4. Праймеры и зонды, используемые для родоспецифичной количественной ПЦР в реальном времени, видоспецифичной традиционной ПЦР и создания стандартов плазмид упомянуто боррелий культур. Реакцию ставили с использованием Brilliant ® QPCR Master Mix (Stratagene, Heidelberg, Germany): 8,49 мкл деионизированного H 2 O, 12,50 мкл буфера Brilliant (содержащего полимеразу SureStart ® Taq ), 0. 75 мкл прямого и обратного праймера (по 100 мкМ каждый), соответственно, 0,13 мкл зонда (50 мкМ), 0,38 мкл разбавленного ROX в качестве эталонного красителя (разведение 1:500) и 2 мкл матрицы. Условия термоциклирования были следующими: 10 мин при 94°С, затем 40 циклов по 20 с при 94°С, 60 с при 56°С и 45 с при 72°С. Эксперименты и анализ данных проводили с использованием системы количественной ПЦР Mx3005 Multiplex (Stratagene, Heidelberg, Germany). Продукты амплификации анализировали с помощью гель-электрофореза (2% агарозные гели). Полосы вырезали, лигировали в вектор pCR ® 4-TOPO ® с последующей трансформацией клеток Escherichia coli One Shot ® TOP 10 (набор для секвенирования TOPO TA ® ; Invitrogen, Karlsruogen Германия).Плазмидную ДНК получали с использованием набора NucleoSpin ® Plasmid Kit (Macherey-Nagel, Dueren, Germany) в соответствии с рекомендациями производителя и секвенировали в лабораториях SEQLAB Sequence (Göttingen, Germany). Последовательности были проверены с помощью поиска BLAST в неизбыточной базе данных NCBI http://www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST/.

Плазмида, содержащая проверенную последовательность штамма NE632 B. afzelii , служила в качестве стандарта плазмиды в проспективных анализах кПЦР для обеспечения эффективной амплификации ПЦР и обнаружения флуоресцентного сигнала, а также для построения стандартных кривых для определения количества копий IGS и таким образом, для определения нагрузки Borrelia на отдельных клещей.Для этих стандартов готовили 10-кратные серийные разведения плазмид в диапазоне от 10 0 до 10 6 копий на реакцию.

Несмотря на то, что комбинация праймер/зонд идеально соответствовала IGS-последовательности B. burgdorferi ss, B. afzelii , B. garinii , B. bissettii и B. valaisiana , было одно несоответствие ss в положении 8 последовательности обратного праймера (C вместо T) с B. spielmanii и B. лузитанские . Чтобы проверить, влияет ли это несоответствие на обнаружение, выполняли циклы количественной ПЦР с использованием стандарта плазмиды, содержащего целевую IGS-последовательность B. spielmanii и B. lusitaniae в качестве матрицы.

Специфичность и чувствительность родоспецифичной количественной ПЦР в реальном времени

Для проверки специфичности выделенная ДНК культивируемых родственных спирохет ( Treponema sp. и Leptospira spp.) была проверена на перекрестную реактивность в анализах количественной ПЦР.Помимо этого контроля, в качестве отрицательного контроля также использовали геномную ДНК 100 выведенных в лаборатории личинок I. ricinus . Эти клещи были обработаны таким же образом, как и клещи, собранные в полевых условиях, описанные ниже.

Тестирование чувствительности проводили путем амплификации стандарта плазмиды, серийно разбавленного от 10 0 до 10 6 копий. Кроме того, ДНК различных разведений из культивируемых B. afzelii спирохет (штамм NE632), а также лабораторно-отрицательных с шипами позволила получить личинок, нимф и взрослых особей I.ricinus были амплифицированы для изучения влияния клещевого материала на чувствительность количественной ПЦР.

Дуплексная родоспецифичная количественная ПЦР в реальном времени, включая положительный контроль выделения ДНК

B. burgdorferi sl-комплекса. Комбинация праймер положительный контроль/TaqMan™-MGB-зонд была разработана на основе ITS2-последовательности I.ricinus (инвентарный номер GenBank D88884) с использованием программного обеспечения AlleleID ® 7 (версия 7.01., Premier Biosoft International, Пало-Альто, США). Нуклеотидные последовательности праймеров и соответствующих зондов TaqMan™-MGB перечислены в таблице 4. Зонд был приобретен у Applied Biosystems (Дармштадт, Германия), а праймеры — у Invitrogen (Карлсруэ, Германия). Чтобы обеспечить обнаружение трех наиболее распространенных видов млекопитающих Ixodes spp. питание млекопитающими в Центральной Европе ( I.ricinus , I. hexagonus и I. canisuga ), комбинация праймер-зонд тестировалась на геномной ДНК следующих особей: 280 I. ricinus (9 личинок, 134 нимфы, 71 взрослый самец и 66 взрослые самки), 8 I. hexagonus (взрослые самки) и 8 I. canisuga (1 личинка и 7 взрослых самок).

Для подтверждения обнаружения сигнала количественной ПЦР геномная ДНК каждых восьми особей трех особей Ixodes spp. амплифицировали с различными комбинациями праймеров, охватывающими различную длину последовательности Ixodes ITS2.Используемые прямые праймеры: 5′-TTC TTT TGG CGT GGA TGT TGT TCG-3′, 5′-TGC GTC GTA GCC TTC-3′ и 5′-CTT CTT GCT CGA AGG AGA G-3′. Использованными обратными праймерами были: 5′-GCA TCG CTT TCG ATT CGA CAA AAA-3′ и 5′-GGG GGT TGT CTC GCC TGA TGT G-3′. Нуклеотидные данные, полученные путем секвенирования продуктов ПЦР, клонированных в pCR ® 4-TOPO ®, были отправлены в базу данных GenBank под номерами доступа GQ330512 — GQ330535. Последовательность, депонированная в соотв. нет. GQ330512 ( I. ricinus , амплифицированный с комбинацией праймеров 5′-TTC TTT TGG CGT GGA TGT TGT TCG-3′ и 5′-GGG GGT TGT CTC GCC TGA TGT G-3′) представлял собой положительный контрольный плазмидный стандарт в последующем КПЦР работает.

Установка для родоспецифичной количественной ПЦР была адаптирована, поскольку для объема Ixodes специфичных для ITS2 праймеров и зонда количество деионизированного H 2 O было уменьшено. Помимо использованного Brilliant ® QPCR Master Mix (Stratagene, Heidelberg, Germany), для установки qPCR был протестирован ABsolute™ Blue QPCR low Rox Mix (Thermo Fisher Scientific, Гамбург, Германия). Температурный профиль КПЦР оставался неизменным.

Обычная видоспецифическая ПЦР для анализа

B.Распределение видов burgdorferi sl

Обычные видоспецифические ПЦР можно использовать для дифференциации видов комплекса B. burgdorferi sl. Его проводили для каждого собранного клеща (описанного ниже), положительного в родоспецифичной количественной ПЦР. Виды B. burgdorferi ss, B. afzelii, B. garinii и B. valaisiana были обнаружены с помощью ранее описанных специфических праймеров, нацеленных на ген субъединицы РНК-полимеразы B ( rpo B) [21].Для обнаружения B. spielmanii были разработаны праймеры, специфичные для гена белка внешней поверхности A ( osp A), с использованием программы Lasergene PrimerSelect (DNASTAR, версия 5.06; GATC Biotech, Констанц, Германия) в качестве программного обеспечения для конструирования праймеров. Для дизайна праймеров использовали следующие последовательности osp A из европейских изолятов B. spielmanii : DQ133517 (Франция), AF102057 (Нидерланды) и EU545183 (Турция). Нуклеотидные последовательности всех видоспецифичных праймеров, поставляемых Invitrogen (Карлсруэ, Германия), перечислены в таблице 4.Специфичность разработанных праймеров osp A, а также опубликованных праймеров rpo B тестировали с использованием ДНК из B. spielmanii , B. burgdorferi ss, B. afzelii, B. garinii и B . .valaisiana и другие родственные спирохеты ( Treponema spp. и Leptospira spp.), культивированные, как описано выше. Для B. bissettii и B. lusitaniae специфичность проверяли посредством выравнивания последовательностей (Align Plus 5, vs.5,04; Научное и образовательное программное обеспечение, Cary, США) на основе акк. DQ393323 и EF457558 соответственно. Информация о последовательности для B. bavariensis sp. ноябрь osp A отсутствовали в базах данных. Кроме того, специфичность была проверена на 100 лабораторно выведенных личинках I. ricinus и дополнительно с помощью Nucleotide BLAST http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi. Продукт ПЦР, полученный в результате амплификации ДНК B.spielmanii , клонировали и секвенировали для проверки.

Установка ПЦР для традиционной видоспецифичной ПЦР была следующей: 3 мкл матрицы добавляли к 14,2 мкл деионизированного H 2 O, 2,5 мкл 10-кратного буфера, 2,5 мкл 10-кратного буфера для ПЦР CoralLoad, 0,5 мкл MgCl 2 (50 мМ), 0,5 мкл дезоксирибонуклеотидтрифосфатов (по 10 мМ каждого), 0,8 мкл геноспецифического прямого и обратного праймера (по 10 мкМ каждого) соответственно и 0,2 мкл полимеразы Taq (5 ед. /мкл; Qiagen, Hilden, Германия). ). ПЦР-циклирование (40 циклов) проводили с использованием для B. burgdorferi ss, B.afzelii, B. garinii и B. valaisiana температуры отжига, описанные Lee et al. [21] и 57°C для B. spielmanii . Использовали следующий температурный профиль: начальная денатурация при 94°С в течение 4 мин, денатурация при 94°С в течение 30 с, отжиг в течение 30 с, удлиняющие праймеры при 72°С в течение 30 с и окончательная элонгация в течение 4 мин.

Анализ инфекций

B. burgdorferi sl у клещей города Ганновер

В городе Ганновере, столице федеральной земли Нижняя Саксония, методом флажков было собрано 1000 клещей в зонах отдыха с последующим исследованием инфицирование вирусом B.burgdorferi sl-комплекс. Кроме того, метод микроскопии темного поля (DFM) следует сравнить с установленным методом КПЦР.

Для проведения DFM-анализа каждого отобранного клеща помещали в индивидуальную пробирку и механически гомогенизировали с помощью одноразовых полистироловых гомогенизаторов (Roth, Карлсруэ, Германия) в 50 мкл стерильного отфильтрованного фосфатно-солевого буфера (PBS; pH 7,2). 10 мкл гомогенизированного раствора помещали на предметное стекло и полностью исследовали на наличие спирохет с помощью микроскопа DFM (Zeiss, Йена, Германия).Если была обнаружена одна спирохета, проба определялась как положительная. После анализа DFM флаконы с гомогенизированным раствором клещей хранили при -75°C до выделения ДНК, как описано выше.

При проведении родовой количественной ПЦР титрационные микропланшеты содержали дубликаты каждого образца клеща, а также серийно разведенные плазмидные стандарты для получения стандартных кривых и контроля без матрицы. Каждый клещ, положительный в родоспецифичной количественной ПЦР, был исследован с помощью видоспецифичной традиционной ПЦР для получения информации о распространении видов.

Анализ инфекций

Borrelia у клещей, собранных у ежей

Помимо ганноверских клещей, 238 клещей, собранных у ежей в 23 различных местах федеральных земель Шлезвиг-Гольштейн, Северный Рейн-Вестфалия, Саксония, Баден-Вюртемберг, Бавария и Берлин был проанализирован на инфицирование B. burgdorferi sl с помощью родоспецифичной количественной ПЦР в реальном времени, а положительные клещи были проанализированы на распределение видов с помощью обычной ПЦР.

IRJET-Запрошенная вами страница не найдена на нашем сайте , февраль 2022 г. Идет публикация…

Browse Papers


IRJET Получил «импакт-фактор научного журнала: 7,529» за 2020 год.

Подтвердить здесь


IRJET приглашает статьи из различных технических и научных дисциплин для тома 9, выпуск 2 (февраль 2022 г.)..

Browse Papers


IRJET Получил «импакт-фактор научного журнала: 7,529» за 2020 год.

Подтвердить здесь


IRJET приглашает статьи из различных технических и научных дисциплин для тома 9, выпуск 2 (февраль 2022 г.)..

Browse Papers


IRJET Получил «импакт-фактор научного журнала: 7,529» за 2020 год.

Подтвердить здесь


IRJET приглашает статьи из различных технических и научных дисциплин для тома 9, выпуск 2 (февраль 2022 г. )..

Browse Papers


IRJET Получил «импакт-фактор научного журнала: 7,529» за 2020 год.

Подтвердить здесь


IRJET приглашает статьи из различных технических и научных дисциплин для тома 9, выпуск 2 (февраль 2022 г.)..

Browse Papers


IRJET Получил «импакт-фактор научного журнала: 7,529» за 2020 год.

Подтвердить здесь


IRJET приглашает статьи из различных технических и научных дисциплин для тома 9, выпуск 2 (февраль 2022 г.)..

Browse Papers


IRJET Получил «импакт-фактор научного журнала: 7,529» за 2020 год.

Подтвердить здесь


IRJET приглашает статьи из различных технических и научных дисциплин для тома 9, выпуск 2 (февраль 2022 г.)..

Browse Papers


IRJET Получил «импакт-фактор научного журнала: 7,529» за 2020 год.

Подтвердить здесь


IRJET приглашает статьи из различных технических и научных дисциплин для тома 9, выпуск 2 (февраль 2022 г. )..

Browse Papers


IRJET Получил «импакт-фактор научного журнала: 7,529» за 2020 год.

Подтвердить здесь


Стрим Вселенная Ragdoll: Witches Groove от LightningSplash

ЧТО

как-

сексселлент

Мне всегда нравился этот

круто, что эта музыка даже не имеет звука, который используется в большинстве музыкальных композиций Хэллоуина, но все же имеет атмосферу

Если честно, эта песня для меня лучше, чем холлоби

Бог геймеров

Халлобби

такой классный такой любимый такой любимый такой классный

Комментарий от Dok

это боп

Эта игра — единственная причина, по которой у меня есть аккаунт в роблоксе

Огонь

хороший

СООО ПЕНГ

Я испортил 69 комментариев 😎

А я думал, что Халлобби хорош. .. УХ ТЫ!

ВАУ

Прошли месяцы, и только сейчас я заметил, что там написано ведьмы, а не роща

подождите, звучит так, как будто это было так давно фнаф

красивая

это эпический момент

туз

так хорошо

эта песня хороша, потому что она просто сильнее тебя, но в ремиксе

Все песни до сих пор мне нравились, все корн-дог чилл-вейв и теперь эта песня каждая песня просто ахинея

или

чистый

хорошая песня это хорошо

извините, что заставил ждать

Хорошая музыка, но я очень хочу сыграть эту песню в другой игре роблокс. Какой номер песни в роблоксе?

Высокопроизводительная безоболочная и трехмерная фокусировка микрочастиц с использованием микроканала с дугообразными массивами канавок

  • Adams, A. A. et al. Высокоэффективное выделение циркулирующих опухолевых клеток из цельной крови и подсчет без использования меток с использованием микрофлюидики на полимерной основе со встроенным датчиком электропроводности. Журнал Американского химического общества 130 , 8633–8641 (2008).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • Награт, С.и другие. Выделение редких циркулирующих опухолевых клеток у онкологических больных с помощью технологии микрочипов. Природа 450 , 1235–1239 (2007).

    ОБЪЯВЛЕНИЕ КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • Хосино, К. и др. Иммуномагнитная детекция циркулирующих опухолевых клеток на основе микрочипов. Lab on a Chip 11 , 3449–3457 (2011).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • Уайтсайдс, Г.М. Истоки и будущее микрофлюидики. Природа 442 , 368–373 (2006).

    ОБЪЯВЛЕНИЕ КАС Google Scholar

  • Бхагат А.А.С. и др. Микрофлюидика для разделения клеток. Медицинская и биологическая инженерия и вычислительная техника 48 , 999–1014 (2010).

    Google Scholar

  • Wang, Z. & Zhe, J. Последние достижения в области манипулирования частицами и каплями для устройств «лаборатория на чипе», основанных на поверхностных акустических волнах. Lab on a Chip 11 , 1280–1285 (2011).

    КАС пабмед Google Scholar

  • Четин Б. и Ли Д. Диэлектрофорез в технологии микрофлюидики. Электрофорез 32 , 2410–2427 (2011).

    ПабМед Google Scholar

  • Forbes, T.P. & Forry, S.P. Микрожидкостное магнитофоретическое разделение иммуномагнитно меченных редких клеток млекопитающих. Лаборатория на чипе 12 , 1471–1479 (2012).

    КАС пабмед Google Scholar

  • Адамс, Дж. Д. и др. Высокопроизводительное устройство для микроканального акустофореза с регулируемой температурой, созданное с помощью быстрого прототипирования. Журнал микромеханики и микротехники 22 , 075017 (2012).

    ОБЪЯВЛЕНИЕ Google Scholar

  • Симонне, К.и Гройсман, А. Двумерная гидродинамическая фокусировка в простом микрожидкостном устройстве. Письма по прикладной физике 87 , 114104 (2005).

    ОБЪЯВЛЕНИЕ Google Scholar

  • Анна С. Л., Бонту Н. и Стоун Х. А. Формирование дисперсий с помощью «фокусировки потока» в микроканалах. Письма по прикладной физике 82 , 364–366 (2003).

    ОБЪЯВЛЕНИЕ КАС Google Scholar

  • Найт, Дж.Б., Вишванат А., Броди Дж. П. и Остин Р. Х. Гидродинамическая фокусировка на кремниевом чипе: смешивание нанолитров за микросекунды. Physical Review Letters 80 , 3863 (1998).

    ОБЪЯВЛЕНИЕ КАС Google Scholar

  • Наваз А. А. и др. Субмикрометровая точность, трехмерная (3D) гидродинамическая фокусировка посредством «микрожидкостного дрейфа». Lab on a Chip 14 , 415–423 (2014).

    КАС пабмед Google Scholar

  • Парк, Х. Ю. и др. Достижение равномерного смешивания в микрофлюидном устройстве: гидродинамическая фокусировка перед смешиванием. Аналитическая химия 78 , 4465–4473 (2006).

    КАС пабмед Google Scholar

  • Чанг, А. Дж., Госсет, Д. Р. и Ди Карло, Д. Трехмерная, безоболочная и высокопроизводительная инерционная фокусировка микрочастиц с помощью вторичных потоков, вызванных геометрией. Малый 9 , 685–690 (2013).

    КАС пабмед Google Scholar

  • Ди Карло, Д. Инерционная микрофлюидика. Лаборатория на чипе 9 , 3038–3046 (2009 г.).

    КАС пабмед Google Scholar

  • Ди Карло Д., Иримия Д., Томпкинс Р. Г. и Тонер М. Непрерывная инерционная фокусировка, упорядочение и разделение частиц в микроканалах. Труды Национальной академии наук 104 , 18892–18897 (2007).

    ОБЪЯВЛЕНИЕ КАС Google Scholar

  • Сударсан А. П. и Угаз В. М. Мультивихревое микросмешивание. Труды Национальной академии наук 103 , 7228–7233 (2006).

    ОБЪЯВЛЕНИЕ КАС Google Scholar

  • Амини Х., Ли В. и Ди Карло Д. Инерциальная микрофлюидная физика. Лаборатория на чипе 14 , 2739–2761 (2014).

    КАС пабмед Google Scholar

  • Чжоу Дж. и Папаутский И. Основы инерционной фокусировки в микроканалах. Лаборатория на чипе 13 , 1121–1132 (2013).

    КАС пабмед Google Scholar

  • Ли М.Г., Чой С. и Парк Дж.-К. Инерционная сепарация в матричном микроканале сжатия-расширения. Journal of Chromatography A 1218 , 4138–4143 (2011).

    КАС пабмед Google Scholar

  • Zhang, J. et al. Основы и приложения инерционной микрофлюидики: обзор. Lab on a Chip 16 , 10–34 (2016).

    КАС пабмед Google Scholar

  • Ли, М. Г., Чой, С. и Парк, Дж.-К. Смеситель для быстрого ламинирования с использованием микроканала массива сжатия-расширения. Письма по прикладной физике 95 , 051902 (2009).

    ОБЪЯВЛЕНИЕ Google Scholar

  • Чжан, Дж., Ли, М., Ли, В. и Алиси, Г. Инерционная фокусировка в прямом канале с асимметричными массивами полостей расширения-сжатия с использованием двух вторичных потоков. Журнал микромеханики и микротехники 23 , 085023 (2013).

    ОБЪЯВЛЕНИЕ Google Scholar

  • Амини, Х. и др. Течение инженерной жидкости с использованием секвенированных микроструктур. Связь с природой 4 , 1826 (2013).

    ОБЪЯВЛЕНИЕ пабмед Google Scholar

  • Сегре Г. Радиальные смещения частиц в потоке Пуазейля суспензий. Природа 189 , 209–210 (1961).

    ОБЪЯВЛЕНИЕ Google Scholar

  • Сегре Г. и Зильберберг А. Поведение макроскопических твердых сфер в потоке Пуазейля. Часть 2.Экспериментальные результаты и интерпретация. Journal of Fluid Mechanics 14 , 136–157 (1962).

    ОБЪЯВЛЕНИЕ МАТЕМАТИКА Google Scholar

  • Rafeie, M., Zhang, J., Asadnia, M., Li, W. & Warkiani, M.E. Мультиплексирование наклонных спиральных микроканалов для сверхбыстрого разделения плазмы крови. Лаборатория на чипе 16 , 2791–2802 (2016).

    КАС пабмед Google Scholar

  • Чой Ю.-С., Сео, К.-В. и Ли, С.-Дж. Боковая и кросс-латеральная фокусировка сферических частиц в квадратном микроканале. Lab on a Chip 11 , 460–465 (2011).

    КАС пабмед Google Scholar

  • Чжан Дж., Ли В., Ли М., Алиси Г. и Нгуен Н.-Т. Инерционная фокусировка частиц и ее механизм в змеевидном микроканале. Микрофлюидика и нанофлюидика 17 , 305–316 (2014).

    КАС Google Scholar

  • Асмолов Е. С. Инерционная подъемная сила на сферической частице в плоском течении Пуазейля при большом канальном числе Рейнольдса. Journal of Fluid Mechanics 381 , 63–87 (1999).

    ОБЪЯВЛЕНИЕ КАС МАТЕМАТИКА Google Scholar

  • Бхагат А. А.С., Кунтэговданахалли С.С. и Папаутски И. Инерционная микрофлюидика для непрерывной фильтрации и экстракции частиц. Микрофлюидика и нанофлюидика 7 , 217–226 (2009).

    КАС Google Scholar

  • Gerlach, T. Микродиффузоры в качестве динамических пассивных клапанов для микронасосов. Датчики и приводы A: Physical 69 , 181–191 (1998).

    КАС Google Scholar

  • Мартел, Дж. М. и Тонер, М. Динамика инерционной фокусировки в спиральных микроканалах. Физика жидкостей (с 1994 г. по настоящее время) 24 , 032001 (2012 г.).

    ОБЪЯВЛЕНИЕ Google Scholar

  • Ли, М. и др. Простой и экономичный метод изготовления интегрированных электронно-микрожидкостных устройств с использованием слоя PDMS с лазерным рисунком. Микрофлюидика и нанофлюидика 12 , 751–760 (2012).

    КАС Google Scholar

  • Ян С.и другие. Выделение плазмы из крови с помощью диэлектрофорезно-активного гидрофоретического устройства. Лаборатория на чипе 14 , 2993–3003 (2014).

    КАС пабмед Google Scholar

  • Нама, Н. и др. Численное исследование акустофоретического движения частиц в микроканале ПДМС, возбуждаемого поверхностными акустическими волнами. Лаборатория на чипе 15 , 2700–2709 (2015).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • Нама, Н., Хуанг, П.-Х., Хуанг, Т.Дж. и Костанцо, Ф. Исследование моделей акустических потоков вокруг колеблющихся острых краев. Lab on a Chip 14 , 2824–2836 (2014).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • Мюллер, П. Б., Барнкоб, Р., Дженсен, М. Дж. Х. и Бруус, Х. Численное исследование акустофореза микрочастиц, вызванного силами акустического излучения и силами сопротивления, вызванными потоком. Lab on a Chip 12 , 4617–4627 (2012).

    КАС пабмед Google Scholar

  • Ши Дж., Мао X., Ахмед Д., Коллетти А. и Хуанг Т. Дж. Фокусировка микрочастиц в микрожидкостном канале с помощью стоячих поверхностных акустических волн (SSAW). Lab on a Chip 8 , 221–223 (2008).

    КАС пабмед Google Scholar

  • Чу, Х., Дох, И. и Чо, Ю.-Х. Трехмерный (3D) канал фокусировки частиц с использованием положительного диэлектрофореза (pDEP), управляемый диэлектрической структурой между двумя плоскими электродами. Lab on a Chip 9 , 686–691 (2009).

    КАС пабмед Google Scholar

  • Парк, Дж.

  • Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован.