На газель изотермический фургон: Изотермический фургон Газель Бизнес 3302 от ТКЦ ГАЗ АТО

>

Изотермический фургон Газель Бизнес 3302 от ТКЦ ГАЗ АТО

Данный вид спецтранспорта предназначается для транспортировки грузов, для сохранности которых необходимо поддерживать заданные параметры температуры. Замороженное мясо, охлажденные ягоды и фрукты, медикаменты — все это требует транспортировки в закрытом объеме с автономным температурным режимом внутри.

Предлагаемый нашей компанией, выполненный на базе ГАЗ-3302 (Газель) изотермический фургон  отвечает всем требованиям, предъявляемым к условиям транспортировки  даже самых чувствительных грузов и на значительные расстояния:

  • Надежность. Высокий уровень теплоизоляции грузового объема, стабильность работы поставляемого в различных вариантах комплектации холодильного оборудования, проверенное временем шасси ГАЗ-3302 – все это делает изотермический фургон от ЗАО «ТКЦ ГАЗ АТО» по-настоящему надежным средством транспортировки скоропортящихся грузов.
  • Маневренность.
    Хорошие показатели управляемости и разумные габаритные размеры в сочетании со значительной вместительностью и грузоподъемностью, которыми характеризуется транспорт на базе автомобиля Газель обеспечивают изотермическому фургону максимальную производительность как в условиях крупного города, так и при междугородних перевозках.


Варианты комплектации


Выпускаемый нашей компанией на рынок изотермический фургон на базе ГАЗ-3302 Газель выпускается в двух основных вариантах исполнения:

  • Закладной изотермический фургон. Характеризуется меньшей степенью теплоизоляции, которая оптимальна для транспортировки скоропортящихся продуктов на сравнительно короткие дистанции (внутри одного среднего или крупного города или от райцентра к периферии района). Имеет смысл приобрести именно такую комплектацию и в случае, если для вас важно, сколько весит изотермический фургон на Газель. Меньшая масса такого фургона обеспечивает несколько большую полезную грузоподъемность.
  • Изотермические фургоны на базе ГАЗ-3302 Газель, выполненные по технологии «сэндвич». Такой транспорт обладает значительно большей степенью теплоизоляции, что позволяет осуществлять гораздо более продолжительные перевозки. Конструкция изотермического фургона в данном исполнении более жесткая, но и масса его более значительна, чем в закладном варианте.

Изотермический фургон на базе ГАЗель NEXT 7 местный (фермер)

Изотермический фургон на базе ГАЗель NEXT 7 местный (фермер) — ГАЗ-Восточный Ветер

Главная » Модельный ряд ГАЗ » Автомобили ГАЗель NEXT » Изотермический фургон на базе ГАЗель NEXT 7 местный (фермер)

Изотермические фургоны предназначены для перевозки в охлажденном виде скоропортящихся пищевых продуктов и медицинских препаратов, требующих поддержания стабильной температуры.
На выбор можно заказать автомобиль как на стандартной, так и на удлиненной базе, с различными типами фургонов и фурнитуры.


Для получения конкретной информации о возможности изготовления и конечной стоимости необходимо техническое задание на автомобиль со стороны клиента.

Главные преимущества :

  1. Доступная цена
  2. Отличная маневренность
  3. Хорошая ремонтопригодность
  4. Низкая стоимость обслуживания
  5. Надежность

ГАЗЕЛЬ NEXT ФЕРМЕР изотермический фургон

Транспортировка грузов, которые нуждаются в сохранении определенной температуры и соблюдении санитарных норм, осуществляется с помощью изотермического фургона. Вы можете купить новую ГАЗель НЕКСТ фермер с изотермическим фургоном в автосалоне «Восточный Ветер». Акции, спецпредложения и скидки сделают цену ниже, а покупку выгоднее.

ГАЗель НЕКСТ фермер – грузовой малотоннажный автомобиль нового поколения, отвечающий всем требованиям эргономики и техническим потребностям автовладельцев. Двухрядная просторная кабина сконструирована таким образом, что водитель во время даже длительной дороги устает значительно меньше, чем в других автомобилях. Все дело в полном усовершенствовании технических характеристик ГАЗели: использование немецкого сцепления мирового бренда SACHS, двухконтурной тормозной системы с гидравлическим приводом и вакуумным усилителем, отличная адаптация к российским дорогам благодаря установке двухрычажной независимой передней подвески и многое другое. Мягкое, плавное и комфортное управление автомобиля достигнуто оборудованием руля гидроусилителем, а так же возможностью регулировки угла рулевой колонки. Регулируемые сиденья, круиз-контроль, аудиоподготовка, современная панель управления, бортовой компьютер – и это еще далеко не все характеристики новой ГАЗели НЕКСТ фермер. Приходите в «Восточный Ветер», и наши высококвалифицированные менеджеры ответят на все Ваши вопросы.

Конструкция изотермического фургона может быть каркасной и бескаркасной (из «сэндвич-панелей»). Каркасный автофургон состоит из стального профиля, обшитого снаружи листами плакированного металла. Внутри кузов оббит специальным пищевым железом для соблюдения регламента по перевозке скоропортящихся продуктов питания. Для того, чтобы автофургон сохранял внутри определенную температуру, его утепляют пенополистиролом. Бескаркасный метод отличается тем, что скрепленные между собой металлические листы путем вакуумной склейки могут удерживать необходимую температуру в течение более долгого времени. Более того, на базе изотермического фургона, изготовленного из «сэндвич-панелей», Вы можете установить холодильное оборудование, способное охлаждать до -20 градусов. Такой фургон называется рефрижератор.

ГАЗель НЕКСТ
фермер
изотермический фургон
2 метра
ГАЗель НЕКСТ
фермер
изотермический фургон
3 метра
ГАЗель НЕКСТ
фермер
изотермический фургон
4 метра
Габаритные размеры: длина/ширина/высота по кабине, мм5630/2068/21376220/2068/21377380/2068/2137
Внутренние габаритные размеры грузовой платформы (длина/ширина/высота), мм2066/1978/20903040/1978/20904200/1978/2090
Объем кузова, куб. м10,915,118
Грузоподъемность, кгДо 1200До 1200До 1150
Возможность полноприводного исполнениянетнетнет
Cummins ISF2.8s4129PEvotech 2.7 — бензиновый
Количество цилиндров44
Система питанияCommon Rail Boschкомплексная микропроцессорная система управления впрыском топлива и зажиганием
Рабочий объем, куб. см28002690
Номинальная мощность нетто, кВТ, (л.с.)88,3 (120)78,5 (106,8)

Возможные опции:

  • Блокируемый дифференциал
  • Тормозная система с АБС
  • Коробка передач 330 H.м
  • Кондиционер

 

Возможные комплектации:

Базовое исполнение

ГУР, сигнализатор открытого положения двери, стабилизаторы передний и задний, регулируемое освещение приборной панели, бортовой компьютер, подогрев боковых зеркал, электростеклоподъемники, аудиоподготовка, бачок омывателя емкостью 5л.

, центральный замок, водительское сидение с регулировкой и подлокотником, рулевая колонка с регулировкой по высоте, утеплитель радиатора, прикуриватель, комплект инструмента,
круиз-контроль для дизельных двигателей.

Комфорт 1

В дополнение к составу базовой комплектации в данную комплектацию включены:

  • противотуманные фары
  • магнитола
  • электропривод наружных зеркал заднего вида
  • сидение «Люкс» с подогревом и поясничным подпором

Комфорт 2

В дополнение к составу базовой комплектации в данную комплектацию включены:

  • противотуманные фары
  • магнитола
  • электропривод наружных зеркал заднего вида
  • сидение «Люкс» с подогревом и поясничным подпором
  • предпусковой подогреватель
  • аккумуляторная батарея повышенной емкости 85 А·ч

ГДЕ КУПИТЬ ИЗОТЕРМИЧЕСКИЙ ФУРГОН НА БАЗЕ ГАЗ A22R22

Изотермический фургон на шасси 7-местной ГАЗели НЕКСТ Вы можете купить 2-х, 3-х и 4-х метров. Изотермический фургон на базе ГАЗ-A22R22 поможет Вам заработать быстро и с комфортом!

Наши менеджеры всегда рады ответить на все интересующие вопросы и готовы помочь в выборе нового автомобиля с учетом всех Ваших пожеланий и требований!.

×

Сохраняем данные

Мы Вам обязательно перезвоним!

Ой… Программисты что-то сломали 🙁 Попробуйте чуть попозже!

×

Мы уже набираем Ваш номер!

Ой… Программисты что-то сломали 🙁 Они скоро починят, а пока Вы можете сами набрать нас!

×

Вы были у нас на сайте .
Вы нашли то, что искали?

Газель Некст — изотермический фургон



Запросить цену Заказать звонок

На автомобили линейки Газель-Next действует увеличенный срок гарантии — 3 года или 150 тыс. км пробега. Межсервисный интервал — 20 тыс. км. Широкая дилерская сеть от ГАЗа позволяет осуществлять сервисное обслуживание в любой точке России.

Преимущества новой ГАЗели НЕКСТ

  • грузоподъемность до 2,6 тонн
  • объем перевозимого груза до 22 м³
  • расход топлива от 8,5 л/ 100 км
  • гарантия 3 года или 150 тыс.км пробега
  • интервал ТО — 20 000 км
  • запчасти дешевле в 3-5 раз по сравнению с зарубежными аналогами
  • стоимость владения на 1 километр пробега — 7,2 руб
  • гарантия от коррозии — 8 лет

Стоимость автомобиля на 30–40% ниже стоимости европейских аналогов
Срок окупаемости составляет 25 месяцев, что почти в 1,6 раза меньше, чем у европейских аналогов

Современные технические решения, комплектующие от ведущих мировых производителей, особое внимание к каждой детали, строгий контроль качества — отличительные особенности Next, благодаря которым этот автомобиль работает безотказно.

Внешние детали кабины Next полностью оцинкованы и обработаны современными антикоррозионными материалами. На автомобиле установлены пластиковые крылья. Все стыки и швы защищены антикоррозионным покрытием и специальными герметиками.

В новой ГАЗели-Next используются комплектующие от знаменитых мировых производителей

  • BOSCH — вакуумный усилитель, ABS, мотор редуктора стеклоочистителя
  • MANDO — газонаполненные амортизаторы, передние тормозные механизмы
  • WEBASTO — предпусковой подогреватель
  • DELPHI — климатическая установка с кондиционером
  • ZF — реечный рулевой механизм с гидравлическим усилителем руля
  • TAKATA — ремни безопасности для водителя и пассажиров

ГАЗель-НЕКСТ оснащается одним из 4 типов двигателей:

Дизельный Cummins ISF 2,8 — разработка американской компании. Мощность двигателя — 149 л.с. Рабочий объем — 2,8 л. Максимальный крутящий момент — 330 Н.м. Расчетный ресурс — 500 000 км пробега.

Бензиновый Evotech 2,7 — совместная разработка Группы ГАЗ и фирмы Tenergy (ведущей компании по разработке силовых агрегатов из Южной Кореи). Четырехцилиндровый, рядный, четырехтактный, бензиновый двигатель с комплексной микропроцессорной системой управления впрыском топлива и зажиганием. Рабочий объем 2,69 л. Мощность — 78,5 кВт, 106,8 л.с. Расчетный ресурс — 400 000 км пробега.

Битопливный LPG (пропан) 4-тактный, впрысковый. Кол-во цилиндров 4, расположение рядное. Рабочий объем 2,69 л. Максимальная мощность, кВт (л.с.) при работе на бензине — 78,5 (106,8), при работе на газе — 76,7 (104,3)

Битопливный CNG (метан). 4-х тактный двигатель мощностью 120 л.с. с турбонаддувом, промежуточным охлаждением надувочного воздуха и комплексной микропроцессорной системой управления топливоподачей и зажиганием. Запас хода на двух видах топлива до 800 км. Выполнение норм Евро-4

Технические характеристики

Модельный ряд

МодификацияШассиТип кузоваКол-во местТип шассиКолесная формулаДвигатель
A21R22-70 ГАЗель NEXT Борт 3 места Стандартное шасси 4×2 Дизель (Cummins)
A21R23-50 ГАЗель NEXT Борт 3 места Стандартное шасси 4×2 Бензин (Evotech)
A21R25-20 ГАЗель NEXT Борт 3 места Стандартное шасси 4×2 Битопливный с ГБО
A21R32-70 ГАЗель NEXT Борт 3 места Удлиненное шасси 4×2 Дизель (Cummins)
A21R33-50 ГАЗель NEXT Борт 3 места Удлиненное шасси 4×2 Бензин (Evotech)
A21R35-10 ГАЗель NEXT Борт 3 места Удлиненное шасси 4×2 Битопливный с ГБО
С41R92-80 ГАЗель NEXT Борт 3 места Удлиненное шасси 4,6т 4×2 Дизель (Cummins)
A22R22-70 ГАЗель NEXT Борт, комби 7 мест Стандартное шасси 4×2 Дизель (Cummins)
A22R23-50 ГАЗель NEXT Борт, комби 7 мест Стандартное шасси 4×2 Бензин (Evotech)
A22R32-70 ГАЗель NEXT Борт, комби 7 мест Удлиненное шасси 4×2 Дизель (Cummins)
A22R33-55 ГАЗель NEXT Борт, комби 7 мест Удлиненное шасси 4×2 Бензин (Evotech)
A22R35-20 ГАЗель NEXT Борт, комби 7 мест Удлиненное шасси 4×2 Битопливный с ГБО

Общие данные

ПараметрыСтандартная /удлиненная база*Стандартная /удлиненная база**Новая модель 4. 6 т, C41R92Новая модель 4.6 т, C42R92
Количество мест 3 7 3 7
Колесная формула 4×2 4×2 4×2 4×2
Тип привода задний задний задний задний
Полная масса, кг 3500 3500 4600 4600
Масса снаряженного автомобиля, кг*** 1930/2180 2090/2210 2415 2428
Распределение нагрузки автомобиля полной массы на дорогу через шины, кг*** передних колес задних колес 1225/1320
1275/1505
2275/2180
2225/1995
1650
3300
1650
3300
База, мм 3145/3745 3145/3745 3745 3745
Колея колес:
передних, мм
задних (между серединами сдвоенных шин), мм
1750
1560
1750
1560
1750
1560
1750
1560
Дорожный просвет (под картером заднего моста при полной массе), мм 170 170 170 170
Минимальный радиус разворота по колее наружного переднего колеса, м 5,7/6,5 5,7/6,5 6,5 6,5
Максимальная скорость автомобиля на горизонтальном участке ровного шоссе, км/ч 130 130 130 130
Угол свеса (с нагрузкой)
передний, град.
задний, град.
22
16
22
16
22
9
22
9
Максимальный преодолеваемый подъем на основном топливе с полной нагрузкой, % 26 26 26 26
Погрузочная высота, мм 950 950
Внутренние габаритные размеры кузова, мм
длина
ширина
высота
3090/4168
2078
400
2339/3090
2078
400
Коробка переключения передач 5МКПП 5МКПП
Емкость топливного бака, л 64 64

* A21R23-10/A21R33-10
** A22R23-10/A22R33-10
*** Параметры данного показателя меняются в зависимости от двигателя. Данные показатели относятся к автомобилям с двигателем EVOTECH А274 (бензиновый)

Двигатели

ПараметрыCummins ISF2.8s4129PEvotech А274Evotech А275 с LPG (Пропан)
Тип Двигателя Дизельный, с турбонаддувом и охладителем наддувочного воздуха Бензиновый, 4-тактный, впрысковый Битопливный, 4-тактный, впрысковый
(бензин/газ)
Количество цилиндров и их расположение 4, рядное 4, рядное 4, рядное
Диаметр цилиндров и ход поршня,мм 94×100 96,5×92 96,5×92
Рабочий объем цилиндров, л 2,8 2,69 2,69
Степень сжатия 16,5 10 10
Номинальная мощность, нетто кВт (л. с.)
при частоте вращения коленчатого вала, об/мин
88,3 (120)
3600
78,5 (106,8)
4000
78,5 (106,8) на бензине;
76,7 (104,3) на газе
4000
Максимальный крутящий момент, нетто, Н*м (кгсм)
при частоте вращения коленчатого вала, об/мин
270 (27,5)
1400-3000
220,5 (22,5)
2350±150
220,5 (22,5) на бензине;
219 (22,3) на газе
2350±150
Порядок работы цилиндров 1-3-4-2 1-2-4-3 1-2-4-3
Частота вращения коленчатого вала в режиме холостого хода, об/мин
минимальная
повышенная
750±50
4500
800±50
3000
800±50
3000
Направление вращения коленчатого вала (наблюдая со стороны вентилятора) правое Правое Правое
Запас хода от одной заправки при движении на всех типах топлива 475 870
ЭБУ один единый
Общая емкость системы газовых баллонов, куб. м/кг 80*/96**
Контрольный расход топлива при движении с постоянной скоростью:
60 км/ч, л/100 км
80 км/ч, л/100 км
8,5
10,3
9,8
12,1

Контрольный расход газа при движении с постоянной скоростью:
60 км/ч, куб.м/кг
80 км/ч, куб.м/кг


11,8
14,5

* для 3-местного автомобиля
** для 7-местного автомобиля

Опции и комплектации

+ оснащение, входящее в базовую комплектацию
— не устанавливается
O — опция
А — аксессуар

Наименование3 места
стандартное* / удлиненное** шасси
7 мест
стандартное*** / удлиненное**** шасси
Круиз-контроль +/- +
Центральный замок + +
Сигнализатор открытого положения двери + +
Электростеклоподъемники передних дверей + +
Рулевая колонка с возможностью регулировки по высоте + +
Подогрев наружных зеркал заднего вида + +
Гидроусилитель руля + +
Регулируемое освещение приборной панели + +
Маршрутный компьютер + +
Держатели для пластиковых бутылок + +
Подстаканники + +
Ящик вещевой + +
Карман для хранения документов формата А4 и мелких вещей + +
Ниши для хранения мелких вещей + +
Отделения для хранения инструмента (в подножках дверей) + +
Водительское сиденье «Cтандарт» (с подлокотником, с раздельной регулировкой подушки по высоте и горизонтали, регулировкой угла наклона спинки) + +
Подголовники заднего ряда +
Аудиоподготовка + +
Розетка 12 В + +
Дополнительная розетка 12 В (в задней части салона) +
Салонный фильтр + +
Система отопления и вентиляции + +
Стабилизатор передней подвески + +
Стабилизатор задней подвески + +
Запасное колесо + +
Утеплитель радиатора + +
Аккумуляторная батарея емкостью 74 А·ч + +
Комплект инструментов + +
Прикуриватель, пепельница + +
Комплект дверных карманов О О
Потолочная консоль О О
Блокировка дифференциала заднего моста О О
Кондиционер О О
Тормозная система с ABS О О
Двухслойное лакокрасочное покрытие О О
Пакет опций «Комфорт»
Водительское сиденье «Люкс» (сиденье «Стандарт» с поясничным подпором и подогревом) О О
Аккумуляторная батарея повышенной емкости 85 А·ч О/- +/-
Блокируемый дифференциал заднего моста***** О О
Противотуманные фары О О
Головное устройство 2 DIN с кнопками на руле О О
Электропривод наружных зеркал заднего вида О О
Предпусковой подогреватель О/- +/-
Дополнительный отопитель салона +/О

* А21R22/А21R32
** А21R23/А21R33/А21R25/А21R35
*** A22R22/А22R32
**** А22R23/А22R33/А22R35
***** Не устанавливается для А21R25/А21R35/А22R35

Чертежи и размеры

Внешний вид и устройство кабины

Внешний вид Газели-Next выгодно отличается не только от своих предшественников, но и от облика российских автомобилей в целом. Полностью обновленная удобная кабина, массивный бампер, широкие стекла с увеличенным углом обзора — эти детали придают новинке огромное сходство с иномаркой. Внутреннее устройство кабины ориентировано на комфорт и удобство водителя — усовершенствованная приборная панель, подразумевающая более логичное управление автомобилем, множество ящиков и полок под рукой, эргономичное кресло.

Применение

Изотермический фургон на базе Газели-Next применяется для перевозки грузов, которым важен определенный температурный режим, например, продукты питания, напитки, медицинские препараты, растения и другое. По сравнению со своим предыдущим поколением, Газель-Next с изотермическим фургоном гораздо компактнее и маневреннее, и становится все более популярной в сфере малого и среднего бизнеса. Грузоподъемность автомобиля составляет 1,5 тонны.

Особенности конструкции

Изотермический фургон обладает особыми свойствами: его внутренние стороны покрыты безвредной пищевой оцинкованной сталью, а конструкция изделия отличается наличием теплоизоляции. Температура внутри фургона поддерживается с помощью панелей из пенопласта толщиной от 5 до 10 см. Чем больше толщина панели — тем лучше теплоизоляционные свойства фургона, тем более прихотливым может быть груз. Но вне зависимости от этих показателей, любые изотермические фургоны надежно защищают свое содержимое от атмосферных осадков и скачков температуры воздуха.

Внешняя поверхность фургона покрыта пластиком, защищающим металлические листы конструкции от коррозии и значительно продлевающим срок жизни изделия

СПЕЦПРЕДЛОЖЕНИЯ

ВСЕ

ГАЗель Бизнес 3302 изотермический фургон 3-х местный в Самаре

(3-х местный)

Изотермический фургон ГАЗ 3302 создан для транспортировки пищевых продуктов и лекарственных препаратов, требующих поддержания определенной температуры. Машина широко применяется продуктовыми сетями и аптеками по следующим основным причинам – сохранность груза, надежность конструкции, комфорт поездки.

Изотермический фургон ГАЗ 3302 выпускается в нескольких вариациях по длине, типу двигателя и приводу. Модель быстро и в срок осуществляет перевозку скоропортящихся товаров – маневренность и безопасность на самом высоком уровне.

Преимущества автомобиля

  • Грузоподъемность – крепкая рама позволяет перевозить вес до 1500 кг, не в ущерб мобильности и способности маневрировать на дороге
  • Теплоизоляция – пенопласт, находящийся между металлическими листами, держит необходимую температуру внутри фургона
  • Долговечность – корпус защищен от коррозии. Внешняя часть фургона выполнена из стали или алюминия. Основные углы и агрегаты от мировых производителей
  • Безопасность груза – обеспечивают двусторонние двери с возможностью крепления замка и пломб. Сохранение качества перевозимых изделий за счет герметичности и отличной теплоизоляции
  • Выгодное приобретение – средняя окупаемость машины составляет 2 года.

Купить Изотермический фургон ГАЗ 3302 в Самаре

Купить изотермический фургон ГАЗ 3302 в Самаре в автосалоне «АВТОТЕХ» — значит:

  • Приобрести транспортное средство у официального партнера Горьковского автомобильного завода ГАЗ
  • Получить профессиональную консультацию и помощь в выборе необходимого Вам автомобиля
  • Обеспечить предпродажную проверку покупаемой техники на наличие неисправностей.

Автосалон «АВТОТЕХ» осуществляет продажу изотермических фургонов ГАЗ 3302 в Самаре на самых выгодных условиях. Звоните!

Технические характеристики

  • 3-х метровый борт
  • 4-х метровый борт
  • 5-ти метровый борт
  • Cummins ISF2.8S4R129 (дизельный|2,8|только для 4х4)
  • Evotech A274 (бензиновый|2,7)
  • Evotech А275 С LPG (битопливный|пропан|2,7)
  • УМЗ-421647 с CNG (битопливный|бензин+метан|2,89)
  • Задний привод
  • Полный привод
  • ГАЗель бизнес

ГАЗ 3302

Изотермический фургон

3 места

от 939 000

Характеристики ГАЗель БИЗНЕС изотермический фургон 3 метра ГАЗель БИЗНЕС изотермический фургон 4 метра ГАЗель БИЗНЕС изотермический фургон 5 метров
Габаритные размеры: длина/ширина/высота по кабине, мм 5540/2066/2120 6619/2066/2120 8230/2066/2120
Габаритные размеры фургона (длина/ширина/высота), мм 3200/1978/1800 4200/1978/1800 5000/1978/1800
Объем кузова, куб. м 11,3 14,9 17,8
Грузоподъемность, кг До 1500 До 1450 До 1400
Возможность полноприводного исполнения да да да

Изготовление автофургонов, промтоварных и хлебных фургонов в Ижевске

Компания «ТрансИжАвто» предлагает изготовление промтоварных, изотермических и хлебных фургонов на грузовики, прицепы и полуприцепы. Вы можете заказать автофургон на базе любого шасси (Газель, Хендай Портер, ВИС и другие автомобили).

Мы изготавливаем фургоны на базе прочного металлического каркаса и используем материалы, не требующие покраски. Это обеспечивает высокую надежность и долгий срок службы техники.

Рефрижераторные фургоны изготавливаются по принципу сэндвич, что обеспечивает сохранность замороженных и скоропортящихся грузов.

Автофургоны могут комплектоваться рефрижераторным и отопительным оборудованием.

Изготавливаем фургоны следующих видов:

Вид фургонаОписаниеПреимущества
Автофургон промтоварный оцинкованныйСтальной каркас, обшивка из оцинкованной стали с полимерным покрытием. Пол из ламинированной фанеры.Самый доступный вариант для легких и средних грузовиков
Промтоварный фургон из ламинированной фанерыСтальной каркас, обшивка и пол из ламинированной фанеры.Имеет повышенную жесткость по сравнению с оцинкованным фургоном и оптимален для средних и тяжелых грузовиков.
Автофургон изотермический оцинкованныйМеталлический каркас, наружная обшивка из оцинкованной стали с полимерным покрытием либо ламинированной фанеры, утеплитель-пенопласт, внутренняя обшивка из оцинкованной стали.Доступный вариант для перевозки грузов, требующих определенной температуры, на небольшие расстояния.
Автофургон изотермический сэндвич (рефрижератор)Сэндвич-панели, облицовка – оцинкованная сталь с полимерным покрытием либо армированный пластик.Предназначен для перевозки замороженных продуктов.
Хлебный фургонОблицовка – оцинкованная сталь с полимерным покрытием. Утеплитель – ППС, внутренняя обшивка – фанера, обшивка потолка – деревянные рейки. Внутри фургон поделен на отсеки с направляющими для хлебных лотков и отдельными дверцами для боковой загрузки.Хлебный фургон предназначен для перевозки хлебобулочных и кондитерских изделий в лотках.

 

Процесс изготовления фургона в фотографиях

Цены на изготовление автофургонов

 

Фотографии наших работ:

 

Как заказать фургон?

Чтобы узнать стоимость и сроки изготовления автофургона, отправьте заявку с сайта или позвоните по телефонам (3412) 904-001. Наши менеджеры оперативно обработают Вашу заявку.

Изготовление и Установка изотермического фургона на ГАЗель Фермер по низкой цене

Если ваш бизнес связан с перевозкой скоропортящихся товаров или товаров, требующих специального температурного режима таких как: медикаменты, химические средства и целый ассортимент продовольственной продукции), то ваш вариант – это установка изотермического фургона на ГАЗель Фермер.

Что вы получите, обратившись в Компанию «АвтоТех» для установки изотермического фургона

  • Во-первых, квалифицированную консультацию по данному виду переоборудования и последующую качественную работу по монтажу изотермического фургона.
  • Во-вторых, расширенную функциональность автомобиля ГАЗель Фермер под нужды вашего бизнеса.

В чем преимущества переоборудования ГАЗель Фермер в изотермический фургон?

  • такой фургон обладает повышенной прочностью и надежностью кузова . Каркас укрепляется специальной металлической конструкцией, которая предотвратит повреждение груза во время транспортировки.
  • внутренняя сторона изотермического фургона обшивается оцинкованной сталью, что соответствует требованиям СанПиНа, предъявляемым к перевозкам товаром продовольственного назначения.
  • изотермический фургон ГАЗель Фермер дополнительно обшивается утеплителем, что позволит перевозить грузы с соблюдением нужного температурного режима, как жарким летом, так и в условиях холодной зимы.
  • изотермический фургон имеет полностью герметичную обшивку, так же как и промтоварный фургон, что защитит от попадания внутрь фургона дорожной грязи, выхлопных газов и воздействия солнечных лучей на скоропортящиеся продукты.

Напоминаем, что все изменения конфигурации автомобиля должны пройти регистрацию в ГИБДД. Вы можете сделать это самостоятельно или обратиться к специалистам Компании «АвтоТех», мы имеем большой опыт взаимодействия с органами инспекции, поэтому выполним регистрацию в кратчайшие сроки.

Перезвоните мне

Фургон изотермический ГАЗ-3309 | ТСС Кавказ (АвтоГАЗсервис) (26auto.

ru)

Изотермический автофургон на шасси ГАЗ-3309 (ГАЗ-3307) предназначен для перевозки в охлажденном виде скоропортящихся пищевых продуктов и медицинских препаратов, требующих стабильной температуры, а также для перевозки замороженных продуктов при наличии установленной холодильной установки и при толщине теплоизоляции не менее 75 мм.

Конструкция изотермического фургона ГАЗ-3309 представляет собой кузов прямоугольной формы, который может быть изготовлен по панельно-каркасному методу или по технологии «сэндвич-панелей».

При изготовлении по панельно-каркасному методу конструкция каркаса кузова и основание представляют собой металлическую конструкцию, к которой крепится внешняя обшивка. Внешняя обшивка кузова автофургона ГАЗ-3309 выполнена из плакированного металла толщиной 0,7 мм.

Внутренняя обшивка выполнена из оцинкованной стали, имеющей гигиеническое заключение для перевозки продуктов питания. Оцинкованные листы внутренней обшивки ГАЗ-3309 скатаны «в замок».

Необходимым условием для изотермических фургонов является наличие утеплителя на потолке, стенах и на полу фургона. Термоизоляционным материалом для изотермического фургона ГАЗ-3309, как и для ГАЗ-3302, служит пенополистирол (пенопласт) толщиной от 40 мм и выше. Выпускаются модификации изотермических фургонов с толщиной термоизоляции 40, 50, 75 и . Также для дополнительной герметизации при закладке пенопласта и для исключения «мостиков холода» в щелях и по углам дополнительно используется пенополиуретановая заливка.

Несущими конструктивными элементами «сэндвич фургона», обеспечивающими его прочность, являются:

  • сварное цельнометаллическое основание;
  • объемный цельнометаллический сварной каркас для панелей крыши и бортов;
  • «сэндвич панели» крыши, переднего и боковых бортов.

Изотермический фургон ГАЗ-3309 имеет стандартное для автомобилей марки ГАЗ-3307 основание, изготовленное из сплошных продольных швеллеров с поперечными балками, и усилен по всему периметру квадратной трубой. Сверху основание покрыто металлическими оцинкованными листами, что предохраняет настил пола от негативного воздействия воды и грязи.

«Сэндвич панели» крыши и бортов представляют 3х-слойный пакет склеенных между собой внешней обшивки (плакированный металл), утеплителя (пенополистирол) и внутренней обшивки (оцинкованный металл). Толщина утеплителя 50…100 мм. Герметизация стыковочных швов осуществляется за счет клея и силиконового герметика. Крепление «сэндвич панелей» к объемному каркасу осуществляется вытяжными заклепками.

Настил пола «сэндвич» фургона ГАЗ-3309 имеет утепляющий слой под деревянным настилом, который обшит сверху оцинкованным металлом. Общая толщина настила пола равна толщине «сэндвич панелей» конкретного фургона.

«Сэндвич фургон» имеет распашные двери, каркас которых выполнен из квадратной трубы и деревянных реек. Между внешней и внутренней обшивками дверей вклеен утеплитель — пенополистирол. Толщина дверей фургона равна толщине его «сэндвич панелей».

Кузов изотермического автофургона ГАЗ-3309 имеет двухстворчатую дверь с углом открывания створок 270 градусов. Силовые элементы новой конструкции дверного проема (запорная пара: кулачок + защелка) обеспечивают легкое открывание дверей, снижают вероятность взлома и придают дополнительную жесткость дверному проему.

Кузов имеет внутреннее освещение.

По желанию в конструкцию фургона могут быть внесены изменения:

  • установка дополнительных дверей;
  • изменение высоты фургона;
  • оклейка наружной поверхности кузова декоративными пленками для улучшения внешнего вида или для размещения рекламной информации.

Отзывы владельцев Газель Next и УАЗ Профи: что выбрать?

Сильным преимуществом «Газели» всегда было то, что для ее движения не требовалось отдельной категории груза, в то время как она могла принимать до полутора тонн — намного больше, чем более компактный Портер. Впрочем, УАЗ привлекает и более привычной компоновкой, а с двойной кабиной выглядит модным пикапом. При этом цены на машины сопоставимы и начинаются от 500000 рублей (Дальше можно купить чуть дешевле, но мы сомневаемся в целесообразности такой покупки).Какую машину выбрать: Газель Next или УАЗ Профи — отзывы владельцев помогут сделать правильный выбор!

Последняя на сегодняшний день модификация старой доброй Газели «живет» на конвейере уже седьмой год. В интересующей нас ценовой категории наиболее популярным двигателем является дизель 2,8 л мощностью 120 л.с. с достаточно умеренным аппетитом для большой машины. 2,7-литровый 107-сильный бензиновый двигатель, как и его гибридная версия с заводским оборудованием для работы на сжиженном газе, занимает около 12% рынка подержанных автомобилей Next.Он менее экономичен, и, как правило, его выбирают те, кто планирует обслуживать двигатель самостоятельно.

Самым популярным кузовом является тентованный или изотермический фургон, позволяющий перевозить от 1 до 1,5 тонн груза в зависимости от базы. Именно эти автомобили мы и будем рассматривать в нашем сегодняшнем сравнении, поскольку у ульяновских вагонов еще нет цельнометаллических фургонов и микроавтобусов.

Управляемость, надежность, салон, ликвидность, подвеска — вот сильные стороны, о которых владельцы вспоминают чаще всего.

Положительных отзывов много, но среди них практически нет отзывов с наивысшей оценкой. Из-за этого у машины низкий средний балл. Или не только из-за этого?

Экономичность, проходимость, качество окраски, коробка передач и шумоизоляция — явно не самые сильные стороны автомобиля.

Завод сделал определенный шаг вперед, но полностью избавиться от образа «автомобиль для обучения навыкам автомеханика» пока не удалось.

Автомобиль относительно свежий, поэтому выбор несравнимо меньше, чем у бензиновых машин. Самые старые автомобили в продаже датированы только 2017 годом, то есть пока вы гарантированно покупаете относительно свежую машину. Двигатель обычный бензиновый для других ульяновских моделей, 2,7 литра 150 л.с., для уменьшения прожорливости часто в паре с ним устанавливается газовое оборудование. Несомненный плюс для тех, кому нужна проходимость — фирменный полноприводный УАЗ, которым оснащено около 30% автомобилей на рынке.Найти свежую полноприводную Газель намного сложнее.

Салон

, проходимость, динамика, дизайн, обзорность — на эти достоинства владельцы обращают внимание в первую очередь.

Очень много положительных отзывов! Всех все устраивает?

Ликвидность и экономичность — два самых серьезных недостатка, о которых говорят владельцы такого оборудования.

К сожалению, чуда не произошло — недовольных владельцев профи тоже немало.

Машины из сегодняшнего сравнения заслужили совершенно «полярные» отзывы. Их либо любят, либо ненавидят, третьего практически не дают. Тем не менее, судя по «голым» цифрам, дерзкий новичок «Профи» обыграл заслуженную «Газель», набрав 4,3 балла. Следующая отставала прилично — в ее активе всего 4,0 балла. При этом оба рейтинга находятся на очень хорошем уровне для автомобилей данного сегмента, как правило, их оценивают настоящие профессионалы своего дела, «променявшие» более первой сотни тысяч километров на совершенно разные автомобили.

Полевая проверка магнитооптического устройства обнаружения (Газель) для портативной диагностики Plasmodium vivax в пунктах оказания медицинской помощи

Abstract

Основной проблемой малярии является отсутствие инструментов для точной и своевременной диагностики в полевых условиях, которые имеют решающее значение для ведения больных и эпиднадзора. Микроскопия, наряду с экспресс-диагностическими тестами, в настоящее время является основой диагностики малярии в большинстве эндемичных регионов. Однако эти методы имеют несколько ограничений.В этом исследовании оценивалась точность нового устройства для быстрой диагностики малярии Gazelle на основе образцов, собранных в перуанской Амазонии в период с 2019 по 2020 год. Диагностическая точность сравнивалась с результатами микроскопии и двух быстрых диагностических тестов (SD Bioline и BinaxNOW) с использованием 18ssr вложенной ПЦР в качестве эталонный тест. Кроме того, для количественной оценки паразитов использовался анализ ПЦР в реальном времени (ПЭТ-ПЦР). Из 217 включенных и протестированных пациентов с лихорадкой 180 образцов (85 P , vivax и 95 отрицательных) были включены в окончательный анализ.При использовании вложенной ПЦР в качестве золотого стандарта чувствительность и специфичность Gazelle составила 88,2% и 97,9% соответственно. Используя пороговое значение 200 паразитов / мкл, чувствительность Gazelle для образцов с более чем 200 мкл / мкл составила 98,67% (95% ДИ: от 92,79% до 99,97%), тогда как чувствительность для образцов менее 200 мкл / мкл (n = 10) составлял 12,5% (95% ДИ: от 0,32% до 52,65%). Чувствительность и специфичность Gazelle были статистически аналогичны микроскопии (чувствительность = 91,8, специфичность = 100%, p = 0,983) и выше, чем у SD Bioline (чувствительность = 82.4, специфичность = 100%, p = 0,016) и BinaxNOW (чувствительность = 71,8%, специфичность = 97,9%, p = 0,002). Диагностическая точность Газели для выявления малярии в P . Инфекции vivax были сопоставимы с результатами световой микроскопии и превосходили оба ДЭТ даже при наличии инфекций с низкой паразитемией. Производительность «Газели» делает ее ценным инструментом для диагностики малярии и активного выявления случаев заболевания, который можно использовать в различных эндемичных по малярии регионах.

Образец цитирования: Valdivia HO, Thota P, Braga G, Ricopa L, Barazorda K, Salas C, et al.(2021) Полевая проверка магнитооптического устройства обнаружения (Gazelle) для портативной диагностики Plasmodium vivax в пунктах оказания медицинской помощи. PLoS ONE 16 (6): e0253232. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0253232

Редактор: Лузия Хелена Карвалью, Instituto Rene Rachou, БРАЗИЛИЯ

Поступила: 9 февраля 2021 г .; Принят в печать: 31 мая 2021 г .; Опубликовано: 22 июня 2021 г.

Это статья в открытом доступе, свободная от всех авторских прав, и ее можно свободно воспроизводить, распространять, передавать, изменять, строить или иным образом использовать в любых законных целях. Работа сделана доступной по лицензии Creative Commons CC0 как общественное достояние.

Доступность данных: Все соответствующие данные находятся в рукописи и S1 Fig, S1 Table.

Финансирование: Эта работа была частично профинансирована Hemex Health, США в рамках CRADA 18-10302 и Отделом по надзору за здоровьем вооруженных сил Министерства обороны США (AFHSD) / Global Emerging Infections Surveillance (GEIS) Branch, PROMIS ID P00144_20_N6_02, 2019- 2020. Спонсоры предоставили поддержку в виде заработной платы авторам PT и KB, но не сыграли никакой дополнительной роли в дизайне исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.Конкретные роли этих авторов сформулированы в разделе вкладов авторов.

Конкурирующие интересы: PT является сотрудником Hemex Health и отчитывается о личных и других гонорарах от Hemex Health, KB является сотрудником Vysnova и сообщает о личных гонорарах помимо представленных работ. CAJ, DKB, HOV, GB, LR, KB, CS и DKB сообщают о грантах и ​​нефинансовой поддержке Hemex Health, США во время проведения исследования. Это не влияет на нашу приверженность политике PLOS ONE в отношении обмена данными и материалами.

Введение

Малярия представляет собой серьезную угрозу общественному здоровью, в 2018 г. привела к более чем 228 миллионам случаев заболевания и 405 000 смертельным исходам [1]. Заболевание вызывается пятью различными видами Plasmodium ( P . falciparum , P . vivax , P . malariae , P , ovale и P . ). knowlesi ), что подвергает риску более 40% населения мира [1].Малярия также представляет опасность для военной оперативной готовности, поскольку в тропических регионах потери людских ресурсов больше, чем травмы, связанные с боевыми действиями [2].

В настоящее время лечение малярии во всех эндемичных регионах, независимо от интенсивности их передачи, назначается после того, как только случаи заболевания подтверждены диагностическим тестом, который представляет собой либо ДЭТ, либо световую микроскопию. Однако оба метода имеют ряд недостатков, ограничивающих их использование. Для световой микроскопии требуется постоянная мощность, высококвалифицированный персонал, длительное время обработки, а на ее чувствительность влияет низкий уровень паразитемии [3].В случае ДЭТ их чувствительность также ограничена при инфекциях с низкой паразитемией, и их универсальность не может быть гарантирована из-за высокого уровня ложноотрицательных результатов из-за делеций HRP2 и HRP3 в P . falciparum [4–6].

Молекулярные подходы, такие как ПЦР и петлевой изотермической амплификации (LAMP), были разработаны для высокочувствительного и специфического обнаружения [7–9]. Однако эти методы могут быть относительно дорогими и требуют лабораторных мощностей и обученного персонала, которые недоступны ни в эндемичных регионах, ни в полевых условиях [10].

Методы на основе

LAMP были широко изучены, и многие варианты были протестированы, показав хорошие результаты в полевых и лабораторных условиях [11–13]. Оптимальная эффективность LAMP объясняется использованием полимеразы Bst, которая считается более устойчивой, чем обычная полимераза Taq, и использованием 4–6 специфичных праймеров [14].

Фотоиндуцированный перенос электронов (ПЭТ-ПЦР) — это анализ в реальном времени, разработанный в качестве инструмента для надзора за малярией в эндемичных условиях [15, 16].Эта методология имеет преимущества по сравнению с традиционной вложенной ПЦР и другими платформами реального времени из-за использования самозатухающих праймеров, короткого времени обработки и простоты проведения реакции [7]. Метод ПЭТ-ПЦР можно использовать как мультиплексную платформу, позволяющую сократить время и стоимость [17].

Тем не менее, по-прежнему существует потребность в высококачественных, рентабельных и эффективных инструментах диагностики малярии, позволяющих выявлять случаи малярии на местах и ​​оперативно обнаруживать малярию, что не только улучшит здоровье пациентов, но и поможет предотвратить передачу и снизить тяжесть заболевания [1, 10].

Чтобы восполнить этот пробел, мы оценили новое быстрое устройство с питанием от батареи, которое позволяет обнаруживать частицы гемозоина в крови инфицированных пациентов по имени Газель. Кристаллы гемозоина образуются в результате полимеризации димеров феррипротопорфирина IX, который является побочным продуктом переваривания гемоглобина, генерируемого всеми видами малярии [18]. Ранее предпринимались попытки использовать гемозоин в качестве биомаркера для диагностики малярии [19–22], многие из них были безуспешными и неприменимыми в полевых условиях [18, 23].

Однако есть многообещающие доказательства того, что магнитооптическое обнаружение потенциально может позволить чувствительную идентификацию малярии. Предыдущее исследование in vitro на P . falciparum показали, что эта технология потенциально может обнаруживать до 40 паразитов на микролитр крови [24]. Более того, обнаружение может происходить на ранних стадиях заражения и поддерживается на разных стадиях жизненного цикла паразита [25]. Кроме того, появляется все больше клинических данных, показывающих, что магнитооптическое обнаружение может быть полезно в P . vivax преобладающие настройки исключения [26].

Предыдущее исследование с использованием Газели показало многообещающие результаты для P . falciparum обнаружение в условиях высокой передачи в Индии [27]. Основываясь на этом исследовании, мы стремились оценить диагностические характеристики «Газели» на участке с низким уровнем передачи с помощью P . vivax преобладание в перуанском бассейне Амазонки.

Методы

Учебные площадки

Образцы были собраны в результате пассивного эпиднадзора, в котором участвовали участники с лихорадкой в ​​период с 2019 по 2020 год в девяти медицинских учреждениях, расположенных в городе Икитос и близлежащих населенных пунктах.Икитос — столица региона Лорето, расположенного на северо-западе перуанского бассейна Амазонки ( Рис. 1 ). На этот регион приходится 28,7% территории Перу, где заболеваемость малярией в 2019 году составила 1,8% (в 2019 году было зарегистрировано 21 973 случая малярии), что составляет более 90% всех случаев малярии, зарегистрированных в Перу за этот год.

случаев малярии в Лорето распространены в сельских общинах с ограниченным доступом к медицинскому обслуживанию. Большинство случаев вызвано P . vivax в соотношении 4: 1 с P . falciparum . Диагностика малярии в первую очередь основана на микроскопии в соответствии с национальными рекомендациями Перу [28].

Этические соображения

Протокол исследования был одобрен Наблюдательным советом Военно-морского медицинского исследовательского подразделения США 6 (NAMRU-6) в соответствии со всеми применимыми федеральными постановлениями, регулирующими защиту людей (протокол NMRCD.2007.0004). Взрослые участники предоставили письменное согласие, а несовершеннолетние — письменное согласие и согласие родителей / опекунов.

Размер выборки

Размер выборки оценивался исходя из чувствительности не менее 70% для Газели с относительной точностью 10%, достоверностью 95% и мощностью 80%. В результате минимальный размер выборки составил 165 человек.

Отбор проб и микроскопия малярии

Обученные флеботомисты собрали четыре мл цельной крови от каждого участника венепункцией в стерильные вакуумные пробирки, обработанные ЭДТА. Образцы были доставлены в рамках холодовой цепи в течение двух часов после сбора на объекты NAMRU-6 в Икитосе.Для каждого участника были приготовлены два тонких и толстых мазка крови, окрашены 10% Гимза и прочитаны двумя микроскопистами в лаборатории NAMRU-6 в Икитосе. Результаты были предоставлены после считывания 200 иммерсионных полей, а положительные слайды были количественно определены с использованием 6000 лейкоцитов / мкл крови в качестве эталона. Собранная кровь использовалась для RDT и тестирования Gazelle в Икитосе, а аликвота была отправлена ​​в лабораторию NAMRU-6 в Лиме для экстракции ДНК и молекулярных анализов.

Тестирование РДТ и Газель

Два RDT использовались для диагностики малярийной инфекции в лаборатории NAMRU-6 Iquitos одним лаборантом: i) SD BIOLINE (05FK80-40-0) и ii) BinaxNOW (665–025).Эти два RDT основаны на обнаружении антигена, содержащего богатый гистидином протеин II (HRP-II) P . falciparum и лактатдегидрогеназа (SD Bioline) или альдолаза (BinaxNow) видов Plasmodium в цельной крови человека.

Тестирование устройства «Газель» было проведено в лаборатории Икитос тем же лаборантом со свежими образцами, которые были обработаны в течение четырех часов с момента забора. Устройство состоит из настольного ридера и одноразовых одноразовых двухкамерных картриджей ( рис. 2, ).С помощью пипетки 15 мкл цельной крови капали в нижнюю камеру картриджа вместе с 80 мкл буфера Gazelle (2% тритона в воде). Затем поместили верхнюю камеру, и образец обработали ультразвуком через стенку картриджа с помощью ультразвукового устройства, встроенного в Газель.

Рис. 2. Порядок проведения испытаний аппарата «Газель».

15 мкл цельной крови помещают в картридж с 80 мкл буфера Gazelle цельной крови. Образец помещается в устройство «Газель», которое лизирует образец ультразвуком, а затем несколько раз пропускает магниты через образец.Обнаружение малярии оценивается путем сравнения количества света, проходящего через образец, с магнитным полем и без него.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0253232.g002

На этапе обработки ультразвуком лизируются эритроциты и высвобождается гемозоин в положительных образцах. Затем внутренние магниты проходят несколько раз над образцом, и возникающие магнитные поля выравнивают кристаллы гемозоина, если они присутствуют. Эта конфигурация может блокировать прохождение света через образец.Наконец, внутренний светодиод излучает свет через образец, и количество света, проходящего через образец, измеряется с магнитным полем и без него ( Рис. 2) . Количество заблокированного света пропорционально количеству гемозоина в образце. Наличие любого количества гемозоина указывает на малярийную инфекцию.

Результат отображается на считывателе в течение одной минуты. Тест теоретически обнаруживает все виды малярии, поскольку гемозоин вырабатывается всеми ими, однако он не может различать виды.Калибровку прибора проводили с использованием положительного и отрицательного контроля каждую неделю или при смене номера партии картриджей. Для целей настоящего исследования результаты «Газели» не отображались, чтобы сотрудники лаборатории NAMRU-6 были ослеплены.

Вложенная ПЦР

Вложенная ПЦР была проведена двумя лаборантами в NAMRU-6 в Лиме. Сначала ДНК выделяли из 200 мкл цельной крови с помощью набора DNeasy Blood & Tissue (Qiagen, Germantown, MD), элюировали 70 мкл буфера для элюции и использовали для ПЦР с вложенной 18S рРНК [29].Первая реакция амплифицирует рибосомный ген субъединицы 18S рРНК (ssrRNA), а вторая реакция нацелена на специфические области для каждого вида плазмодия ( P . falciparum и P . vivax) . Для первой реакции использовали 5 мкл ДНК-матрицы, а 5 мкл амплифицированного продукта использовали во второй реакции. Обе реакции проводили в объеме 50 мкл, содержащем 1X буфер, 2 мМ MgCL2, 125 мкМ dNTP, 250 нМ каждого праймера и 1 единицу полимеразы Taq (Invitrogen, Waltham, MA).Результаты были визуализированы в 2% агарозном геле, окрашенном GelRed®. Техники не видели результатов микроскопии, RDT и Gazelle.

Фотоиндуцированный перенос электронов (ПЭТ-ПЦР)

Все образцы были протестированы в двух экземплярах с использованием ПЭТ-ПЦР Plasmodium для количественной оценки плотности паразитов [17, 30]. Все положительные по роду образцы были дополнительно протестированы с помощью одноплексных реакций для обнаружения P . falciparum и P . vivax .

Реакцию рода проводили в объеме 20 мкл, который содержал 5 мкл очищенной ДНК, 2X TaqMan Environment buffer 2. 0 (Applied BioSystems, Foster City, CA) и 250 нМ прямого и обратного праймеров рода. Одноплексные видоспецифичные реакции содержали ту же смесь, но с концентрацией 125 нМ HEX-меченного видоспецифичного праймера.

реакций ПЭТ-ПЦР запускали в системе для количественной ПЦР Mx3005P (Agilent technologies, Санта-Клара, Калифорния), а результаты визуализировали в программе для количественной ПЦР MXpro.Условия термоциклирования для родовой и видоспецифичной ПЭТ-ПЦР состояли из начальной денатурации при 95 ° C в течение 10 минут и 45 циклов денатурации при 95 ° C в течение 10 секунд с последующим отжигом при 60 ° C в течение 40 секунд. Пороговый цикл (Ct) ниже 41 использовался для разделения положительных и отрицательных образцов. Техники не видели результатов микроскопии, RDT и Gazelle.

Анализ сроков окупаемости и затрат

Мы оценили время обработки и стоимость одного образца для экспертной микроскопии, вложенной ПЦР, SD Bioline, BinaxNOW и Gazelle.Смета расходов включала подготовку образцов для микроскопии; Выделение ДНК, реакция амплификации и визуализация результатов для ПЦР; Стоимость ДЭТ за образец, а также затраты на картридж и буфер для Газели. Стоимость рабочей силы и оборудования не была включена в анализ.

Статистические методы

Чувствительность и специфичность с 95% доверительным интервалом (95% ДИ) были рассчитаны для микроскопии, RDT и Gazelle с использованием 18S рРНК-вложенной ПЦР в качестве эталонного теста. Тест МакНемара использовался для выявления статистических различий между микроскопией, RDT и Gazelle.Коэффициент Каппа использовался для оценки соответствия между этими диагностическими тестами, в то время как U-тест Манна-Уитни использовался для оценки различий в паразитемии между истинно положительными и ложно отрицательными результатами. Эти анализы проводились в пакете «stats», реализованном в R [31]. Данные микроскопии и количественной оценки ПЭТ-ПЦР были использованы для оценки предела обнаружения (LoD) Gazelle на клинических образцах с использованием загрузочных контрольных точек, реализованных в пакете «cutpointr» в R.

.

Результаты

Охват и характеристика населения

За период исследования 217 участников были обследованы на малярию. В общей сложности 32 участника были исключены из окончательного анализа из-за того, что образец крови не соответствовал требованиям для выполнения всех четырех тестов. Из этих 32 образцов микроскопия идентифицировала 11 P . vivax , 3 P . falciparum и 18 негативов; BinaxNow привел к 10 non-P . falciparum положительных и 22 отрицательных, тогда как SDBioline дало 10 P . vivax и 22 негатива.

Из оставшихся 185 образцов частота выявления малярии при микроскопии составила 44.9% (83/185), SD BIOLINE 38,9% (72/185), BinaxNOW 35,6% (66/185), Nested PCR 48,6% (90/185) и Gazelle 43,8% (81/185) ( S1 Таблица ).

Всего четыре P . falciparum и один смешанный P . vivax / P . falciparum случаев были обнаружены с помощью вложенной ПЦР. Все последующие анализы проводились с оставшимися 180 образцами (85 P , vivax и 95 негативов, как определено с помощью вложенной ПЦР).

Средний возраст составлял 33 года (диапазон 5–79), 60,5% составляли мужчины. У участников средняя плотность паразитов составляла 606 паразитов / мкл (12–61 773 паразитов / мкл), а недавняя история противомалярийного лечения была описана у 6 участников (, таблица 1, ).

Диагностическое исполнение Газель и другие диагностические тесты

При использовании ПЦР с вложенной 18S рРНК в качестве эталона микроскопия имела чувствительность для P . vivax 91,8% (95% ДИ: 83,8% — 96,6%) и специфичность 100% (95% ДИ: 96.2% — 100%). SD BIOLINE имел чувствительность 82,4% (95% ДИ: 72,6–89,8%) и специфичность 100% (95% ДИ: 96,2–100%), тогда как BinaxNOW имел чувствительность 71,8% (95% ДИ: 61%). — 81%) и специфичность 97,9% (95% ДИ: 92,6% — 99,7%). Газель имела чувствительность 88,2% (95% ДИ: 79,4–94,2%) и специфичность 97,9% (95% ДИ: 92,6–99,7%) ( Рис. 3 ).

Рис. 3. Чувствительность (синие точки), специфичность (красные точки) и 95% доверительные интервалы для обнаружения малярии с помощью микроскопии, SD Bioline, BinaxNOW и Gazelle в P . vivax с использованием ПЦР с вложенной 18S рРНК в качестве эталона.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0253232.g003

Используя пороговую величину 200 паразитов / мкл, как в программе обеспечения качества БДТ ВОЗ [32], чувствительность Gazelle к образцам с более чем 200 паразитов / мкл составляла 98,67% (95% ДИ: от 92,79% до 99,97%), тогда как чувствительность для образцов менее 200 паразитов / мкл составляла 12,5% (95% ДИ: от 0,32% до 52,65%).

Каппа

Коэна показала, что у Газели каппа 0.94 (95% ДИ: 0,89–0,99) по сравнению с микроскопией и каппа 0,87 (95% ДИ: 0,79–0,94) по сравнению с вложенной ПЦР. Площадь под кривой ROC составляла 0,93 для Gazelle, 0,96 для микроскопии, 0,91 для SD Bioline и 0,85 для BinaxNOW ( Рис. 4 ). Тест МакНемара не показал статистических различий между результатами Газели по сравнению с микроскопией (р = 0,983). Однако статистически значимые различия были обнаружены между Gazelle и SD Bioline и BinaxNOW (p = 0,016 и p = 0,002, соответственно).

Рис. 4. Анализ ROC.

На рисунке показаны кривые ROC для BinaxNow, SD BIOLINE, микроскопии и Gazelle в сравнении с вложенной ПЦР в качестве эталонного теста. Газель показала AUC 0,93, что сравнимо с микроскопией с AUC 0,96 и выше, чем у BinaxNow (AUC = 0,85) и SD BIOLINE (AUC = 0,91).

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0253232.g004

Предел обнаружения Газели при инфекциях P. vivax

При использовании ПЦР с вложенной 18S рРНК в качестве эталона для Gazelle было обнаружено 10 ложноотрицательных результатов.Из них все были FN по обоим RDT и 7 по микроскопии. Средняя паразитемия в 3 положительных при микроскопии образцах Gazelle FN составила 131 мкл / мкл, а средняя паразитемия для субмикроскопических образцов Gazelle FN составила 1,4 мкл / мкл с использованием ПЭТ-ПЦР для количественной оценки паразитемии. Газель имела 2 ложноположительных результата (FP) при использовании ПЦР с вложенной 18S рРНК в качестве эталона. Однако один FP оказался положительным с помощью ПЭТ-ПЦР с паразитемией 0,63 п / мкл.

U-критерий Манна-Уитни показал значительные различия в средней паразитемии у истинно положительных результатов Gazelle и Gazelle FN (p <0.00001). В этом отношении оптимальный предел паразитемии для положительного результата на газель был оценен между 207 и 323 паразитами / мкл с использованием данных микроскопии и количественной оценки ПЭТ-ПЦР, соответственно ( рис. 5, ).

Рис. 5. Распределение плотности паразитов.

Ящичковая диаграмма показывает распределение плотности паразитов, оцененное с помощью микроскопии и ПЭТ-ПЦР, вдоль медианы, нижнего и верхнего квартилей. Оптимальный предел паразитемии для положительного результата «Газель» показан красной пунктирной линией.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0253232.g005

Магнитооптический метод, используемый в этом исследовании, представляет собой количественный метод, поскольку он определяет уровни гемозоина в образце. В этом отношении наши результаты показывают положительную корреляцию между плотностью паразитов и сигналом гемозоина, обнаруженным Газелью (r = 0,83) ( S1 Рис. ).

Анализ сроков и затрат на выполнение работ

Наши результаты показывают, что у Gazelle было более короткое время обработки, чем у SD Bioline и BinaxNOW, с расчетным временем в пять минут на тест, включая подготовку образца и считывание ( Таблица 2 ).Стоимость газели за тест оценивалась в один доллар США за тест, что ниже, чем у BinaxNOW, и аналогично микроскопии и SD Bioline (, таблица 2, ).

Обсуждение

Текущие руководства указывают, что лечение малярии следует проводить только в случаях с положительным результатом диагностического теста, которым является либо ДЭТ, либо световая микроскопия [10]. Кроме того, диагностика малярии является не только ключом к прямому лечению, но также имеет решающее значение для эпиднадзора и выявления резервуаров передачи в эндемичных условиях [10].Однако ДЭТ и световая микроскопия имеют ряд ограничений, которые затрудняют их использование в полевых условиях. Следовательно, необходимы новые подходы к применению в полевых условиях для упреждающего выявления случаев заболевания в эндемичных условиях.

В этом исследовании мы оценили новое устройство для быстрой диагностики в месте оказания медицинской помощи (Gazelle) и оценили его эффективность по сравнению с микроскопией и двумя RDT (SD Bioline и BinaxNOW) с использованием вложенной ПЦР в качестве золотого стандарта. Результаты текущего исследования показали, что чувствительность и специфичность Gazelle были подобны микроскопии и лучше, чем RDT, которые являются основными методами диагностики, используемыми в медицинских центрах в Перу и других эндемичных регионах.

Наши результаты согласуются с недавним исследованием характеристик Газели в Индии с преобладанием P . falciparum [27]. Предыдущее исследование показало, что Gazelle продемонстрировала чувствительность и специфичность 82% и 98% соответственно; которые близки к значениям чувствительности и специфичности 88,2% и 97,9% из нашего исследования. Эти результаты говорят о том, что диагностические характеристики Газели аналогичны Р . falciparum и P . vivax кейсы.

Это важный вывод, поскольку преобладание видов варьируется в зависимости от эндемичных регионов. Кроме того, в одном и том же регионе могут происходить смещения преобладающих видов в результате мероприятий по борьбе с малярией, которые, как правило, более эффективны против P . falciparum , чем P . vivax или введение новых штаммов, как показано ранее [33–36].

Время обработки

Gazelle меньше (5 минут) по сравнению с микроскопией (2 часа), RDT (20 минут) и PCR (9 часов), а стоимость одного теста сравнима с микроскопией и RDT.Кроме того, стоимость устройства «Газель» составляет примерно 700 долларов, что сопоставимо со стоимостью базового светового микроскопа, и устройство может выдержать более 20 000 тестов в течение своего предполагаемого жизненного цикла.

В этом отношении наши данные показывают, что Газель может дополнять микроскопию или может использоваться в качестве альтернативы для диагностики малярии в удаленных или ограниченных в ресурсах местах. Этот потенциал для диагностики на месте дополнительно поддерживается минимальным обучением, необходимым для работы с Газелью, и отсутствием вариабельности, зависящей от наблюдателя, как в микроскопии.

Используя программу обеспечения качества БДТ ВОЗ в качестве эталона, чувствительность Gazelle к образцам с высокой плотностью паразитов (> 200 паразитов / мкл) составила 97,47% (95% доверительный интервал: от 91,15% до 99,69%). Это важное открытие, поскольку плотность 200 паразитов / мкл значительно ниже средней плотности паразитов, сообщаемой во многих эндемичных условиях, включая наши районы в Перу [32]. Кроме того, количество ложных срабатываний препарата Газель оценивается в 2,1%, что ниже текущих критериев ВОЗ для ДЭТ (<10%) [32].

Ограниченный размер выборки (n = 10) для крайне низких инфекций паразитемии (<200 паразитов / мкл) не позволил нам рассчитать надежную оценку чувствительности для Gazelle. Однако, учитывая, что используемый здесь магнитооптический метод является количественным, можно было бы повысить чувствительность для инфекций с низкой паразитемией, изменив объем входящей пробы.

Важно отметить, что нынешний прототип «Газели» не позволяет идентифицировать виды.Это важный недостаток в регионах, где циркулируют несколько видов и схемы лечения различаются, поскольку неправильное ведение случая может привести к плохому ответу на лечение с обострением заболевания, рецидивами или обострением [37]. В связи с этим способность к дифференциации видов в настоящее время включается в следующий прототип устройства, который будет утвержден в ближайшем будущем.

Газель представляет собой важное дополнение к набору средств диагностики малярии, которое подходит для выявления малярии в местах оказания медицинской помощи.Наши результаты показывают потенциал «Газели» как экономичного устройства для диагностики малярии, которое можно использовать в эндемичных условиях с ограниченными ресурсами. Знания, полученные в результате этого исследования, послужат основой для дальнейших достижений в преобразовании технологии в доступное, надежное и готовое к эксплуатации устройство, которое можно использовать во всех эндемичных по малярии регионах.

Дополнительная информация

S1 Рис. Диаграмма рассеяния паразитемии в сравнении с количественными магнитооптическими данными.

На рисунке показана паразитемия, определенная под микроскопом, в сравнении с количественной оценкой гемозоина, проведенной Gazelle.Между обоими показателями была обнаружена положительная корреляция (r = 0,83).

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0253232.s001

(TIF)

Благодарности

Мы хотели бы поблагодарить команду лаборатории и полевых работников в Икитосе за их поддержку в выполнении этого исследования. Мы также хотим отметить участников исследования, которые анонимно внесли свой вклад в проведение исследования.

Заявление об ограничении ответственности

Взгляды, выраженные в этой статье, принадлежат авторам и не обязательно отражают официальную политику или позицию Министерства военно-морского флота, Министерства обороны США или США.С. Правительство.

Ссылки

  1. 1. ВОЗ. Всемирный доклад о малярии Всемирная организация здравоохранения. 2019.
  2. 2. Ливези Дж., Туми П., Моррисон М., Чикателли С., Дункан Э. Х., Хамер М. и др. Открытое исследование безопасности и эффективности однократной еженедельной дозы хлорохина и азитромицина, вводимых для профилактики малярии у здоровых взрослых, зараженных устойчивым к хлорохину 7G8 Plasmodium falciparum, в модели контролируемой инфекции малярии у человека.Журнал малярии. 2020; 19 (1): 336. pmid: 32938444; PubMed Central PMCID: PMC7493140.
  3. 3. Lo E, Zhou G, Oo W, Afrane Y, Githeko A, Yan G. Низкая паразитемия при субмикроскопических инфекциях значительно влияет на диагностическую чувствительность малярии в высокогорьях Западной Кении. ПлоС один. 2015; 10 (3): e0121763. pmid: 25816298; PubMed Central PMCID: PMC4376713.
  4. 4. Гамбоа Д., Хо М.Ф., Бендезу Дж., Торрес К., Чиодини П.Л., Барнуэлл Дж. В. и др. У значительной части изолятов P. falciparum в районе Амазонки в Перу отсутствуют pfhrp2 и pfhrp3: значение для экспресс-тестов на малярию. ПлоС один. 2010; 5 (1): e8091. pmid: 20111602; PubMed Central PMCID: PMC2810332.
  5. 5. Fontecha G, Mejia RE, Banegas E, Ade MP, Mendoza L, Ortiz B и др. Делеции генов pfhrp2 и pfhrp3 Plasmodium falciparum из Гондураса, Гватемалы и Никарагуа. Журнал малярии. 2018; 17 (1): 320. pmid: 30170596; PubMed Central PMCID: PMC6119307.
  6. 6. Рашид Виана Дж. М., Акини Окот С., Сильва-Фланнери Л., Лима Барбоса Д. Р., Маседо де Оливейра А., Голдман И. Ф. и др. Делеции гена богатого гистидином белка 2 (pfhrp2) и pfhrp3 в изолятах Plasmodium falciparum из избранных сайтов в Бразилии и Боливии.ПлоС один. 2017; 12 (3): e0171150. pmid: 28301474; PubMed Central PMCID: PMC5354239.
  7. 7. Krampa FD, Aniweh Y, Awandare GA, Kanyong P. Недавний прогресс в разработке диагностических тестов на малярию. Диагностика. 2017; 7 (3). pmid: 28925968; PubMed Central PMCID: PMC5617953.
  8. 8. Луччи Н.В., Лйолье Д., Сильва-Фланнери Л., Удхаякумар В. Использование изотермической амплификации, опосредованной малахитовой зеленой петлей, для обнаружения Plasmodium spp. Паразиты. ПлоС один. 2016; 11 (3): e0151437.pmid: 26967908; PubMed Central PMCID: PMC4788150.
  9. 9. Серра-Касас Э., Гетенс П., Чихеб Д., Гамбоа Д., Розанас-Уржель А. Пилотная оценка альтернативных процедур для упрощения диагностики малярии на основе LAMP в полевых условиях. Acta Tropica. 2019; 200: 105125. pmid: 31394079
  10. 10. mal ERARCPoTfME. МАЛЕРА: Обновленная программа исследований по диагностике, лекарствам, вакцинам и борьбе с переносчиками малярии при элиминации и искоренении малярии. PLoS медицина. 2017; 14 (11): e1002455.pmid: 291; PubMed Central PMCID: PMC5708606.
  11. 11. Куадрос Дж., Мартин Рамирес А., Гонсалес И. Дж., Динг XC, Перес Танойра Р., Рохо-Маркос Дж. И др. Набор LAMP для диагностики малярии non-falciparum у пациентов, инфицированных Plasmodium ovale. Журнал малярии. 2017; 16 (1): 20. pmid: 28061871; PubMed Central PMCID: PMC5219760.
  12. 12. Viana GMR, Silva-Flannery L, Lima Barbosa DR, Lucchi N, do Valle SCN, Farias S и др. Полевая оценка анализа изотермической амплификации в реальном времени (RealAmp) для диагностики малярии в Крузейру-ду-Сул, Акко, Бразилия.ПлоС один. 2018; 13 (7): e0200492. Epub 2018/07/12. pmid: 29995953; PubMed Central PMCID: PMC6040774.
  13. 13. Луччи Н.В., Гайе М., Диалло М.А., Голдман И.Ф., Лйолье Д., Деме А.Б. и др. Оценка Illumigene Malaria LAMP: надежный инструмент молекулярной диагностики малярийных паразитов. Научный доклад 2016; 6: 36808. Epub 2016/11/09. pmid: 27827432; PubMed Central PMCID: PMC5101795 предоставлено Meridian Inc. Компания Meridian также покрыла эксплуатационные расходы на местах для этой оценки.
  14. 14.Нотоми Т., Ли С.Дж., Окимото Н., Окадзаки Ю., Такамото Т., Накамура Т. и др. Влияние тренировок с отягощениями на массу, силу и метаболизм костей у растущих крыс. Eur J Appl Physiol. 2000. 82 (4): 268–74. Epub 2000/08/25. pmid: 10958368.
  15. 15. Талунджич Э., Маганга М., Масанджа И.М., Петерсон Д.С., Удхаякумар В., Луччи Н.З. Полевая оценка фотоиндуцированных флуорогенных праймеров с переносом электронов (ПЭТ) ПЦР в реальном времени для обнаружения Plasmodium falciparum в Танзании.Журнал малярии. 2014; 13:31. Epub 2014/01/29. pmid: 24467985; PubMed Central PMCID: PMC3917897.
  16. 16. Kudyba HM, Louzada J, Ljolje D, Kudyba KA, Muralidharan V, Oliveira-Ferreira J и др. Полевая оценка петлевой изотермической амплификации малярии и малахитового зеленого в медпунктах в штате Рорайма, Бразилия. Журнал малярии. 2019; 18 (1): 98. pmid: 302; PubMed Central PMCID: PMC6434790.
  17. 17. Луччи Н.В., Нараянан Дж., Карелл М.А., Ксаявонг М., Кариуки С., ДаСилва А.Дж. и др.Молекулярная диагностика малярии с помощью флуорогенных праймеров с фотоиндуцированным переносом электронов: ПЭТ-ПЦР. ПлоС один. 2013; 8 (2): e56677. pmid: 23437209; PubMed Central PMCID: PMC3577666.
  18. 18. Делахант С., Хорнинг М.П., ​​Уилсон Б.К., Проктор Д.Л., Хегг М.С. Ограничения диагностики Plasmodium falciparum на основе гемозоина с использованием микроскопии темного поля. Журнал малярии. 2014; 13: 147. pmid: 24739286; PubMed Central PMCID: PMC4021049.
  19. 19. Ребело М., Шапиро Х.М., Амарал Т., Мело-Кристино Дж., Ханшайд Т.Обнаружение гемозоина в инфицированных эритроцитах для диагностики малярии Plasmodium falciparum — перспективы и ограничения. Acta Trop. 2012. 123 (1): 58–61. pmid: 22465900.
  20. 20. Ребело М., Соуза С., Шапиро Х.М., Мота М.М., Гробуш М.П., ​​Ханшайд Т. Новый проточно-цитометрический анализ обнаружения гемозоина для тестирования чувствительности Plasmodium falciparum в реальном времени. ПлоС один. 2013; 8 (4): e61606. pmid: 23637865; PubMed Central PMCID: PMC3634823.
  21. 21. Бутыкай А., Орбан А., Кочиш В., Шаллер Д., Бордач С., Татрай-Секерес Е. и др.Кристаллы малярийного пигмента как магнитные микророторы: ключ к высокочувствительной диагностике. Научный доклад 2013; 3: 1431. pmid: 23478535; PubMed Central PMCID: PMC3594758.
  22. 22. Newman DM, Heptinstall J, Matelon RJ, Savage L, Wears ML, Beddow J, et al. Магнитооптический путь к диагностике малярии in vivo: предварительные результаты и данные доклинических испытаний. Biophys J. 2008; 95 (2): 994–1000. pmid: 183; PubMed Central PMCID: PMC2440472.
  23. 23. Ребело М., Гренхо Р., Орбан А., Ханшайд Т.Трансдермальная диагностика малярии с использованием паровых нанопузырьков. Emerg Infect Dis. 2016; 22 (2): 343–4. pmid: 26811926; PubMed Central PMCID: PMC4734514.
  24. 24. Орбан А., Бутыкай А., Молнар А., Прохле З., Фулоп Г., Зеллес Т. и др. Оценка нового магнитооптического метода обнаружения малярийных паразитов. ПлоС один. 2014; 9 (5): e96981. Epub 2014/05/16. pmid: 24824542; PubMed Central PMCID: PMC4019541.
  25. 25. Пуканчик М., Молнар П., Орбан А., Бутыкай А., Мартон Л., Кежмарки И. и др. Высокочувствительная и быстрая характеристика развития паразитов синхронной малярии на стадии крови с помощью магнитооптического количественного определения гемозоина. Биомолекулы. 2019; 9 (10). Epub 2019/10/09. pmid: 315; PubMed Central PMCID: PMC6843464.
  26. 26. Арндт Л., Колеала Т., Орбан А., Ибам С., Люфеле Е., Тиминао Л. и др. Магнитооптическая диагностика симптоматической малярии в Папуа-Новой Гвинее. Nat Commun. 2021; 12 (1): 969. Epub 2021/02/14. pmid: 33579923; PubMed Central PMCID: PMC7881035.
  27. 27. Кумар Р., Верма А.К., Шривас С., Тота П., Сингх М.П., ​​Раджасубраманиам С. и др. Первая успешная полевая оценка нового прибора для одноминутной диагностики малярии на основе гемозоина. EClinicalMedicine. 2020; 22: 100347. pmid: 324; PubMed Central PMCID: PMC7256309.
  28. 28. Национальный эпидемиологический центр PyCdE-M. 2019.
  29. 29. Snounou G, Viriyakosol S, Zhu XP, Jarra W., Pinheiro L, do Rosario VE и др. Высокая чувствительность выявления паразитов малярии человека с помощью вложенной полимеразной цепной реакции.Молекулярная и биохимическая паразитология. 1993. 61 (2): 315–20. Epub 1993/10/01. pmid: 8264734.
  30. 30. Луччи Н.В., Карелл М.А., Журнель I, Роже Э., Гольдман I, Лйоле Д. и др. Метод ПЭТ-ПЦР для молекулярного обнаружения малярийных паразитов в национальном исследовании по эпиднадзору за малярией в Гаити, 2011. Журнал «Малярия». 2014; 13: 462-. pmid: 24401153.
  31. 31. Команда RC. R: Язык и среда для статистических вычислений. Вена, Австрия; 2013.
  32. 32. Организация WH.Эффективность экспресс-тестов на малярию: результаты тестирования продуктов ВОЗ для БДТ против малярии: 7-й раунд (2016–2017 гг.). 2017.
  33. 33. Рабинович Р.Н., Дрейкли С., Джимде А.А., Холл Б.Ф., Хэй С.И., Хемингуэй Дж. И др. МАЛЕРА: обновленная программа исследований по элиминации и искоренению малярии. PLoS медицина. 2017; 14 (11): e1002456. pmid: 291; PubMed Central PMCID: PMC5708604.
  34. 34. Росас-Агирре А., Гамбоа Д., Манрике П., Конн Дж. Э., Морено М., Лескано А.Г. и др. Эпидемиология малярии Plasmodium vivax в Перу.Am J Trop Med Hyg. 2016; 95 (6 доп.): 133–44. Epub 2016/11/02. pmid: 27799639; PubMed Central PMCID: PMC5201219.
  35. 35. Санчес Дж. Ф., Карнеро А. М., Ривера Э., Росалес Л. А., Балдевиано Г. К., Асенсиос Дж. Л. и др. Нестабильная передача малярии в южной перуанской Амазонии и ее связь с золотодобычей, Мадре-де-Диос, 2001–2012 гг. Am J Trop Med Hyg. 2017; 96 (2): 304–11. pmid: 27879461; PubMed Central PMCID: PMC5303028.
  36. 36. Baldeviano GC, Okoth SA, Arrospide N, Gonzalez RV, Sanchez JF, Macedo S и др.Молекулярная эпидемиология вспышки малярии, вызванной Plasmodium falciparum, Тумбес, Перу, 2010–2012 гг. Emerg Infect Dis. 2015; 21 (5): 797–803. pmid: 25897626; PubMed Central PMCID: PMC4412223.
  37. 37. Дуглас Н.М., Ностен Ф., Эшли Э. А., Фаифун Л., ван Вугт М., Сингхасиванон П. и др. Рецидив Plasmodium vivax после малярии falciparum и смешанных видов: факторы риска и влияние антималярийной кинетики. Clin Infect Dis. 2011; 52 (5): 612–20. pmid: 21292666; PubMed Central PMCID: PMC3060895.
Галерея моделей

Max — Херсон Модель

Галерея моделей Max — Херсон Модель

Галерея Главная


Модель:
Материал, масштаб:
ГАЗ-12 ЗИМ скорая помощь
Металл, 1:43
Модель:
Материал, масштаб:
ГАЗ-22Б Волга
Металл, 1:43
Модель:
Материал, масштаб:
ГАЗ-2705-044 Грузовой автомобиль ГАЗель
Металл, 1:43
Модель:
Материал, масштаб:
ГАЗ-3221 минивэн ГАЗель
Металл, 1:43
Модель:
Материал, масштаб:
ГАЗ-32214 ГАЗель скорая помощь
Металл, 1:43
Модель:
Материал, масштаб:
ГАЗ-3302 ГАЗель пикап
Металл, 1:43
Модель:
Материал, масштаб:
ГАЗ-33021 ГАЗель изотермический фургон «Продюс»
Металл, 1:43
Модель:
Материал, масштаб:
ГАЗ-33023 ГАЗель «Дуэт» кабина экипажа
Металл, 1:43
Модель:
Материал, масштаб:
ГАЗ-330232 ГАЗель пожарный насос
Металл, 1:43
Модель:
Материал, масштаб:
ГАЗ-53
Металл 1:43
Модель:
Материал, масштаб:
Автоцистерна ГАЗ-53
Металл, 1:43
Модель:
Материал, масштаб:
Автобус ГАЗ-53 «Вахта»
Металл, 1:43
Модель:
Материал, масштаб:
Автобус ГАЗ-3307 «Вахта»
Металл, 1:43
Модель:
Материал, масштаб:
ГАЗ-3309
Металл 1:43
Модель:
Материал, масштаб:
АКПТ-2. 1А (шасси ГАЗ-3309)
Металл, 1:43
Модель:
Материал, масштаб:
КАвЗ-3976
Металл, 1:43
Модель:
Материал, масштаб:
КрАЗ-256Б
Металл, 1:43
Модель:
Материал, масштаб:
РАФ-977ДМ ГАИ СССР
Металл, 1:43
Модель:
Материал, масштаб:
РАФ-977ИМ скорая помощь
Металл, 1:43
Модель:
Материал, масштаб:
ЗИЛ-111
Металл 1:43
Модель:
Материал, масштаб:
ЗИЛ-111Г
Металл 1:43
Модель:
Материал, масштаб:
ЗИЛ-118 «Юность»
Металл 1:43
Модель:
Материал, масштаб:
ЗИЛ-119 «Юность»
Металл 1:43
Модель:
Материал, масштаб:
ЗИЛ-164
Металл 1:43
Модель:
Материал, масштаб:
Пожарный насос ПМЗ-18 (шасси ЗИЛ-164)
Металл, 1:43
Модель:
Материал, масштаб:
ЗИС-110
Металл 1:43
Модель:
Материал, масштаб:
ЗИС-110А
Металл 1:43
Модель:
Материал, масштаб:
ЗИС-110В кабриолет
Металл, 1:43

Последнее обновление этой страницы 3 фев, 2020

Полевая проверка магнитооптического устройства обнаружения (Gazelle) для портативной диагностики Plasmodium vivax на месте

PLoS One. 2021; 16 (6): e0253232.

, Формальный анализ, Написание — первоначальный черновик, Написание — просмотр и редактирование, 1, * , Концептуализация, Написание — оригинальный черновик, Написание — просмотр и редактирование, 2 , Методология, Написание — исходный черновик, Написание — просмотр и редактирование, 1 , Методология, Написание — исходный черновик, Написание — просмотр и редактирование, 1, 3 , Методология, Написание — исходный черновик, Написание — просмотр и редактирование, 1, 4 , Методология, Написание — первоначальный проект, Написание — просмотр и редактирование, 1 , Концептуализация, Написание — оригинальный черновик, Написание — просмотр и редактирование, 1 и, Концептуализация, Написание — оригинальный черновик, Написание — просмотр и редактирование 1

Хьюго О.Вальдивия

1 Департамент паразитологии, Группа 6 медицинских исследований ВМС США (NAMRU-6), Лима, Перу

Priyaleela Thota

2 Hemex Health, Inc. , Портленд, Орегон, Соединенные Штаты Америки

Grays Braga

1 Департамент паразитологии, Группа 6 медицинских исследований ВМС США (NAMRU-6), Лима, Перу

Леонила Рикопа

1 Департамент паразитологии, Группа 6 медицинских исследований ВМС США (NAMRU-6), Лима, Перу

3 НПО «ПРИЗМА», Лима, Перу

Кеаре Баразорда

1 Кафедра паразитологии У.S. Naval Medical Research Unit 6 (NAMRU-6), Лима, Перу

4 Выснова, Лима, Перу

Карола Салас

1 Департамент паразитологии, Группа 6 медицинских исследований ВМС США (NAMRU-6), Лима, Перу

Данетт К. Бишоп

1 Департамент паразитологии, Группа 6 медицинских исследований ВМС США (NAMRU-6), Лима, Перу

Christie A. Joya

1 Департамент паразитологии, Группа 6 медицинских исследований ВМС США (NAMRU-6), Лима, Перу

Лузия Хелена Карвалью, редактор

1 Кафедра паразитологии У. S. Naval Medical Research Unit 6 (NAMRU-6), Лима, Перу

2 Hemex Health, Inc., Портленд, штат Орегон, Соединенные Штаты Америки

3 НПО «ПРИЗМА», Лима, Перу

4 Выснова, Лима, Перу

Instituto Rene Rachou, БРАЗИЛИЯ

Конкурирующие интересы: PT является сотрудником Hemex Health и сообщает личные сборы и другие платежи от Hemex Health, KB является сотрудником Vysnova и сообщает о личных гонорарах за пределами представленной работы .CAJ, DKB, HOV, GB, LR, KB, CS и DKB сообщают о грантах и ​​нефинансовой поддержке Hemex Health, США во время проведения исследования. Это не влияет на нашу приверженность политике PLOS ONE в отношении обмена данными и материалами.

Поступила 9.02.2021 г .; Принято в 2021 году 31 мая.

Это статья в открытом доступе, свободная от всех авторских прав, и ее можно свободно воспроизводить, распространять, передавать, изменять, дополнять или иным образом использовать в любых законных целях. Работа сделана доступной по лицензии Creative Commons CC0 как общественное достояние.
Дополнительные материалы
S1 Рис. Диаграмма рассеяния паразитемии в сравнении с количественными магнитооптическими данными. На рисунке показана паразитемия, определенная под микроскопом, в сравнении с количественной оценкой гемозоина, проведенной Gazelle. Между обоими показателями была обнаружена положительная корреляция (r = 0,83).

(TIF)

GUID: EBB420AC-BA8C-4F75-854B-AA6D2C821CBD

S1 Таблица: Результаты обнаружения малярии. В таблице показаны результаты для каждого из методов, использованных в этом исследовании для каждой из выборок, а также основные данные от каждого из участников, включая возраст, пол и дату сбора образца.

(XLSX)

GUID: E588BAF1-A0AF-4598-9B8D-7B157F13CE40

Заявление о доступности данных

Все соответствующие данные находятся в рукописи и S1 Fig, S1 Table.

Abstract

Основной проблемой малярии является отсутствие инструментов для точной и своевременной диагностики на местах, которые имеют решающее значение для ведения больных и эпиднадзора. Микроскопия, наряду с экспресс-диагностическими тестами, в настоящее время является основой диагностики малярии в большинстве эндемичных регионов.Однако эти методы имеют несколько ограничений. В этом исследовании оценивалась точность нового устройства для быстрой диагностики малярии Gazelle на основе образцов, собранных в перуанской Амазонии в период с 2019 по 2020 год. Диагностическая точность сравнивалась с результатами микроскопии и двух быстрых диагностических тестов (SD Bioline и BinaxNOW) с использованием 18ssr вложенной ПЦР в качестве эталонный тест. Кроме того, для количественной оценки паразитов использовался анализ ПЦР в реальном времени (ПЭТ-ПЦР). Из 217 пациентов с лихорадкой, включенных и протестированных, 180 образцов (85 P . vivax и 95 негативов) были включены в окончательный анализ. При использовании вложенной ПЦР в качестве золотого стандарта чувствительность и специфичность Gazelle составила 88,2% и 97,9% соответственно. Используя пороговое значение 200 паразитов / мкл, чувствительность Gazelle для образцов с более чем 200 мкл / мкл составила 98,67% (95% ДИ: от 92,79% до 99,97%), тогда как чувствительность для образцов менее 200 мкл / мкл (n = 10) составлял 12,5% (95% ДИ: от 0,32% до 52,65%). Чувствительность и специфичность Газели были статистически аналогичны микроскопии (чувствительность = 91.8, специфичность = 100%, p = 0,983) и выше, чем у SD Bioline (чувствительность = 82,4, специфичность = 100%, p = 0,016) и BinaxNOW (чувствительность = 71,8%, специфичность = 97,9%, p = 0,002). Диагностическая точность Газели для выявления малярии в P . Инфекции vivax были сопоставимы с результатами световой микроскопии и превосходили оба ДЭТ даже при наличии инфекций с низкой паразитемией. Производительность «Газели» делает ее ценным инструментом для диагностики малярии и активного выявления случаев заболевания, который можно использовать в различных эндемичных по малярии регионах.

Введение

Малярия — серьезная угроза общественному здоровью, которая привела к более чем 228 миллионам случаев и 405 000 смертей в 2018 году [1]. Заболевание вызывается пятью различными видами Plasmodium ( P . falciparum , P . vivax , P . malariae , P , ovale и P . ). knowlesi ), что подвергает риску более 40% населения мира [1]. Малярия также представляет опасность для военной оперативной готовности, поскольку в тропических регионах потери людских ресурсов больше, чем травмы, связанные с боевыми действиями [2].

В настоящее время лечение малярии во всех эндемичных регионах, независимо от интенсивности их передачи, назначается после того, как только случаи заболевания подтверждены диагностическим тестом, который представляет собой либо ДЭТ, либо световую микроскопию. Однако оба метода имеют ряд недостатков, ограничивающих их использование. Для световой микроскопии требуется постоянная мощность, высококвалифицированный персонал, длительное время обработки, а на ее чувствительность влияет низкий уровень паразитемии [3]. В случае ДЭТ их чувствительность также ограничена при инфекциях с низкой паразитемией, и их универсальность не может быть гарантирована из-за высокого уровня ложноотрицательных результатов из-за делеций HRP2 и HRP3 в P . falciparum [4–6].

Молекулярные подходы, такие как ПЦР и петлевой изотермической амплификации (LAMP), были разработаны для высокочувствительного и специфического обнаружения [7–9]. Однако эти методы могут быть относительно дорогими и требуют лабораторных мощностей и обученного персонала, которые недоступны ни в эндемичных регионах, ни в полевых условиях [10].

Методы на основе LAMP были широко изучены, и многие варианты были протестированы, показав хорошие результаты в полевых и лабораторных условиях [11–13].Оптимальная эффективность LAMP объясняется использованием полимеразы Bst, которая считается более устойчивой, чем обычная полимераза Taq, и использованием 4–6 специфичных праймеров [14].

Фотоиндуцированный перенос электронов (ПЭТ-ПЦР) — это анализ в реальном времени, разработанный в качестве инструмента для эпиднадзора за малярией в эндемичных условиях [15, 16]. Эта методология имеет преимущества по сравнению с традиционной вложенной ПЦР и другими платформами реального времени из-за использования самозатухающих праймеров, короткого времени обработки и простоты проведения реакции [7].Метод ПЭТ-ПЦР можно использовать как мультиплексную платформу, позволяющую сократить время и стоимость [17].

Тем не менее, по-прежнему существует потребность в высококачественных, рентабельных и эффективных инструментах диагностики малярии, позволяющих выявлять случаи малярии на местах и ​​своевременно обнаруживать малярию, которая не только улучшит здоровье пациентов, но и поможет. для предотвращения передачи и снижения тяжести заболевания [1, 10].

Чтобы восполнить этот пробел, мы оценили новое быстрое устройство с питанием от батареи, которое позволяет обнаруживать частицы гемозоина в крови инфицированных пациентов по имени Газель.Кристаллы гемозоина образуются в результате полимеризации димеров феррипротопорфирина IX, который является побочным продуктом переваривания гемоглобина, генерируемого всеми видами малярии [18]. Ранее предпринимались попытки использовать гемозоин в качестве биомаркера для диагностики малярии [19–22], многие из них были безуспешными и неприменимыми в полевых условиях [18, 23].

Однако есть многообещающие доказательства того, что магнитооптическое обнаружение потенциально может позволить чувствительную идентификацию малярии. Предыдущее исследование in vitro на P . falciparum показали, что эта технология потенциально может обнаруживать до 40 паразитов на микролитр крови [24]. Более того, обнаружение может происходить на ранних стадиях заражения и поддерживается на разных стадиях жизненного цикла паразита [25]. Кроме того, появляется все больше клинических данных, показывающих, что магнитооптическое обнаружение может быть полезно в P . vivax преобладающие настройки исключения [26].

Предыдущее исследование с использованием Газели показало многообещающие результаты для P . falciparum обнаружение в условиях высокой передачи в Индии [27]. Основываясь на этом исследовании, мы стремились оценить диагностические характеристики «Газели» на участке с низким уровнем передачи с помощью P . vivax преобладание в перуанском бассейне Амазонки.

Методы

Исследовательские центры

Образцы были собраны в результате пассивного эпиднадзора, в котором участвовали участники с лихорадкой в ​​период с 2019 по 2020 год в девяти медицинских учреждениях, расположенных в городе Икитос и близлежащих населенных пунктах.Икитос — столица региона Лорето, расположенного на северо-западе перуанского бассейна Амазонки ( ). На этот регион приходится 28,7% территории Перу, где заболеваемость малярией в 2019 году составила 1,8% (в 2019 году было зарегистрировано 21 973 случая малярии), что составляет более 90% всех случаев малярии, зарегистрированных в Перу за этот год.

Учебные площадки (синие кружки), расположенные в городе Икитос и близлежащих населенных пунктах.

Карта создана с использованием открытых данных openstreetmap.org: участники OpenStreetMap.

Случаи малярии в Лорето распространены в сельских общинах с ограниченным доступом к медицинскому обслуживанию. Большинство случаев вызвано P . vivax в соотношении 4: 1 с P . falciparum . Диагностика малярии в первую очередь основана на микроскопии в соответствии с национальными рекомендациями Перу [28].

Этические соображения

Протокол исследования был одобрен Советом по надзору учреждения США.S Военно-морское медицинское исследовательское подразделение 6 (NAMRU-6) в соответствии со всеми применимыми федеральными постановлениями, регулирующими защиту людей (протокол NMRCD.2007.0004). Взрослые участники предоставили письменное согласие, а несовершеннолетние — письменное согласие и согласие родителей / опекунов.

Размер выборки

Размер выборки был оценен с учетом чувствительности не менее 70% для Газели с 10% относительной точностью при 95% достоверности и 80% мощности. В результате минимальный размер выборки составил 165 человек.

Отбор проб и микроскопия малярии

Обученные флеботомисты собрали четыре мл цельной крови путем венепункции от каждого участника в стерильные вакцины, обработанные ЭДТА. Образцы были доставлены в рамках холодовой цепи в течение двух часов после сбора на объекты NAMRU-6 в Икитосе. Для каждого участника были приготовлены два тонких и толстых мазка крови, окрашены 10% Гимза и прочитаны двумя микроскопистами в лаборатории NAMRU-6 в Икитосе. Результаты были предоставлены после считывания 200 иммерсионных полей, а положительные слайды были количественно определены с использованием 6000 лейкоцитов / мкл крови в качестве эталона.Собранная кровь использовалась для RDT и тестирования Gazelle в Икитосе, а аликвота была отправлена ​​в лабораторию NAMRU-6 в Лиме для экстракции ДНК и молекулярных анализов.

Тестирование БДТ и устройства «Газель»

Два ДЭТ были использованы для диагностики малярийной инфекции в лаборатории NAMRU-6 Икитос одним лаборантом: i) SD BIOLINE (05FK80-40-0) и ii) BinaxNOW (665–025). Эти два RDT основаны на обнаружении антигена, содержащего богатый гистидином протеин II (HRP-II) P . falciparum и лактатдегидрогеназа (SD Bioline) или альдолаза (BinaxNow) видов Plasmodium в цельной крови человека.

Тестирование устройства «Газель» было проведено в лаборатории Икитос одним и тем же лаборантом со свежими образцами, которые были обработаны в течение четырех часов с момента забора. Устройство состоит из настольного ридера и одноразовых одноразовых двухкамерных картриджей ( ). С помощью пипетки 15 мкл цельной крови капали в нижнюю камеру картриджа вместе с 80 мкл буфера Gazelle (2% тритона в воде).Затем поместили верхнюю камеру, и образец обработали ультразвуком через стенку картриджа с помощью ультразвукового устройства, встроенного в Газель.

Порядок проведения испытаний аппарата «Газель».

15 мкл цельной крови помещают в картридж с 80 мкл буфера Gazelle цельной крови. Образец помещается в устройство «Газель», которое лизирует образец ультразвуком, а затем несколько раз пропускает магниты через образец. Обнаружение малярии оценивается путем сравнения количества света, проходящего через образец, с магнитным полем и без него.

На этапе обработки ультразвуком лизируются эритроциты и высвобождается гемозоин в положительных образцах. Затем внутренние магниты проходят несколько раз над образцом, и возникающие магнитные поля выравнивают кристаллы гемозоина, если они присутствуют. Эта конфигурация может блокировать прохождение света через образец. Наконец, внутренний светодиод излучает свет через образец, и количество света, проходящего через образец, измеряется с магнитным полем и без него () . Количество заблокированного света пропорционально количеству гемозоина в образце.Наличие любого количества гемозоина указывает на малярийную инфекцию.

Результат отображается на считывателе в течение одной минуты. Тест теоретически обнаруживает все виды малярии, поскольку гемозоин вырабатывается всеми ими, однако он не может различать виды. Калибровку прибора проводили с использованием положительного и отрицательного контроля каждую неделю или при смене номера партии картриджей. Для целей настоящего исследования результаты «Газели» не отображались, чтобы сотрудники лаборатории NAMRU-6 были ослеплены.

Вложенная ПЦР

Вложенная ПЦР была проведена двумя лаборантами в NAMRU-6 в Лиме. Сначала ДНК выделяли из 200 мкл цельной крови с помощью набора DNeasy Blood & Tissue (Qiagen, Germantown, MD), элюировали 70 мкл буфера для элюции и использовали для ПЦР с вложенной 18S рРНК [29]. Первая реакция амплифицирует рибосомный ген субъединицы 18S рРНК (ssrRNA), а вторая реакция нацелена на специфические области для каждого вида плазмодия ( P , falciparum и P . vivax) . Для первой реакции использовали 5 мкл ДНК-матрицы, а 5 мкл амплифицированного продукта использовали во второй реакции. Обе реакции проводили в объеме 50 мкл, содержащем 1X буфер, 2 мМ MgCL2, 125 мкМ dNTP, 250 нМ каждого праймера и 1 единицу полимеразы Taq (Invitrogen, Waltham, MA). Результаты были визуализированы в 2% агарозном геле, окрашенном GelRed®. Техники не видели результатов микроскопии, RDT и Gazelle.

Фотоиндуцированный перенос электронов (ПЭТ-ПЦР)

Все образцы были протестированы в двух экземплярах с использованием ПЭТ-ПЦР Plasmodium , род, для количественной оценки плотности паразитов [17, 30].Все положительные по роду образцы были дополнительно протестированы с помощью одноплексных реакций для обнаружения P . falciparum и P . vivax .

Реакцию рода проводили в объеме 20 мкл, который содержал 5 мкл очищенной ДНК, 2X TaqMan Environment buffer 2.0 (Applied BioSystems, Foster City, CA) и 250 нМ прямого и обратного праймеров рода. Одноплексные видоспецифичные реакции содержали ту же смесь, но с концентрацией 125 нМ HEX-меченного видоспецифичного праймера.

Реакции ПЭТ-ПЦР выполнялись в системе для количественной ПЦР Mx3005P (Agilent technologies, Санта-Клара, Калифорния), а результаты визуализировались в программном обеспечении для количественной ПЦР MXpro. Условия термоциклирования для родовой и видоспецифичной ПЭТ-ПЦР состояли из начальной денатурации при 95 ° C в течение 10 минут и 45 циклов денатурации при 95 ° C в течение 10 секунд с последующим отжигом при 60 ° C в течение 40 секунд. Пороговый цикл (Ct) ниже 41 использовался для разделения положительных и отрицательных образцов. Техники не видели результатов микроскопии, RDT и Gazelle.

Время возврата и анализ затрат

Мы оценили время возврата и стоимость одного образца для экспертной микроскопии, вложенной ПЦР, SD Bioline, BinaxNOW и Gazelle. Смета расходов включала подготовку образцов для микроскопии; Выделение ДНК, реакция амплификации и визуализация результатов для ПЦР; Стоимость ДЭТ за образец, а также затраты на картридж и буфер для Газели. Стоимость рабочей силы и оборудования не была включена в анализ.

Статистические методы

Чувствительность и специфичность с 95% доверительным интервалом (95% ДИ) были рассчитаны для микроскопии, RDT и Gazelle с использованием 18S рРНК-вложенной ПЦР в качестве эталонного теста.Тест МакНемара использовался для выявления статистических различий между микроскопией, RDT и Gazelle. Коэффициент Каппа использовался для оценки соответствия между этими диагностическими тестами, в то время как U-тест Манна-Уитни использовался для оценки различий в паразитемии между истинно положительными и ложно отрицательными результатами. Эти анализы проводились в пакете «stats», реализованном в R [31]. Данные микроскопии и количественной оценки ПЭТ-ПЦР были использованы для оценки предела обнаружения (LoD) Gazelle на клинических образцах с использованием самонастраиваемых контрольных точек, реализованных в пакете «cutpointr» в R.

Результаты

Охват и характеристики населения

В течение периода исследования 217 участников были набраны и обследованы на малярию. В общей сложности 32 участника были исключены из окончательного анализа из-за того, что образец крови не соответствовал требованиям для выполнения всех четырех тестов. Из этих 32 образцов микроскопия идентифицировала 11 P . vivax , 3 P . falciparum и 18 негативов; BinaxNow привел к 10 non-P . falciparum положительных и 22 отрицательных, тогда как SDBioline дало 10 P . vivax и 22 негатива.

Из оставшихся 185 образцов частота положительных результатов на малярию при микроскопии составила 44,9% (83/185), по SD BIOLINE 38,9% (72/185), по BinaxNOW 35,6% (66/185), по Nested PCR 48,6% (90/185) и Газель 43,8% (81/185) ( S1 Таблица ).

Всего четыре P . falciparum и один смешанный P . vivax / P . falciparum случаев были обнаружены с помощью вложенной ПЦР. Весь последующий анализ проводился с оставшимися 180 образцами (85 P . vivax и 95 негативов, как определено с помощью вложенной ПЦР).

Средний возраст составлял 33 года (диапазон 5–79), 60,5% составляли мужчины. У участников средняя плотность паразитов составляла 606 паразитов / мкл (12–61 773 паразитов / мкл), а недавняя история противомалярийного лечения была зарегистрирована у 6 участников ( ).

Таблица 1

Характеристики участников, включенных в исследование.

Переменная Значения
Участники исследования (N) 180
Средний возраст (лет) 33
возрастной диапазон
Пол (% мужчин) 60.5%
Средняя плотность паразитов в положительных образцах (паразиты на мкл) 606
Диапазон паразитемии в положительных образцах (паразитов на мкл) 12–61 773
Диагноз малярии в предыдущем месяце (N) 5
Противомалярийное лечение в предыдущем месяце (N) 6

Диагностические характеристики Газели и другие диагностические тесты

Использование 18S рРНК-вложенной ПЦР в качестве эталона, микроскопия имела чувствительность для P . vivax 91,8% (95% ДИ: 83,8–96,6%) и специфичность 100% (95% ДИ: 96,2–100%). SD BIOLINE имел чувствительность 82,4% (95% ДИ: 72,6–89,8%) и специфичность 100% (95% ДИ: 96,2–100%), тогда как BinaxNOW имел чувствительность 71,8% (95% ДИ: 61%). — 81%) и специфичность 97,9% (95% ДИ: 92,6% — 99,7%). Газель имела чувствительность 88,2% (95% ДИ: 79,4–94,2%) и специфичность 97,9% (95% ДИ: 92,6–99,7%) ( ).

Чувствительность (синие точки), специфичность (красные точки) и 95% доверительный интервал для обнаружения малярии с помощью микроскопии, SD Bioline, BinaxNOW и Gazelle в P . vivax с использованием ПЦР с вложенной 18S рРНК в качестве эталона.

При использовании порогового значения 200 паразитов / мкл, как в программе обеспечения качества исследований ВОЗ [32], чувствительность Gazelle к образцам с более чем 200 паразитов / мкл составила 98,67% (95% доверительный интервал: от 92,79% до 99,97%. ), тогда как чувствительность для образцов с концентрацией менее 200 паразитов / мкл составила 12,5% (95% ДИ: от 0,32% до 52,65%).

Каппа Коэна показала, что Газель показала каппа 0,94 (95% ДИ: 0,89–0,99) по сравнению с микроскопией и каппа 0.87 (95% ДИ: 0,79–0,94) по сравнению с вложенной ПЦР. Площадь под кривой ROC составила 0,93 для Газели, 0,96 для микроскопии, 0,91 для SD Bioline и 0,85 для BinaxNOW ( ). Тест МакНемара не показал статистических различий между результатами Газели по сравнению с микроскопией (р = 0,983). Однако статистически значимые различия были обнаружены между Gazelle и SD Bioline и BinaxNOW (p = 0,016 и p = 0,002, соответственно).

ROC-анализ.

На рисунке показаны кривые ROC для BinaxNow, SD BIOLINE, микроскопии и Gazelle в сравнении с вложенной ПЦР в качестве эталонного теста.Газель показала AUC 0,93, что сравнимо с микроскопией с AUC 0,96 и выше, чем у BinaxNow (AUC = 0,85) и SD BIOLINE (AUC = 0,91).

Предел обнаружения Gazelle при инфекциях P. vivax

Используя 18S рРНК-вложенную ПЦР в качестве эталона, всего было обнаружено 10 ложноотрицательных результатов (FN) для Gazelle. Из них все были FN по обоим RDT и 7 по микроскопии. Средняя паразитемия в 3 положительных при микроскопии образцах Газель FN составила 131 п / мкл, а средняя паразитемия для субмикроскопических образцов Газели FN была равна 1.4 мкл / мкл с использованием ПЭТ-ПЦР для количественного определения паразитемии. Газель имела 2 ложноположительных результата (FP) при использовании ПЦР с вложенной 18S рРНК в качестве эталона. Однако один FP оказался положительным с помощью ПЭТ-ПЦР с паразитемией 0,63 п / мкл.

U-критерий Манна-Уитни показал значительные различия в средней паразитемии у истинно положительных результатов «Газель» и «Газель FN» (p <0,00001). В связи с этим оптимальный предел паразитемии для положительного результата на газель был оценен между 207 и 323 паразитами / мкл с использованием данных микроскопии и количественной оценки ПЭТ-ПЦР, соответственно ( ).

Распределение плотности паразитов.

Ящичковая диаграмма показывает распределение плотности паразитов, оцененное с помощью микроскопии и ПЭТ-ПЦР, вдоль среднего, нижнего и верхнего квартилей. Оптимальный предел паразитемии для положительного результата «Газель» показан красной пунктирной линией.

Магнитооптический метод, использованный в данном исследовании, является количественным, поскольку он определяет уровни гемозоина в образце. В этом отношении наши результаты показывают положительную корреляцию между плотностью паразитов и сигналом гемозоина, обнаруженным Газелью (r = 0.83) ( S1 Рис ).

Время выполнения и анализ затрат

Наши результаты показывают, что у Gazelle было более короткое время выполнения, чем у SD Bioline и BinaxNOW, с расчетным временем в пять минут на тест, включая подготовку образца и считывание ( ). Стоимость газели за тест оценивалась в один доллар США за тест, что ниже, чем у BinaxNOW, и аналогично микроскопии и SD Bioline ( ).

Таблица 2

Срок выполнения и анализ затрат.

Сметная стоимость включает реагенты и расходные материалы для выделения ДНК и подготовки слайдов. Без оборудования, без затрат на рабочую силу.

Процедуры Стоимость (долл. США) за образец Время выполнения (минуты) Практическая работа (минуты)
Микроскопия 404925050
Вложенная ПЦР $ 9,05 540 80
SD Bioline $ 0.60 20 5
BinaxNOW $ 42,85 20 5
Газель $ 1.0050 91

03 в руководствах указано, что лечение малярии следует проводить только в случаях с положительным результатом диагностического теста, которым является либо ДЭТ, либо световая микроскопия [10]. Кроме того, диагностика малярии является не только ключом к прямому лечению, но также имеет решающее значение для эпиднадзора и выявления резервуаров передачи в эндемичных условиях [10].Однако ДЭТ и световая микроскопия имеют ряд ограничений, которые затрудняют их использование в полевых условиях. Следовательно, необходимы новые подходы к применению в полевых условиях для упреждающего выявления случаев заболевания в эндемичных условиях.

В этом исследовании мы оценили новое устройство для быстрой диагностики в месте оказания медицинской помощи (Gazelle) и оценили его эффективность по сравнению с микроскопией и двумя RDT (SD Bioline и BinaxNOW) с использованием вложенной ПЦР в качестве золотого стандарта. Результаты текущего исследования показали, что чувствительность и специфичность Gazelle были подобны микроскопии и лучше, чем RDT, которые являются основными методами диагностики, используемыми в медицинских центрах в Перу и других эндемичных регионах.

Наши результаты согласуются с недавним исследованием характеристик Газели в Индии с преобладанием P . falciparum [27]. Предыдущее исследование показало, что Gazelle продемонстрировала чувствительность и специфичность 82% и 98% соответственно; которые близки к значениям чувствительности и специфичности 88,2% и 97,9% из нашего исследования. Эти результаты говорят о том, что диагностические характеристики Газели аналогичны Р . falciparum и P . vivax кейсы.

Это важный вывод, поскольку преобладание видов варьируется в зависимости от эндемичных регионов. Кроме того, в одном и том же регионе могут происходить смещения преобладающих видов в результате мероприятий по борьбе с малярией, которые, как правило, более эффективны против P . falciparum , чем P . vivax или введение новых штаммов, как показано ранее [33–36].

«Газель» занимает мало времени (5 минут) по сравнению с микроскопией (2 часа), ДЭТ (20 минут) и ПЦР (9 часов), а стоимость одного теста сравнима с микроскопией и ДЭТ.Кроме того, стоимость устройства «Газель» составляет примерно 700 долларов, что сопоставимо со стоимостью базового светового микроскопа, и устройство может выдержать более 20 000 тестов в течение своего предполагаемого жизненного цикла.

В этом отношении наши данные показывают, что Gazelle может дополнять микроскопию или использоваться в качестве альтернативы для диагностики малярии в удаленных или ограниченных в ресурсах странах. Этот потенциал для диагностики на месте дополнительно поддерживается минимальным обучением, необходимым для работы с Газелью, и отсутствием вариабельности, зависящей от наблюдателя, как в микроскопии.

При использовании программы обеспечения качества ВОЗ RDT в качестве эталона, чувствительность Gazelle к образцам с высокой плотностью паразитов (> 200 паразитов / мкл) составила 97,47% (95% доверительный интервал: от 91,15% до 99,69%). Это важное открытие, поскольку плотность 200 паразитов / мкл значительно ниже средней плотности паразитов, сообщаемой во многих эндемичных условиях, включая наши районы в Перу [32]. Кроме того, количество ложных срабатываний препарата Газель оценивается в 2,1%, что ниже текущих критериев ВОЗ для ДЭТ (<10%) [32].

Ограниченный размер выборки (n = 10) для случаев заражения чрезвычайно низкими паразитемиями (<200 паразитов / мкл) не позволил нам рассчитать надежную оценку чувствительности для Gazelle.Однако, учитывая, что используемый здесь магнитооптический метод является количественным, можно было бы повысить чувствительность для инфекций с низкой паразитемией, изменив объем входящей пробы.

Важно отметить, что нынешний прототип «Газели» не позволяет идентифицировать виды. Это важный недостаток в регионах, где циркулируют несколько видов и схемы лечения различаются, поскольку неправильное ведение случая может привести к плохому ответу на лечение с обострением заболевания, рецидивами или обострением [37].В связи с этим способность к дифференциации видов в настоящее время включается в следующий прототип устройства, который будет утвержден в ближайшем будущем.

«Газель» представляет собой важное дополнение к набору средств диагностики малярии, которое подходит для выявления малярии в местах оказания медицинской помощи. Наши результаты показывают потенциал «Газели» как экономичного устройства для диагностики малярии, которое можно использовать в эндемичных условиях с ограниченными ресурсами. Знания, полученные в результате этого исследования, послужат основой для дальнейших достижений в преобразовании технологии в доступное, надежное и готовое к эксплуатации устройство, которое можно использовать во всех эндемичных по малярии регионах.

Дополнительная информация

S1 Рис.
Диаграмма рассеяния паразитемии в сравнении с количественными магнитооптическими данными.

На рисунке показана паразитемия, определенная под микроскопом, в сравнении с количественной оценкой гемозоина, проведенной Газелью. Между обоими показателями была обнаружена положительная корреляция (r = 0,83).

(TIF)

S1 Таблица
Результаты выявления малярии.

В таблице показаны результаты для каждого из методов, использованных в этом исследовании для каждой из выборок, а также основные данные от каждого из участников, включая возраст, пол и дату сбора образца.

(XLSX)

Благодарности

Мы хотели бы поблагодарить команду лаборатории и полевых работников в Икитосе за их поддержку в выполнении этого исследования. Мы также хотим отметить участников исследования, которые анонимно внесли свой вклад в проведение исследования.

Заявление об ограничении ответственности

Взгляды, выраженные в этой статье, принадлежат авторам и не обязательно отражают официальную политику или позицию Министерства военно-морского флота, Министерства обороны или США.С. Правительство.

Заявление о финансировании

Эта работа была частично профинансирована Hemex Health, США в рамках CRADA 18-10302 и Управлением по надзору за здоровьем в вооруженных силах США (AFHSD) / Отделение глобального надзора за возникающими инфекциями (GEIS), PROMIS ID P00144_20_N6_02, 2019- 2020. Спонсоры предоставили поддержку в виде заработной платы авторам PT и KB, но не сыграли никакой дополнительной роли в дизайне исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.Конкретные роли этих авторов сформулированы в разделе вкладов авторов.

Доступность данных

Все соответствующие данные находятся в рукописи и S1 Fig, S1 Table.

Список литературы

1. ВОЗ. Всемирный доклад о малярии Всемирная организация здравоохранения. 2019.

2. Ливези Дж., Туми П., Моррисон М., Чикателли С., Дункан Э. Х., Хамер М. и др .. Открытое исследование безопасности и эффективности однократной еженедельной дозы хлорохина и азитромицина, вводимых для профилактики малярии в здоровые взрослые, зараженные устойчивым к хлорохину 7G8 Plasmodium falciparum в модели контролируемой человеческой малярии.Журнал малярии. 2020; 19 (1): 336. DOI: 10.1186 / s12936-020-03409-z; PubMed Central PMCID: PMC7493140. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 3. Lo E, Zhou G, Oo W, Afrane Y, Githeko A, Yan G. Низкая паразитемия при субмикроскопических инфекциях значительно влияет на диагностическую чувствительность малярии в высокогорьях Западной Кении. ПлоС один. 2015; 10 (3): e0121763. DOI: 10.1371 / journal.pone.0121763; PubMed Central PMCID: PMC4376713. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 4. Гамбоа Д., Хо М.Ф., Бендезу Дж., Торрес К., Чиодини П.Л., Барнуэлл Дж. В. и др.. У значительной части изолятов P. falciparum в районе Амазонки в Перу отсутствуют pfhrp2 и pfhrp3: значение для экспресс-тестов на малярию. ПлоС один. 2010; 5 (1): e8091. DOI: 10.1371 / journal.pone.0008091; PubMed Central PMCID: PMC2810332. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 5. Fontecha G, Mejia RE, Banegas E, Ade MP, Mendoza L, Ortiz B и др. Делеции генов pfhrp2 и pfhrp3 Plasmodium falciparum из Гондураса, Гватемалы и Никарагуа. Журнал малярии. 2018; 17 (1): 320.DOI: 10.1186 / s12936-018-2470-7; PubMed Central PMCID: PMC6119307. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 6. Rachid Viana GM, Akinyi Okoth S, Silva-Flannery L, Lima Barbosa DR, Macedo de Oliveira A, Goldman IF и др. Делеции гистидин-богатого белка 2 (pfhrp2) и гена pfhrp3 в изолятах Plasmodium falciparum из избранных сайтов в Бразилии и Боливия. ПлоС один. 2017; 12 (3): e0171150. DOI: 10.1371 / journal.pone.0171150; PubMed Central PMCID: PMC5354239. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 7.Krampa FD, Aniweh Y, Awandare GA, Kanyong P. Недавний прогресс в разработке диагностических тестов на малярию. Диагностика. 2017; 7 (3). DOI: 10.3390 / Diagnostics7030054; PubMed Central PMCID: PMC5617953. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 8. Луччи Н.В., Лйолье Д., Сильва-Фланнери Л., Удхаякумар В. Использование изотермической амплификации, опосредованной малахитовой зеленой петлей, для обнаружения Plasmodium spp. Паразиты. ПлоС один. 2016; 11 (3): e0151437. DOI: 10.1371 / journal.pone.0151437; PubMed Central PMCID: PMC4788150.[Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 9. Серра-Касас Э., Гетенс П., Чихеб Д., Гамбоа Д., Розанас-Уржель А. Пилотная оценка альтернативных процедур для упрощения диагностики малярии на основе LAMP в полевых условиях. Acta Tropica. 2019; 200: 105125. DOI: 10.1016 / j.actatropica.2019.105125 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 10. mal ERARCPoTfME. МАЛЕРА: Обновленная программа исследований по диагностике, лекарствам, вакцинам и борьбе с переносчиками малярии при элиминации и искоренении малярии. PLoS медицина. 2017; 14 (11): e1002455.DOI: 10.1371 / journal.pmed.1002455; PubMed Central PMCID: PMC5708606. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 11. Куадрос Дж., Мартин Рамирес А., Гонсалес И. Дж., Динг XC, Перес Танойра Р., Рохо-Маркос Дж. И др. Набор LAMP для диагностики не-falciparum малярии у пациентов, инфицированных Plasmodium ovale. Журнал малярии. 2017; 16 (1): 20. DOI: 10.1186 / s12936-016-1669-8; PubMed Central PMCID: PMC5219760. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 12. Viana GMR, Silva-Flannery L, Lima Barbosa DR, Lucchi N, do Valle SCN, Farias S и др.. Полевая оценка анализа изотермической амплификации в реальном времени (RealAmp) для диагностики малярии в Крузейру-ду-Сул, Акко, Бразилия. ПлоС один. 2018; 13 (7): e0200492. Epub 2018/07/12. DOI: 10.1371 / journal.pone.0200492; PubMed Central PMCID: PMC6040774. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 13. Луччи Н.В., Гайе М., Диалло М.А., Гольдман И.Ф., Лйолье Д., Деме А.Б. и др. Оценка лампы Illumigene Malaria LAMP: надежный инструмент молекулярной диагностики малярийных паразитов. Научный доклад 2016; 6: 36808.Epub 2016/11/09. DOI: 10,1038 / srep36808; PubMed Central PMCID: PMC5101795 предоставлено Meridian Inc. Компания Meridian также покрыла эксплуатационные расходы на местах для этой оценки. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 14. Нотоми Т., Ли С.Дж., Окимото Н., Окадзаки Ю., Такамото Т., Накамура Т. и др. Влияние тренировок с отягощениями на массу, силу и обновление костей у растущих крыс. Eur J Appl Physiol. 2000. 82 (4): 268–74. Epub 2000/08/25. DOI: 10.1007 / s004210000195. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 15.Талунджич Э., Маганга М., Масанджа И.М., Петерсон Д.С., Удхаякумар В., Луччи Н.З. Полевая оценка фотоиндуцированных флуорогенных праймеров с переносом электронов (ПЭТ) ПЦР в реальном времени для обнаружения Plasmodium falciparum в Танзании. Журнал малярии. 2014; 13:31. Epub 2014/01/29. DOI: 10.1186 / 1475-2875-13-31; PubMed Central PMCID: PMC3917897. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 16. Kudyba HM, Louzada J, Ljolje D, Kudyba KA, Muralidharan V, Oliveira-Ferreira J и др. Полевая оценка изотермического усиления, опосредованного петлей малярии и малахита, в медицинских пунктах в штате Рорайма, Бразилия.Журнал малярии. 2019; 18 (1): 98. DOI: 10.1186 / s12936-019-2722-1; PubMed Central PMCID: PMC6434790. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 17. Луччи Н.В., Нараянан Дж., Карелл М.А., Ксаявонг М., Кариуки С., ДаСилва А.Дж. и др. Молекулярная диагностика малярии с помощью флуорогенных праймеров с фотоиндуцированным переносом электронов: ПЭТ-ПЦР. ПлоС один. 2013; 8 (2): e56677. DOI: 10.1371 / journal.pone.0056677; PubMed Central PMCID: PMC3577666. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 18. Делахант С., Хорнинг М.П., ​​Уилсон Б.К., Проктор Д.Л., Хегг М.С.Ограничения диагностики Plasmodium falciparum на основе гемозоина с использованием микроскопии темного поля. Журнал малярии. 2014; 13: 147. DOI: 10.1186 / 1475-2875-13-147; PubMed Central PMCID: PMC4021049. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 19. Ребело М., Шапиро Х.М., Амарал Т., Мело-Кристино Дж., Ханшайд Т. Обнаружение гемозоина в инфицированных эритроцитах для диагностики малярии Plasmodium falciparum — перспективы и ограничения. Acta Trop. 2012. 123 (1): 58–61. DOI: 10.1016 / j.actatropica.2012.03.005. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 20.Ребело М., Соуза С., Шапиро Х.М., Мота М.М., Гробуш М.П., ​​Ханшайд Т. Новый проточно-цитометрический анализ обнаружения гемозоина для тестирования чувствительности Plasmodium falciparum в реальном времени. ПлоС один. 2013; 8 (4): e61606. DOI: 10.1371 / journal.pone.0061606; PubMed Central PMCID: PMC3634823. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 21. Бутыкай А., Орбан А., Кочиш В., Шаллер Д., Бордач С., Татрай-Секерес Э. и др. Кристаллы пигмента малярии как магнитные микророторы: ключ к высокочувствительной диагностике. Научный представитель2013; 3: 1431. DOI: 10,1038 / srep01431; PubMed Central PMCID: PMC3594758. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 22. Newman DM, Heptinstall J, Matelon RJ, Savage L, Wears ML, Beddow J и др .. Магнитооптический путь к диагностике малярии in vivo: предварительные результаты и данные доклинических испытаний. Biophys J. 2008; 95 (2): 994–1000. DOI: 10.1529 / biophysj.107.128140; PubMed Central PMCID: PMC2440472. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 23. Ребело М., Гренхо Р., Орбан А., Ханшайд Т.Трансдермальная диагностика малярии с использованием паровых нанопузырьков. Emerg Infect Dis. 2016; 22 (2): 343–4. DOI: 10.3201 / eid2202.151203; PubMed Central PMCID: PMC4734514. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 24. Орбан А., Бутыкай А., Молнар А., Прохле З., Фулоп Г., Зеллес Т. и др. Оценка нового магнитооптического метода обнаружения малярийных паразитов. ПлоС один. 2014; 9 (5): e96981. Epub 2014/05/16. DOI: 10.1371 / journal.pone.0096981; PubMed Central PMCID: PMC4019541. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 25.Пуканчик М., Молнар П., Орбан А., Бутыкай А., Мартон Л., Кежмарки И. и др. Высокочувствительная и быстрая характеристика развития паразитов малярии на стадии синхронизированной крови с помощью магнитооптического количественного определения гемозоина. Биомолекулы. 2019; 9 (10). Epub 2019/10/09. DOI: 10,3390 / biom

79; PubMed Central PMCID: PMC6843464. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 26. Арндт Л., Колеала Т., Орбан А., Ибам С., Люфеле Э, Тиминао Л. и др. Магнитооптическая диагностика симптоматической малярии в Папуа-Новой Гвинее.Nat Commun. 2021; 12 (1): 969. Epub 2021/02/14. DOI: 10,1038 / s41467-021-21110-ш; PubMed Central PMCID: PMC7881035. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 27. Кумар Р., Верма А.К., Шривас С., Тота П., Сингх М.П., ​​Раджасубраманиам С. и др .. Первая успешная полевая оценка нового одноминутного устройства для диагностики малярии на основе гемозоина. EClinicalMedicine. 2020; 22: 100347. DOI: 10.1016 / j.eclinm.2020.100347; PubMed Central PMCID: PMC7256309. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

28.Национальный эпидемиологический центр PyCdE-M. 2019.

29. Snounou G, Viriyakosol S, Zhu XP, Jarra W., Pinheiro L, do Rosario VE и др. Высокая чувствительность обнаружения малярийных паразитов человека с помощью вложенной полимеразной цепной реакции. Молекулярная и биохимическая паразитология. 1993. 61 (2): 315–20. Epub 1993/10/01. DOI: 10.1016 / 0166-6851 (93)

-b. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 30. Луччи Н.В., Карелл М.А., Журнель I, Роже Э., Голдман И., Лйоле Д. и др. Метод ПЭТ-ПЦР для молекулярного обнаружения малярийных паразитов в национальном исследовании по эпиднадзору за малярией в Гаити, 2011 г.Журнал малярии. 2014; 13: 462-. DOI: 10.1186 / 1475-2875-13-13. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

31. Команда RC. R: Язык и среда для статистических вычислений. Вена, Австрия; 2013.

32. Организация WH. Эффективность экспресс-тестов на малярию: результаты тестирования продуктов ВОЗ для БДТ против малярии: 7-й раунд (2016–2017 гг.). 2017.

33. Рабинович Р.Н., Дрейкли С., Джимде А.А., Холл Б.Ф., Хей С.И., Хемингуэй Дж. И др. МАЛЕРА: обновленная программа исследований по элиминации и искоренению малярии.PLoS медицина. 2017; 14 (11): e1002456. DOI: 10.1371 / journal.pmed.1002456; PubMed Central PMCID: PMC5708604. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 34. Росас-Агирре А., Гамбоа Д., Манрике П., Конн Дж. Э., Морено М., Лескано А. Г. и др. Эпидемиология малярии Plasmodium vivax в Перу. Am J Trop Med Hyg. 2016; 95 (6 доп.): 133–44. Epub 2016/11/02. DOI: 10.4269 / ajtmh.16-0268; PubMed Central PMCID: PMC5201219. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 35. Санчес Дж. Ф., Карнеро А. М., Ривера Э., Росалес Л. А., Балдевиано Г. К., Асенсиос Дж. Л. и др.. Нестабильная передача малярии в южной перуанской Амазонии и ее связь с золотодобычей, Мадре-де-Диос, 2001–2012 гг. Am J Trop Med Hyg. 2017; 96 (2): 304–11. DOI: 10.4269 / ajtmh.16-0030; PubMed Central PMCID: PMC5303028. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 36. Балдевиано Г.К., Окот С.А., Арроспид Н., Гонсалес Р.В., Санчес Дж.Ф., Маседо С. и др. Молекулярная эпидемиология вспышки малярии, вызванной Plasmodium falciparum, Тумбес, Перу, 2010–2012 гг. Emerg Infect Dis. 2015; 21 (5): 797–803. DOI: 10.3201 / eid2105.141427; PubMed Central PMCID: PMC4412223. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 37. Дуглас Н.М., Ностен Ф., Эшли Э.А., Фаифун Л., ван Вугт М., Сингхасиванон П. и др. Рецидив Plasmodium vivax после малярии, вызванной falciparum и смешанными видами: факторы риска и влияние антималярийной кинетики. Clin Infect Dis. 2011; 52 (5): 612–20. DOI: 10,1093 / cid / ciq249; PubMed Central PMCID: PMC3060895. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

Автомобиль «Газель»: модификации и характеристики

Автомобиль «Газель», модификации которого имеют несколько вариантов, относится к серии отечественных малотоннажных грузовиков.Основные производственные мощности по выпуску автомобиля расположены на Горьковском автомобильном заводе. Также на постсоветском пространстве есть несколько заводов, собирающих автомобиль из готовых деталей. Впервые модель поступила в серийное производство после июня 1994 года. Машина пользуется популярностью в различных сферах экономики, в том числе в транспортной, аграрной, промышленной сфере. Рассмотрим его особенности, параметры и модели, появившихся при изготовлении нескольких десятков.

Общая информация

Автомобиль «Газель», модификации которого мы рассмотрим далее, в серийном производстве появился как модель ГАЗ-3221. Этот автомобиль имеет колесную базу размером 2,9 метра. В базовую комплектацию автомобиля входят восемь пассажирских мест, не считая места водителя. Отделка салона выполнена из велюра или дерматина.

Осенью 1998 года была выпущена модификация «Соболь». Микроавтобус был оборудован шестью сиденьями и стандартной высотой крыши. Для спецслужб и пассажирских рейсов эксплуатируются варианты с одиннадцатью местами.В 1999 году был представлен восьмиместный «Баргузин». Он получил заниженную крышу, приподнятую заднюю дверь, улучшенный интерьер, сопоставимый со стандартным оснащением минивэна.

Кроме того, модификации автомобиля «Газель» имели следующий вид: «Бизнес», «Next», «Ван», «Фермер» и некоторые другие модели, отличающиеся дорожным просветом, внешним видом, внутренним устройством и некоторыми техническими параметрами.

ГАЗ-3302

Этот автомобиль относится к линейке бортовых вагонов, оснащен шасси с кабиной и грузоподъемностью 1 шт.5 тонн. Машина выпускается с 1994 года, модернизировалась в 2003 и 2010 годах. Последняя модификация в этой серии называлась «Бизнес».

Высота борта грузовика составляет один метр, благодаря использованию шин с низким профилем, что значительно облегчает процесс погрузки и разгрузки. Система тормозных дисков обеспечивает быструю и безопасную остановку автомобиля. В 1995 году под маркой 33-027 появилась небольшая серия полноприводных модификаций, которые можно использовать на всех типах почв.

Отличительной особенностью, которую получили автомобили «Газель» (модификации, выпущенные в 2002 году), была удлиненная рама. Основным предназначением машины считались работы как автомастерские, так и эвакуаторы. Разработчики ради увеличения грузоподъемности впоследствии оснастили грузовик усиленными рессорами и улучшенным задним мостом.

Версии «Фермер» и «Фургон»

Этот автомобиль («Фермер») может перевозить до пяти пассажиров или одну тонну груза. Выпуск линейки начался в 1995 году.Особенности конструкции привели к популярности машины в сфере малого и среднего бизнеса. Микроавтобус «Фермер» получил кузов с двумя дверями, для доступа к заднему ряду нужно откинуть переднее пассажирское сиденье.

Автомобиль «Газель» в модификации «Ван» имеет грузоподъемность 1,35 тонны и два пассажирских места. Данная методика применялась по следующим направлениям:

  • коллекторных броневиков;
  • передвижных лабораторий;
  • аппараты неотложной помощи;
  • спецтехники в структурах МВД.

Именно модель серии ГАЗ-2705 чаще всего выступает в качестве основы для спецтехники различного назначения.

Газель Next: модификации и особенности

Эта новая разработка от специалистов Горьковского автомобильного завода была представлена ​​в 2012 году. По конструкции и «начинке» она оказалась совершенно новой машиной по сравнению со своими предшественниками. От предыдущих аналогов автомобили получили только раму, заднюю балку и коробку передач.

В качестве силовой установки используется бензиновый двигатель УМЗ или дизель типа Cummins Daimler.Эти двигатели и увеличенный радиатор практически исключают возможность перегрева. Любая стандартная комплектация оснащается гидроусилителем руля. Безопасность водителя и пассажиров обеспечивают модернизированные ремни и подушки безопасности (не во всех вариантах).

NEXT авто опции

Рассмотрим основные показатели машины «Next Gazel». Модификации технических и общих характеристик практически не отличаются. К ним относятся:

  • длина / ширина / высота — 5.48 / 2,38 / 2,57 метра;
  • наличие электростеклоподъемников;
  • регулируемая рулевая колонка;
  • центральный замок;
  • Сиденье водителя регулируется в нескольких положениях.

Внешне машина стала больше крутящей. Это связано с увеличением ширины салона на 40 миллиметров при занижении ее более чем на семь сантиметров. Посадка стала более комфортной благодаря увеличению габаритов дверей.

Подробнее о моделях Next

Модификации автомобиля «Газель», фото которых представлены выше, могут иметь несколько комплектаций.Потребителю доступны следующие модели:

  1. Изотермические фургоны.
  2. Автомобили выпускаемые.
  3. Европлатформа.

Все автомобили комплектуются бензиновым или дизельным двигателем, а также стандартной или удлиненной рамой.

Описание

Новая модификация «Газели» ГАЗ-А22 представляет собой коляску с двухрядной кабиной на семь мест. Предусмотрен монтаж стандартной и удлиненной рамы. На выбор предлагался отечественный бензиновый двигатель или дизельный аналог иностранного производства.

В семейство Next также входит модель ГАЗ-А21 с трехместной однорядной кабиной. Также доступны с двумя вариациями рам и типом силовых агрегатов.

Микроавтобус на девятнадцать пассажиров типа A64-R42 производится исключительно с дизельными двигателями Cummins. Кроме того, на базе этой машины создаются самосвалы, эвакуаторы, школьные автобусы, автомобили для пожарной службы.

Модификации двигателя

«Газель» может оснащаться несколькими типами силовых установок. Давайте подробнее рассмотрим дизельный вариант Cummins ISF 2.8. Агрегат соответствует требованиям Евро-4. Рабочий ресурс мотора — около полумиллиона километров. Высокая динамика при максимальных нагрузках обеспечивает оптимальное сочетание максимального крутящего момента и передаточных чисел.

Устройство собрано в Китае, но в основном из американских деталей, что гарантирует его практичность и надежность. Характеристики мотора:

    тип
  • — дизельный четырехцилиндровый двигатель;
  • предел мощности — 120 «лошадей» при 36000 об / мин за 60 секунд;
  • смещение 2.8 литров;
  • компрессия — 16,5;
  • Диаметр цилиндра
  • / ход поршня — 94/100 миллиметров.

Ниже приведены характеристики бензинового аналога, применяемого на «Газели».

УМЗ (EvoTech 2.7)

Параметры агрегата:

Тип
  • — бензиновый четырехтактный двигатель с управляемым впрыском и зажиганием с микропроцессорной системой;
  • мощность и скорость
  • — 106,8 лошадиных сил при четырех тысячах оборотов в минуту;
  • степень сжатия — 10;
  • рабочий объем — 2.7 литров;
  • Размеры цилиндра
  • — диаметр 96,5 мм.

Обновленный агрегат «кушает» десятипроцентный бензин, имеет улучшенный крутящий момент и динамику. Двигатель стал легче, соответствует стандарту «Евро-5», выполнен из современных сплавов. Мотор комплектуется из корейской (LG), немецкой (Bosch) и американской (Eaton) запчастей.

Конструкторы модернизировали основные элементы силовой установки, включая распредвалы, электрооборудование и поршневой узел. База мотора выполнена в характерной четырехцилиндровой конструкции с восемью клапанами.

ГАЗ-32213 и -322132

Модификации автомобилей «Газель» этих серий имеют схожие технические характеристики. Модель 32213, выпускаемая с 2003 года, вмещает тринадцать пассажиров. К особенностям микроавтобуса можно отнести оснащение салона комфортабельными сиденьями с высокой спинкой. Этот автомобиль прошел несколько этапов модернизации.

Вариант 322132 — это маршрутка без боковой двери. Производство автомобилей начато в 1996 году. Автомобиль отличается от других аналогов компоновкой салона и наличием боковых багажников для пассажиров.В 2005 году дизайнеры обновили отопление салона, установили систему ABS и начали оформлять цвет кузова в желтой цветовой гамме.

О модели 3221

Начало этому предшественнику почти всех легковых «Газелей» относится к весне 1996 года. Изначально машина имела скромные характеристики и могла вместить восемь пассажиров.

Модернизация этого автомобиля имеет следующую хронологию:

  1. 1996 г. — есть модификации с полным приводом.
  2. 2003 — спроектирована и установлена ​​обновленная система вентиляции и отопления.
  3. 2005 — установлена ​​опция АБС.
  4. 2008 г. — разработан и введен в эксплуатацию специальный детский микроавтобус, имеющий соответствующие характеристики оборудования и транспортной безопасности.

В настоящее время рассматриваемый вариант выпускается под маркой «Бизнес» и насчитывает более десятка разновидностей.

Остальные базовые модели

На базе «Газели» произведен ряд машин, произведенных в странах СНГ.Среди них:

  1. «Рута» — автомобиль украинского производства (ремонтный завод в Часовом Яре). Он предназначен для местных пассажирских перевозок.
  2. СемАР — машина производства Семеновского авторемонтного завода. В линию вошли развозные фургоны, микроавтобусы, школьные автобусы и спецтехника.
  3. Мытищинский завод производит эвакуаторы, изотермические фургоны, рефрижераторы и другую спецтехнику на базе Газели Next.

Конкурентоспособность

С двухтысячного года легковые «Газели» занимают не менее 50 процентов легкового рынка.Однако в последнее время на смену этой марке приходят современные модели иностранного производства (Ford Transit, Renault Traffic, Mercedes Sprinter и другие).

Среди отечественной марки наиболее востребованной остается «Газель Next». Модификации, фото и характеристики этого автомобиля интересуют многих автолюбителей. Стоит отметить, что рассматриваемые вариации комплектуются не только бензиновыми и дизельными двигателями, но и газовым оборудованием, что делает эксплуатацию машины еще более выгодной.

Заключение

Микроавтобус «Газель» до 2005 года в основном оснащался карбюраторными «двигателями» от ЗМЗ. Их мощность составляла от 90 до 110 лошадиных сил. Кроме того, широко применялись бензиновые двигатели УМЗ и дизельные двигатели Камминз. Автомобиль по праву заслужил почетное место среди отечественных аналогов благодаря широкому модельному ряду, ремонтопригодности, приспособляемости к не очень хорошим дорогам и приемлемой цене.

ГАЗ представил новые модели спецтехники для агропромышленного комплекса

Горьковский автомобильный завод представил новые модели спецтехники, созданной на базе автомобилей нового поколения.Среди представленных новинок два фургона-рефрижератора на шасси ГАЗель Next общей массой 4,6 тонны — новейшей модели ГАЗ, производство которой началось в Нижнем Новгороде в декабре 2017 года. Конструктивные отличия автомобиля — новая задняя часть типа «спайсер», тормозная система с дисковыми тормозами всех колес и АБС, увеличенная ширина бортовой платформы, сообщили в пресс-службе ГАЗа. Изотермический фургон-рефрижератор «ГАЗель Next 4,6» построен на шасси бортового автомобиля.Стены и крыша фургона выполнены из монолитных трехслойных сэндвич-панелей. Панели из ударопрочного пластика обеспечивают высокую прочность кузова и жесткость конструкции. Материал пола — водостойкое покрытие с кварцевой крошкой. Утеплитель — пенополистирол, толщина утеплителя — 80 мм. Стальной подрамник покрыт специальным цинксодержащим составом, повышающим устойчивость к коррозии в 8 раз. Доступ к фургону осуществляется через задние распашные двери с углом открывания 270 °.Фургон предназначен для перевозки продуктов при температуре от -20 ° С до +12 ° С.

Еще один фургон-рефрижератор «ГАЗель Next 4,6» создан на базе цельнометаллического фургона. Внутреннее покрытие — армированное стекловолокно, изоляция — пенополиуретан. Общая толщина стен и пола 80 мм. Утеплитель Premium-kit позволяет поддерживать температуру ниже -20 °. Самосвал с трехсторонней разгрузкой на базе среднетоннажного грузовика «ГАЗон Next» оснащен подъемным механизмом с джойстиковым управлением, бортами из гнутого профиля с повышенной коррозионной стойкостью, дополнительными боковыми надставками, коробкой отбора мощности с пневмоуправлением. и насос, итальянская гидросистема.

Дополнительное удобство для потребителя обеспечивают специальные помощники закрытия бортов, разгрузочный люк для дозированной разгрузки сыпучих материалов и возможность совместного открывания основной и задней сторон. Емкость пищевого бака 4200 литров. Он разделен на две части, материал внутренней обшивки — нержавеющая сталь. Наполнение бака осуществляется верхним способом; сброс самотеком (самотечный поток).

Van isothermique: установка. Изотермический прибор van le faire vous-même

La production de camionnettes de type isométrique est très importante.Ceci s’applique au transport de diverses réfrigérées et périssables. Chaque fourgonnette isothermique est en mesure de garantir de garantir le уважение к нормам и правилам температуры (froides et chaudes) Le principe de fonctionnement d’un tel corps like un thermos конвенциональный, чтобы сохранять определенную температуру. Dans ce cas, la concept de la machine doit respecter toutes les normes en matière d’étanchéité et d’aérodynamique, notamment en ce qui Concerne le transport par réfrigérateur.Par conséquent, même en production, des exigences speculières s’imposent: le coeffect transfert de chaleur, l’isolation thermique и l’étanchéité du corps sont vérifiés dans des Laboratoires spécialisés.

Строительство

Pour la production de telles machines, на utilisait l’acier inoxydable, plaqué et galvanisé, l’aluminium, le plastique renforcé et le contreplaqué stratifié. En tant que chauffante en polyuréthane, vous pouvez utiliser du polystyrène expansé ou du polyamide.La base de la carrosserie est un évateur de châssis rigide, monté sur le châssis des fixations de la voiture le long du châssis. Двойные порты суставов в каучуке для облегчения работы и защиты от жидкости. Les portes s’ouvrent à 270 degrés, les éléments de force spéciaux sous forme de loquet et de пришли к постоянному открытию плюс простому и простому, la porte reçoit une strictité Supplémentaire, le risque de rupture diminue. Il est à noter que la camionnette isotherme «Gazelle» peut produire sur commande, il est très important derespecter toutes les exigences.

Фургонетные модели

Термический материал для изоляции на основе машинного оборудования и установки для уборки в доме и на открытом воздухе. Les transports par leréfrigérateur permettent de congeler les produits pour leur transport, pour cette voiture avec des appareils de refrigération. C’est pourquoi les modèles isothermes sont la meilleure option, ce qui est parfait for résoudre divers problèmes и peut être utilisé dans divers domaines.

Il existe actuellement plusieurs types de fourgonnettes:

  • fourgonnettes et fourgonnettes réfrigérateurs;
  • Fourgonnettes et fourgonnettes isothermes à partir de panneaux sandwich;
  • четырехугольных изотерм на шасси.

Типы

Dans notre pays, la base la plus populaire pour ces fourgonnettes sont les voitures «Gazelle». Aujourd’hui, есть два основных типа строительства: сэндвич панно и кадры.Dans le premier cas, le fourgon isotherme comporte des plaques spéciales multicouches. Tous les panneaux sont collés ensemble sous vide, ce qui confère une thermique élevée et une résistance élevée aux différences de température et aux платные аксессуары. Второй тип — это композиция из троих кушеток из металлической арматуры: дополнительные гальванические изделия, термическая изоляция в окружающей среде и на внешней поверхности. Термическая изоляция высокого качества имеет размер 75 мм.Pour la production de telles machines, les technologies les plus modernes sont utilisées, ce qui leur permet d’assurer la durabilité, la résistance aux environmental agressifs, les phénomènes naturels et la коррозия. C’est ce qui rend ces camionnettes secures et pratiques.

Идейный

Comme déjà Упоминание, dans notre pays, четырехугольная изотерма на базе GAZel есть опция la plus optimale, la plus rentable, la plus populaire et la plus долговечная. Il est non seulement moins cher que ses homologues importés, mais également plus économique, durera plus longtemps, ne nécessite pas de maintenance et est parfait pour un fonctionnement dans le context russe.Ces machines se sentent très bien sur les nationalales и s’acquittent bien des tâches à tout moment de l’année. Новая модель «Газель NEXT» появилась на свет. Ce sont des voitures modernes pour toutes les events, qui ont non seulement réussi à séduire les propriétaires de voitures, mais qui ont également été considérées par de nombreux expert dans ce domaine Com des voitures qui répondent à les contes les contes.

Кэширование

La Principale Exigence dans la production de telles machines est qu’elles soient dotées d’une изоляции de haute qualité (murs, sol, plafond).Comme déjà Упоминание, le polystyrène обыкновенный (polystyrène expansé) есть le plus souvent utilisé com élément chauffant, dont l’épaisseur doit être d’au moins 40 максимум — 100 мм, среднее количество модификаций от 50 до 75 мм. Lors de la Poise d’isolant en «Gazelle», le Fourgon isotherme peut également être traité en coulant de la mousse de polyuréthane recouverte d’angles et de fentes, ce qui permet d’éviter les ponts thermiques et d’obtenir une mousse plastique de la plus haute qualité. Удобные модели с панно-сэндвичем рассматриваются как лучшие варианты установки различного оборудования для охлаждения автомобиля.

Специальная разработка

Изотермический фургон «Gazelle» — est un développement specific des expert à une autre. Ainsi, большая ниша занята в транспорте пищевых продуктов, флёров, медикаментов и т. Д., Кроме того, что четыре импортируемых объекта и ассес coûteux avec congélateurs étaient présentés.Les Concepteurs de ce fourgon ont été en mesure de résoudre de nombreux problèmes, de concrétiser leurs idées et, final, de créer une voiture qui se distingue nettement de ses concurrents par son étanchéité à l’airques, sa décoel intaractis dont les Principaux указывает на основание движения автомобиля по отношению к импортируемым автомобилям и оригинальным деталям.

Il est très difficile de créer un van isotherme de vos propres mains.Par conséquent, si une personne ne possible pas l’expérience Requise, il est préférable de faire appel à de bons spécialistes. Naturellement, vous devez payer pour le travail et les matériaux. Cependant, dans ce cas, vous obtenez non seulement une bonne voiture qui repond à toutes les exigences, mais également une garantie pour tous les travaux effectués. Si vous avez soudainement des problèmes, vous pouvez les résoudre sans frais Supplémentaires et le plus возможна экстренная помощь. Удобный для использования в ремонте изоляторов четырехугольников является предпочтительным для конфиер а де специалистов.

.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован.