Маз 555142 технические характеристики: Ничего не найдено по запросу Tehnika Gruzovie Avto Maz 5551 Harakteristiki Sfera Primeneniya Osnovnyie Parametryi %23Name3

>

МАЗ-555102, 5551А2, 5551А3, 555142, 555145, 555147. Руководство


Общее описание

МАЗ-555102 оснащается цельнометаллическим кузовом с полезным объёмом 12,5 кубометра, он предназначен для перевозки сыпучих грузов нерудного типа. Для разгрузки применяется опрокидывание кузова механизмом гидравлического типа. На поперечинах рамы установлен одиночный цилиндр, связанный шарниром с основанием кузова. Привод гидравлической системы от коробки отбора мощности и насоса. Бак с 25 литрами масла для системы установлен на лонжероне рамы. Разгрузка может осуществлять в три стороны, направление выбирается пневматическим переключателем на пульте управления.

На задней поперечине рамы имеется буксировочный прибор для прицепа-самосвала. Такой вариант автопоезда-самосвала применяется при перевозке сельскохозяйственных грузов.

Базовая комплектация автомобиля может быть расширена за счет дополнительного оборудования. В список опций входят ходоуменьшитель в коробке передач, системы контроля и (или) регистрации расхода топлива. Для повышения характеристик МАЗ-555102 может быть оснащен штатными надставными бортами кузова высотой 300 мм. В таком варианте полезный объем платформы увеличивается на 3 кубометра.

Обзор МАЗ-555102

Двухосный самосвал МАЗ 555102 — одна из самых популярных моделей большегрузных автомобилей.

Техника с ярким характером разработана для перевозки и разгрузки грузов (песок, щебень, глина, известняк, грунт, мусор, снег).

Надежный грузовик Минского автозавода претерпел несколько модификаций. Однако свои лучшие качества не утратил.

Платформа МАЗ 555102 – это своеобразная цельнометаллическая конструкция.

Для удобного подъема кузова предусмотрен гидроцилиндр с несколькими звеньями.

Платформа управляется из кабины МАЗ. Разгрузка трехсторонняя. Объем платформы – 5,4 м куб.

Грузоподъемность самосвала
МАЗ 555102 составляет 10 тонн.

Особенности кабины

Кабина МАЗ имеет малый тип, так как предназначена только для двух человек.

Однако она довольно большая и вместительная. Комплектуется МАЗ 555102 без спальника. Удачно сконструированные ступеньки позволяют быстро забраться в кабину.

Рулевая колонка достаточно большого диаметра. Для удобства регулируется в нескольких плоскостях. Подушка сидения свободно перемещается на салазках.

Кресло также имеет подрессоривание. Каждый водитель сможет подрегулировать сидение под себя. Пассажирское кресло в кабине только одно.

Сидения оснащены ремнями безопасности. Стоит отметить прекрасную обзорность из кабины, которую обеспечивает гнутое панорамное лобовое стекло. Хорошая шумоизоляция. В наличии также АБС.

Рабочие условия водителя на довольно высоком уровне.

Передняя приборная панель компактная и довольно информативная. Блок предохранителей и реле находится в удобном месте под легко открывающейся крышкой.

На крыше кабины МАЗ 555102 предусмотрен вентиляционный люк. Освещение внутри отличное. Система отопления прекрасно справляется со своими функциями, даже если снаружи далеко за -20 градусов.

Для комфортного и безопасного управления наружные зеркала с подогревом.

Для подъема кабина применяется гидропривод. Полностью исключена вероятность откидывания при возможной поломке замка. Кабина поднимается только если предварительно открыть решетку радиатора.

Технические характеристики МАЗ 555102

Полная масса самосвала составляет 16 000 кг. Нагрузка распределяется на переднюю (6000 кг) и заднюю (10000 кг) оси. Сзади установлен солидный отбойник.

МАЗ 555102 – типичный представитель самосвалов колесного типа с формулой 4х2. Маркировка шин — 12,00R2. Запасное колесо установлено на лебедке. Грузовик характеризуются повышенной проходимостью.

МАЗ 555102 имеет следующие габариты:

  • Длина – 5990 мм;
  • Ширина – 2500;
  • Высота – 2925 мм;
  • Колесная база – 3300 мм.

Силовой агрегат оборудован надежной механической коробкой передач ЯМЗ-236П. Трансмиссия пятиступенчатая. На рычаге хорошая избирательность. Передачи переключаются плавно. Расход топлива завит от условий эксплуатации. В среднем составляет 23,8 литров на 100 км пробега.

В баке помещается до 200 л горючего.

Тормозная система МАЗ 555102 работает отлично. У самосвала превосходная маневренность.

Гидроусилитель руля бесперебойно работает. Грузовик без проблем развернется даже на узком участке дороги и в ограниченном пространстве.

За задним мостом самосвала установлен стабилизатор поперечной устойчивости.

Такая конструкция повышает безопасность при управлении МАЗ 555102 в груженом состоянии на поворотах. Диаметр разворота составляет 8,6 м.

МАЗ с полной нагрузкой разгоняется до 90 км/ч. Максимальный преодолеваемый подъем достигает 33%. Передняя и задняя подвески рессорные. Грузовик демонстрирует отличную динамику во время движения. Разгоняется довольно быстро даже в груженом состоянии.

Особенности двигателя МАЗ

Самосвал укомплектован дизельным мотором ЯМЗ-236НЕ2 без системы турбонаддува. Четырехтактный двигатель с воспламенение от сжатия с непосредственным впрыском топлива. Охлаждение жидкостное.

Двигатель МАЗ-555102 соответствует новым экологическим нормам Евро 0.

Имеет большую мощность – целых 230 лошадиных сил. Объем V-образного двигателя на шесть цилиндров шесть составляет 11 150 см куб.

Максимальный крутящий момент — 882 (90) Нм (кгс).

Установлена коробка отбора мощности. Это позволяет перераспределять мощность мотора во время движения платформы.

МАЗ 555102 – одна из самых экономичных моделей самосвалов ОАО «Минский автомобильный завод».

Предназначен для интенсивной эксплуатации в различных климатических зонах на дорогах с любым покрытием.

Грузовик адаптирован к сложным условиям работы.

Широко применяется в различных сферах (сельское хозяйство, промышленность, строительство).

Ломается крайне редко. Однако если Вам необходимо срочно купить запчасти МАЗ – изучите наш каталог. Здесь вы найдете детали для большегрузных автомобилей по самым выгодным ценам.

Ходовая часть

Подвески автомобиля на продольных рессорах полуэллиптической формы. В конструкции передней подвески дополнительно применены амортизаторы. В задней подвеске используются двойные рессоры и стабилизатор поперечной устойчивости.

Тормозная система барабанного типа с пневматическим приводом. Для повышения надежности и безопасности тормоза передней и задней оси имеют раздельный привод. Дополнительно устанавливается моторный тормоз компрессионного типа, работающий от поворотных заслонок в выхлопной системе двигателя. Рядом с буксирным прибором имеется разъём для подключения пневматической системы. По заказу устанавливается антиблокировочная система и ограничитель скорости.

Двигатель и трансмиссия

Самосвал оснащается дизельным мотором модели ЯМЗ-236НЕ2 с мощностью 169 кВт. С двигателем стыкуется пятискоростная коробка ЯМЗ-236П или восьмискоростная коробка скоростей модели 2361 (по отдельному заказу). Такой силовой агрегат обеспечивает приемлемые технические характеристики МАЗ-555102 – машина развивает скорость до 85 км/час при эксплуатационном расходе топлива в пределах 26 литров на 100 км (при скорости около 60 км/час).

По желанию покупателя на самосвал устанавливается автономный подогреватель ПЖД-30. Применение такого устройства обеспечивает беспроблемный запуск двигателя при низких температурах (ниже минус 20 градусов). Принцип действия основан на прогреве охлаждающей жидкости и масла в специальном котле, обогреваемом пламенем горелки обогревателя. Для циркуляции охлаждающей жидкости на мотор устанавливается дополнительный насос. Для установки подогревателя предусмотрено штатное место между нижней частью радиатора и поддоном двигателя.

Для передачи крутящего момента используется карданный вал с промежуточной опорой. Задний мост имеет двойную передачу – главный редуктор и планетарные редукторы в ступицах колес.

МАЗ 551603 221 — самосвал (технические характеристики)

содержание .. 21 22

Автомобили МАЗ (технические характеристики) — часть 4

Марка: МАЗ

Модель (серия): 551603

Модификация: 221

Технические характеристики самосвалов МАЗ 551603 221

Основные характеристики

Колёсная формула / кол-во осей6х4
Характеристики грузоподъёмности и массы
Грузоподъёмность20000*
Полная масса автомобиля33000*
Распределение полной массы на переднюю ось7000*
Распределение полной массы на заднюю ось26000*
Масса снаряженного автомобиля12700
Двигатель
Модель двигателяЯМЗ-236БЕ2(EURO-2)
Тип двигателядизель,турбо
Рабочий объём двигателя (силового агрегата)11150
Мощность двигателя (силового агрегата)184(250)
Максимальный крутящий момент, Нм(кгсм)1078
Число и расположение цилиндров6,V-образное
Коробка передач
Модель коробки передачЯМЗ-238М
Тип коробки передачмеханическая
Число передач КП8
Диапазон коробки передач7,3-0,71
Передаточное число7,14
Топливная система
Топливный бак350
Контрольный расход топлива32
Максимальная скорость81
Подвеска
Подвеска передняярессорная
Подвеска задняярессорно-балансирная
Колёса
Размер колес8,5-20
Способ крепленияклиновый(шпилечный)**
Шины12. 00R20
Тип колесбез(дисковые)**
Характеристики самосвала
Платформасамосввальн с зад.загр
Площадь платформы10,1
Высота платформы1085
Ширина платформы2280
Длина платформы4440
Объем платформы10,5

Марка: МАЗ

Модель (серия): 551603

Модификация: 2123

Технические характеристики самосвалов МАЗ 551603 2123
Основные характеристики
Колёсная формула / кол-во осей6х4
Характеристики грузоподъёмности и массы
Грузоподъёмность20000*
Полная масса автомобиля33000*
Распределение полной массы на переднюю ось7000*
Распределение полной массы на заднюю ось26000*
Масса снаряженного автомобиля12700
Двигатель
Модель двигателяЯМЗ-236БЕ(EURO-1)
Тип двигателядизель,турбо
Рабочий объём двигателя (силового агрегата)11150
Мощность двигателя (силового агрегата)184(250)
Максимальный крутящий момент, Нм(кгсм)1030
Число и расположение цилиндров6,V-образное
Коробка передач
Модель коробки передачЯМЗ-238М
Тип коробки передачмеханическая
Число передач КП8
Диапазон коробки передач7,3-0,71
Передаточное число7,14
Топливная система
Топливный бак350
Контрольный расход топлива32
Максимальная скорость81
Подвеска
Подвеска передняярессорная
Подвеска задняярессорно-балансирная
Колёса
Размер колес8,5-20
Способ крепленияклиновый(шпилечный)**
Шины12. 00R20
Тип колесбез(дисковые)**
Характеристики самосвала
Платформасамосвальн ковш.тип без задн.борта
Площадь платформы11,2
Высота платформы1085
Ширина платформы2280
Длина платформы4920max
Объем платформы10,5

Марка: МАЗ

Модель (серия): 555102

Модификация: 220

Технические характеристики самосвалов МАЗ 555102 220
Основные характеристики
Колёсная формула / кол-во осей4х2
Характеристики грузоподъёмности и массы
Грузоподъёмность10000*
Полная масса автомобиля18000*
Распределение полной массы на переднюю ось6500*
Распределение полной массы на заднюю ось11500*
Масса снаряженного автомобиля8000
Двигатель
Модель двигателяЯМЗ-236НЕ2(EURO-2)
Тип двигателядизель,турбо
Рабочий объём двигателя (силового агрегата)11150
Мощность двигателя (силового агрегата)169(230)
Максимальный крутящий момент, Нм(кгсм)882
Число и расположение цилиндров6,V-образное
Коробка передач
Модель коробки передачЯМЗ-236П
Тип коробки передачмеханическая
Число передач КП5
Диапазон коробки передач5,26-0,66
Передаточное число7,14
Топливная система
Топливный бак200
Контрольный расход топлива22
Максимальная скорость91
Подвеска
Подвеска передняярессорная
Подвеска задняярессорная
Колёса
Размер колес8,5-20
Способ крепленияклиновый(шпилечный)**
Шины12. 00R20
Тип колесбез(дисковые)**
Характеристики самосвала
Платформасамосввальн с зад.загр
Площадь платформы8,6
Высота платформы630
Ширина платформы2268
Длина платформы3800
Объем платформы5,4

содержание .. 21 22

МАЗ 5551 – История, модификации, полный обзор самосвала МАЗ-5551

Эта самая массовая модель маневренных самосвалов усердно трудится на всех строительных площадках страны. Самосвал МАЗ- 5551 рассчитан для «короткого плеча». Он незаменим в городском строительстве.

Общий look МАЗ 5551

На фото, представленных здесь, продемонстрирована версия грузовика, получившая кардинально измененную кабину. Ее абрисы утратили былую округлость, уступив место четким граням. Прежнее раздвоенное лобовое стекло грузовика уступило место большому гнутому панорамному триплексу. Крыша кабины украсилась новым спойлером, уменьшающим расход топлива. Креативным изменениям подвергся дизайн фар.

На протяжении многих лет технические характеристики автомобилей непрерывно дорабатывалась. Фото свидетельствуют: постепенно с конвейера исчезла капотная компоновка с двухтактными агрегатами, а ее место на конвейере заняла собственный проект МАЗ-500.

С того времени из ворот предприятия выкатилось множество модификаций данного прототипа. На видео выделяется самосвал МАЗ-503, предшественник модели МАЗ-5537. Проект лег в основу модификации МАЗ-5551.

Модельная линия

Разработка оказалась настолько удачной, что на ее основе были создан целый ряд модификаций:

  • Маз 5550. Представляет собой очередную версию этих маневренных грузовиков. Маз 5550 снабжен двигателем (435л.с.), который работает в тандеме с 6-ти ступенчатой коробкой скоростей. В качестве горючего Маз 5550 потребляет топливо, соответствующее экологическому стандарту Евро-4;
  • Маз 555102. На грузовике установлен двигатель мощностью в 230 «лошадей». Благодаря более внушительному агрегату, маз 555102 имеет хорошую разгонную скорость.

Говоря о технических тонкостях, следует отметить, что увеличение мощности мотора, установленного на маз 555102, стало возможным с применением турбонаддува. Осуществляется промежуточное охлаждение воздуха.

Преимущества маз 555102 хорошо проявляют себя в режиме городского движения. Даже при неблагоприятных температурных условиях маз 555102 уверенно передвигается по улицам на больших скоростях. К тому же, маз 555102 расходует топлива меньше;

  • Маз 555142. Данная модификация отличается от прототипа тем, что маз 555142 работает в тандеме с прицепом. Грузоподъемность такого автопоезда существенно выше;
  • Маз 5551а2. Автопоезд позиционирован как зерновоз. Маз 5551а2 способен разгружаться налево, направо и назад. Иными словами, маз 5551а2 состоит из основного самосвала и дополнительного прицепа. Обе грузовых емкости снабжены более высокими бортами. Комплектация маз 5551а2 дополнена тентом и задним съемным пологом;
  • Маз 5550в2. Самосвал способен перевозить сыпучие грузы, масса которых не превышает 10 тонн. Маз 5550в2 привлекает компактными габаритами и отличной маневренностью. Он хорошо работает на ограниченных территориях, экономным топливным расходом. Укрепленная подвеска адаптирована к бездорожью.

Об интерьере, экстерьере и эргономике МАЗ 5551

Описание кабины минского «долгожителя» следует начать с того, что она существенно просторнее КамАЗовского салона. Увеличению комфортности способствует выигрышное местонахождение ступенек и поручней. Благодаря этому, водителю легко забирается на водительское место.

Невзирая на то, что рулевые колонки обладают двухплоскостной регулировкой, а водительское кресло передвигается по салазкам, шофер пребывает в неудобном положении. И хотя обзор остается хорошим, налицо повышенная утомляемость водителя, что особенно опасно в условиях дальних маршрутов.

Из фото видно, что габариты рулевого колеса излишне велики. Для того, чтобы совершить поворот, водитель с маленьким ростом вынужден совершать регулярные наклоны вперед.

Самосвал оснащен удобной и достаточно информативной приборной панелью. Однако, здесь есть свое «но»: световая индикация недостаточно яркая, посему в дневные часы приборы просматриваются плохо.

И все же, удачных конструктивных решений в кабине самосвала МАЗ-5551 значительно больше, нежели промахов (о чем свидетельствуют позитивные отзывы). Удачной является компоновка блока, в котором размещены предохранители и реле. Располагается он позади приборной панели, ближе к пассажирскому креслу. Поверх него вмонтирован легко открывающийся лючок.

Изменилась и конструкция стояночного тормоза. Если раньше данные грузовики снабжались барабанными ручниками, то в нынешней компоновке МАЗ-5551 (а, также, маз-555102) присутствуют тормозные камеры и пружинные аккумуляторы.

Уровень комфортности внутреннего пространства кабины обеспечивается множеством дополнительных опций, представленных на видео:

  • вентиляционным люком не крыше;
  • осветительным плафоном салона;
  • эффективной отопительной системой.

МАЗовская кабина снабжена единственным пассажирским креслом. Пространство между ним и водительским местом заполнено полкой, в которой можно хранить документы, бутылки и другую мелочь. Внушительные блоки наружных зеркал заднего вида обеспечивают прекрасную видимость.

Помимо регулировочных систем, кресло водителя имеет подрессоривающие узлы. Настоящего комфорта кабине МАЗа не достает, ибо крепится она к раме напрямую, без амортизаторов. О пассажирском сидении вообще говорить не приходится: в нем нет регулировок, оно жестко вмонтировано в пол салона.

На видео показан гидропривод, который поднимает кабину, открывая для обозрения силовой агрегат. Такой узел более надежен, в сравнении с пружинной системой, способной при поломке замка откидываться в самый неподходящий момент. Чтобы теперь поднять кабину, необходимо открыть радиаторную решетку и добраться до «монтажки», которая приводит механизм в действие.

Техническая часть: ходовые свойства самосвала МАЗ 5551

Для определения технических качеств самосвала МАЗ-5551 был совершен пробег протяженностью порядка 900 километров. По результатам тестирования возникли некоторые замечания.

Коробка скоростей, установленная на грузовике, обладает неплохой избирательностью, однако переключение ступеней происходит с заметным усилием. Для осуществления перехода передач «вниз» или «вверх» применяется двойной выжим сцепления (вкупе с перегазовкой). Весь цикл осуществляется точно и мягко.

Будучи полностью загруженным (10 тонн), самосвал МАЗ-5551 очень трудно трогается с места на первой передаче. Эта скорость довольно коротка, а разгонная динамика чрезвычайно мала.

Если же грузовик находится на ровной трассе, то даже полная масса самосвала в 17 тонн не мешает ему спокойно начинать движение даже со второй передачи.

При полной нагрузке грузовик развивает крейсерскую скорость порядка 90 км/час. Однако, даже пятая передача удерживает скорость грузовика в пределах 40 км/час. При этом, расход топлива не превышает указанных в руководстве пределов. Руль машины оснащен бесперебойным гидроусилителем, благодаря чему автомобиль передвигается довольно юрко.

Модель восхищает отличной маневренностью. Фото доказывают: самосвал способен совершить полный разворот даже на самых узких дорогах. Позади заднего моста установлен стабилизатор, обеспечивающий поперечную устойчивость. Благодаря этому, тяжелогруженая машина уверенно преодолевает повороты.

На грузовике функционируют блоки пневматических тормозов. Эффективная система обладает единственным недостатком: уж слишком долго закачивается воздух. Это объясняется недостаточно мощным компрессором.

Подобные недостатки вполне объяснимы для недорогих моделей. Ибо стоимость самосвала МАЗ-5551(как и маз-555102) значительно меньше цен, по которым реализуются аналогичные иномарки, на борту которых имеются всевозможные дополнительные узлы и опции (да и запчасти отыскать легче).

Резюмируя все сказанное, можно отметить следующее. Самосвал Маз 5551 стал на конвейер более четверти столетия тому назад. Канула в Лету страна, в которой начинался выпуск этих машин. Несмотря на это, проект выжил в непростые времена и благополучно дожил до наших дней (даже подержанные экземпляры работают достойно). Тому способствовал гибкий менеджмент и эффективная работа коллектива Минского автомобильного завода, детищем которого является МАЗ-5551.

Наша компания предлагает Вам услуги аренды самосвалов с водителями в Краснодаре и Краснодарском крае, Ростове и Республике Крым по низким ценам и с гарантией.
Звоните сейчас и получите скидку +7 (988) 318-84-49.

 

Мод на грузовик МАЗ-5551 для игры Фарминг Симулятор 2017

Грузовой автомобиль МАЗ-5551 быстро разрулит обстановку в FS 2017 и отвезет пшеницу на продажу. Другие культуры тоже приветствуются.

По сравнению с остальными машинами Минского автозавода, модель МАЗ-5551 относительно свежая. Выпускается с 1985 года по настоящее время. В новой кабине изменили форму фар, поставили другое лобовое стекло, спойлер на крышу. Внутренние изменения коснулись рычагов управления, руля и общего дизайна. Тип кузова – самосвал, разгрузка быстрая.

А теперь о технической начинке – она не менее интересна:

  • Скорость, как в реальной жизни. Вы сможете развить 86 км/час.
  • Два варианта двигателей на выбор.
  • Приличная грузоподъемность 11 000 литров. Есть дополнительный тент, чтобы ничего не потерять по дороге.
  • Панель приборов подсвечивается. Остальная светотехника тоже работает, как положено.
  • В процессе езды оставляет следы колес. Резина деформируется.
  • Может пачкаться.

Массово-габаритные и технические характеристики мода МАЗ-5551 делают его достойным приобретением для фермы.

Авторы: Dmitry95Мод для: Farming Simulator 2017Проверка мода: Проверен Опубликовано: 05. 09.2019 Загрузка…

9239

4

FS 2017

– Скачайте мод, и скопируйте его в папку Документы\MyGames\FarmingSimulator2017\mods\ Извлекать папку из архива не нужно. Выделите мод при запуске игры, и купите его в магазине, в соответствующей категории.

FS 2015

– скачанный с сайта архив с модом нужно скопировать в папку Мои Документы\MyGames\FarmingSimulator2015\mods\ Извлекать папку из архива не нужно.

– Если мод в .rar формате, то его нужно распаковать.

– если мод формата .exe, то просто запустите установку, и следуйте инструкциями.


FS 2013

– если мод в .zip, или .rar архиве, то извлеките его из архива и скопируйте в папку Мои Документы\MyGames\FarmingSimulator2013\mods\

Подробная инструкция с картинками по установке мода

Похожие моды из категории «Грузовики»

Гранта спорт лошадиные силы.

Lada Granta Sport — улучшенный спортивный седан

Во времена СССР планируемая к выпуску техника проектировалась с запасом мощности на будущее, поэтому некоторые модели по сей день применяются, и выпускаются на современных заводах в своем начальном состоянии или с минимальными модификациями согласно современным требованиям. К таким моделям относится и самосвал МАЗ-5551 .

Основным рабочим узлом, приводящим в действие все остальные, является 6- цилиндровый мотор. Он имеет V-образную схему расположения цилиндров. Марка этого двигателя ЯМЗ-236М2. Его мощность составляет 180 л.с.

Трансмиссия основана на 5-ступенчатой коробке передач, которая на максимуме выдает на более 83 км/ч. Управление ею несколько усложнено, и для этого требуется определенный опыт. Тип привода – 4×2. Ему соответствует ведущая передняя ось.

Главная передача имеет планетарные редукторы в ступицах. На колеса устанавливаются шины моделей 12,00R20 (320R508) а также 11,00R20 (300R508) в зависимости от модификации модели.

Тип установленного кузова – самосвал. Он — цельнометаллический, имеет самостоятельно открывающийся/закрывающийся борт. Его обогрев производится весьма экономично – при помощи отработанных газов двигателя. Грузоподъемность этой модели ограничивается 10 тоннами. Гидроцилиндр телескопической формы трехступенчатого типа.

Тормозная система построена по пневматическому типу конструкции, что делает ее весь эффективной.

Кабина двухместная. При необходимости она может откидываться вперед. Кабина по сравнению с предшественником (МАЗ-5337) получила массу доработок, как с технической стороны вопроса, так и с дизайнерской. Она стала более комфортной, обзавелась панорамным лобовым стеклом, получила новый руль и укороченные рычаги управления. У руля имеется гидроусилитель.

Электросистема модели не выделяется большим набором компонентов и включает лишь датчики в кабине, печку и осветительные приборы. При необходимости в нее добавляют кондиционер, который в базовой комплектации не предусмотрен.
Существует несколько вариантов доработанных версий самосвала. Часть из них предназначена для работы в суровых условиях северных регионов.

Как и большинство техники, предназначенной для перевозки крупных и тяжелых грузов на дальние расстояния, самосвал МАЗ-5551 расходует значительное количество топлива – 22 литра на 100 000 м. Важно, что объем топливного бака у этой модели самосвала составляет 200 литров.

1. Б – бензин.

3. СУГ – сжиженный углеводородный газ.

5. m сн – снаряженная масса автомобиля.

6. q – грузоподъемность.

7. AWD, 4Motion, 4Matic, 4WD, Quattro, Syncro, 4×4 – привод на все колеса.

8. V k – объем кузова.

10. АКПП – автоматическая коробка перемены передач.

11. Для двухтактных двигателей в качестве топлива используется смесь бензина с маслом в пропорции, рекомендуемой заводом-изготовителем.

Многие помнят, что в советское время практически ни одна стройка не проводилась без участия МАЗ-5551. Кроме строительной сферы данная модель часто применялась в различных отраслях деятельности, к которым можно отнести городское и сельское хозяйства, постройка и ремонт автомобильных дорог, промышленное использование. В основном на нем перевозят различные сыпучие материалы. Не смотря на появление многочисленных новинок в грузовом автопроме, вытеснить этого работягу с рынка так и не удалось. Это связано с постоянным модернизированием и внедрением современных технологий в производство, которое до сих пор выпускает эту модель.

Выпуск МАЗ-5551 начался с 1985 года и уже длится более 30 лет. Его конструкция старого образца, а в частности передняя часть, не помешали оставаться одним из самых востребованных грузовиков на отечественных рынках. Этот агрегат относится к грузовому классу восьмитонников.

Среди всех моделей автомобилей, которые выпускает Минский автомобильный завод, МАЗ-5551 является наиболее старой моделью. Прототипом для ее создания послужил МАЗ-5337. За все время производства, для рассматриваемого МАЗа, так и не нашлось достойных конкурентов. Из немногих можно выделить некоторые модели КамАЗ и ЗИЛ, но они-то ведь имеют колесную базу 6×4, что обуславливает перевоз грузов на «длинном плече». Колесная база нашего спринтера, который рассчитан работать на малых расстояниях, составляет 4×2, что исторически обусловило его применение на строительных площадках городского значения.

В начале серийного производства внешнему виду автомобиля не придавали особого значения, и он был достаточно скудным. В частности кабина машины не имела капота. Спереди был установлен крепкий бампер больших размеров, огромные фары и средненькая решетка для радиатора. Главный элемент машины — кузов. Здесь он поднимался и откидывался назад и имел один открывающийся борт.

В 1998 году был проведен рестайлинг данной модели. На автомобиль установили кабину более современного образца, ее вместимость стала больше. Теперь кабину можно было откидывать вперед для технического осмотра и ремонта, находящихся под ней узлов агрегата. Бортовая панель получила более удобный дизайн с большей функциональностью. Кресло для водителя установлено рессорного типа, с возможностью двигаться в перед и назад. Зеркала имеют систему электроподогрева.

После рестайлинга старый бампер заменили на более обтекаемый. На него помимо фар, которые были немного модифицированы, устанавливались указатели поворотов. Была пересмотрена радиаторная решетка и ее размер стал больше, что увеличивает охлаждение двигателя в жаркий период. Лобовое стекло у старых моделей было раздельное, после модификации оно стало панорамным, обладающим широким обзором. На крыше автомобиля появился спойлер.

Конструкция МАЗ-5551 выполнена качественно, но не совсем удобна для эксплуатации. Как свидетельство этому жесткое крепление кабины к раме без использования пружинного смягчителя. К этому можно добавить рулевое колесо и его колонку. Для управления автомобилем требуется прилагать немалые усилия. Кузов выполнен цельнометаллическим и, как указывалось выше, имеет заднюю разгрузку. Для комфортного пребывания в кабине в зимний период под днищем расположена система подогрева, работающая на переработанных выхлопах. При движении в груженом состоянии не возникает сложности выполнять повороты, чему способствует установленный за задним мостом стабилизатор.

Габариты грузовика составляют: длина — 5,99 м, ширина — 2,5 м и высота — 2,3 м. Тормозная система довольно надежная и выполнена просто, но недостатком является ее длительное закачивание. Основой системы торможения передних и задних колес являются барабаны на пневматическом управлении. Передняя и задняя подвески выполнены в виде рессоров. На базовую версию автомобиля устанавливается трансмиссия в виде пятиступенчатой механической коробки передач ЯМЗ-236П. С модернизацией модели и увеличением грузоподъемности до 10 тонн, стали устанавливать коробку ЯМЗ-2361. В настоящее время МАЗ-5551 более совершенный и современный грузовик, на котором часто устанавливается трансмиссия западного производства.

На МАЗ-5551 устанавливался дизельный двигатель V-6 ЯМЗ-236М2, изготавливаемый на моторном заводе в Ярославле. Позже, в процессе модернизации он был заменен на современный двигатель ЯМЗ-6563.10. Такой мотор отвечает европейским требованием экологичности и соответствует классу «Евро-3». Данный агрегат потребляет топлива около 25 литров на 100 км, если двигаться при средней скорости 60 км/ч. Мощность мотора составляет 180 л.с. Топливный бак рассчитан на 200 литров.
Вложиться в данную модель самосвала, будет лучшим решением для его дальнейшего использования в строительстве, разнообразном хозяйстве и т.д. При транспортировке различных сыпучих материалов не возникнет непредвиденных проблем в дороге и расход топлива не ударит по кошельку.

Марка, модель автомобиля

Линейная норма,

л/100 км, м 3 /100 км

CAMC HN 3250 (дв. Cummins ISLe340.30, 250 kW, i г. п.=5,73)

DAF FAT CF 85.430 (316 kW)

Daimler Benz 809K 4,0D

IFA мультикар 25

Iveco Ling Ye (дв. WP10. 336, 247 kW, i г. п.=5,73)

Magirus 232D 19K

Magirus 290D 26K

MAN 26.430 TGA8 (316 kW)

MAN 35.414 (дв. D2866)

MAN TGA 33.350 (257 kW) 6×4

Mercedes Benz 2628 AK-38 (дв. OM-422, 206 kW) 6×6

Mercedes Benz 407D 2,4TD (53 kW)

Mercedes Benz 410D 2,9D (70 kW)

Mercedes Benz 608D

Mercedes Benz ACTROS 4140 (290 kW)

Mudan MD 1042 3,0TDi (дв. Iveco Sofim 8140.43S, 92 kW)

Renault Maxter 340ti (250 kW)

Tatra 138 S1, -138 S3

Tatra 148 S1, -148 S3

Tatra 815 (221 kW)

Tatra 815-2 (210 kW)

Tatra 815-21A (230 kW)

Volvo F12 (235 kW)

Volvo FM (294 kW)

БелАЗ-540, -540А, -7510, -7526

БелАЗ-540Д (дв. ВГ8М-1015)

БелАЗ-548Л, -7523, -7527, -7548

БелАЗ-549, -7509

БелАЗ-75401

БелАЗ-75405 (дв. ЯМЗ-240)

БелАЗ-7540А (дв. ЯМЗ-240ПМ2, 309 kW, 5 АКПП)

БелАЗ-7540В (дв. ЯМЗ-240М2)

БелАЗ-7540С (дв. Д-280, 5АКПП)

БелАЗ-7540С (дв. ТМЗ-8437.10 195М)

БелАЗ-7545 (дв. ЯМЗ-Э8451.10)

БелАЗ-7546 (дв. ЯМЗ-240)

БелАЗ-7547 (дв. ЯМЗ-240НМ2)

БелАЗ-75471 (дв. ЯМЗ-8401.10-06)

БелАЗ-75473 (дв. Cummins KTA19-C)

БелАЗ-75481 (дв. ЯМЗ-8401.10.06)

БелАЗ-7548А (дв. ЯМЗ-240НМ2)

БелАЗ-7555В (дв. Cummins KTTA-19C)

ГАЗ-3307 (дв. Д-245.12С)

ГАЗ-3309 (дв. Д-245.7Е3)

ГАЗ-3507 (дв. ЗМЗ-53)

ГАЗ-52 (СТБ-5204, дв. ЗМЗ-53)

ГАЗ-53 (дв. ЗМЗ-53)

ГАЗ-5307 (дв. ЗМЗ-53)

ГАЗ-53Б (дв. ЗМЗ-53)

ГАЗ-6601 (дв. ЗМЗ-66)

ГАЗ-САЗ-2504 (дв. Д-245.7)

ГАЗ-САЗ-3501-66 (дв. ЗМЗ-513)

ГАЗ-САЗ-3503, -3504 (дв. ЗМЗ-53)

ГАЗ-САЗ-3507 (дв. Д-240)

ГАЗ-САЗ-3507 (дв. Д-245.1)

ГАЗ-САЗ-3507 (дв. ЗМЗ-53)

ГАЗ-САЗ-3507, -3507-01 (дв. ЗМЗ-5110ОА)

ГАЗ-САЗ-350701 (дв. ЗМЗ-513, -5130OH)

ГАЗ-САЗ-35071 (дв. Д-245.7)

ГАЗ-САЗ-35071 (дв. Д-245.7Е3)

ГАЗ-САЗ-3508, -35101, -3509 (дв. ЗМЗ-53)

ГАЗ-САЗ-3509

ГАЗ-САЗ-3511 (шасси ГАЗ-66, дв. ЗМЗ-53)

ГАЗ-САЗ-3705-22 (дв. ЗМЗ-53)

ГАЗ-САЗ-4301 (дв. Д-542)

ГАЗ-САЗ-4509 (дв. 6RD)

ГАЗ-САЗ-4509 (дв. Д-245.1-538)

ГАЗ-САЗ-4509 (дв. ЗМЗ-511.10)

ЗИЛ-130 (дв. ЗИЛ-130)

ЗИЛ-130 (дв. ЗИЛ-508)

ЗИЛ-130 (дв. ЗИЛ-508.10)

ЗИЛ-131 (дв. Д-240)

ЗИЛ-131 (дв. Д-245.12С)

ЗИЛ-131 (дв. ЗИЛ-508) кузов ММЗ-554

ЗИЛ-131Д (дв. СМД-19)

ЗИЛ-2502 (шасси ЗИЛ-5301 БО)

ЗиЛ-431412 (дв. ЗиЛ-508)

ЗИЛ-45063 (дв. Д-245)

ЗИЛ-45063Г (дв. ЗИЛ-130)

ЗИЛ-45065 (дв. ЗИЛ-508.10)

ЗИЛ-4508 (дв. ЗИЛ-645)

ЗИЛ-45085 (дв. ЗИЛ-375)

ЗИЛ-45085 (дв. ЗИЛ-508.10)

ЗИЛ-4514 (дв. КамАЗ-740.10)

ЗИЛ-494560 (дв. ЗИЛ-508)

ЗИЛ-495710 (дв. Д-245)

ЗИЛ-495810 (дв. ЗИЛ-508.10)

ЗИЛ-ММЗ 4501 (дв. ЗИЛ-508)

ЗИЛ-ММЗ 4502 (дв. Д-243)

ЗИЛ-ММЗ 4502 (дв. Д-245)

ЗИЛ-ММЗ 4502 (дв. ЗИЛ-375)

ЗИЛ-ММЗ 45021 (дв. Д-243)

ЗИЛ-ММЗ 45021 (дв. ЗИЛ-508)

ЗИЛ-ММЗ 45023 (дв. Д-245)

ЗИЛ-ММЗ 4505 (дв. ЗИЛ-508.10)

ЗИЛ-ММЗ 4505, -45023 (дв. ЗИЛ-509)

ЗИЛ-ММЗ 4508 (дв. ЗИЛ-508.10)

ЗИЛ-ММЗ-4502 (дв. Д-240)

ЗИЛ-ММЗ-4502 (дв. Д-245.12С-231Д)

ЗИЛ-ММЗ-4502 (дв. ЗИЛ-508, -508.10)

ЗИЛ-ММЗ-45021 (дв. ЗИЛ-375)

ЗИЛ-ММЗ-45023 (дв. ЗИЛ-130)

ЗИЛ-ММЗ-45023 (дв. ЗИЛ-508)

ЗИЛ-ММЗ-45027 (дв. ЗИЛ-508)

ЗИЛ-ММЗ-45085 (дв. ЗИЛ-509)

ЗИЛ-ММЗ-450850 (дв. Д-245.9Е, Д-245.9Е2)

ЗИЛ-ММЗ-554 (дв. ЗИЛ-508)

ЗИЛ-ММЗ-554, -55413, -554М, -554В, -555, -555А, -555Г, -555ГА, -555К, -555М, -555Н, -555Э, -555-76, -550-80, -45054, -4502, -45022, -45021 (дв. ЗИЛ-130, -508)

ЗИЛ-ММЗ-554М (дв. Д-243)

ЗИЛ-ММЗ-555 (дв. Д-243, -243-202)

ЗИЛ-ММЗ-555 (дв. ЗИЛ-508)

ЗИЛ-СААЗ-4545 (дв. ЗИЛ-508.10)

ЗИЛ-СААЗ-454510 (дв. Д-245.9Е2)

ЗИЛ-СААЗ-454510 (дв. ЗИЛ-508300)

ЗИЛ-СААЗ-454610 (дв. Д-245.9Е2)

КАЗ-4540 (дв. Д-245)

КАЗ-600, -600АВ, -600Б, -600В (дв. ЗИЛ-130)

КамАЗ-4310 (дв. КамАЗ-740.10)

КамАЗ-45143 (дв. КамАЗ-740.13-260)

КамАЗ-5320 (дв. КамАЗ-740)

КамАЗ-5410 (дв. ЯМЗ-238)

КамАЗ-5510, -55102 (дв. КамАЗ-740.10)

КамАЗ-55102 (дв. ЯМЗ-236М2)

КамАЗ-5511 (дв. ЯМЗ-238М2)

КамАЗ-5511, -55111 (дв. КамАЗ-740.10)

КамАЗ-55111 (дв. ЯМЗ-238)

КамАЗ-55111С (дв. КамАЗ-740.11-240)

КамАЗ-65115 (дв. КамАЗ-740.30-260)

КамАЗ-65115-045-62 (дв. КамАЗ-740.62-280)

КамАЗ-65115-048-D3 (дв. Cummins 6ISBe2, 210 kW)

КамАЗ-65115С (дв. КамАЗ-740.11-240)

КамАЗ-6520 (дв. КамАЗ-740.51-320)

КамАЗ-6520-024-61, -6520-010-61 (дв. КамАЗ-740.61-320)

КрАЗ-255 (дв. ЯМЗ-238)

КрАЗ-256, -256Б, -256Б1, -256БС, -257Б1, -6510 (дв. ЯМЗ-238)

МАЗ-457041, -220 (дв. Д-245.30Е2)

МАЗ-457043-320, -325, -330, -332, -335, -337 (дв. Д-245.30Е3)

МАЗ-503, -503А, -503Б, -503В, -503Г, -510, -510Б, -510В, -510Г, -511, -512, -513, -513А, -5549 (дв. ЯМЗ-236)

МАЗ-504 (дв. ЯМЗ-236, i г. п.=7,24)

МАЗ-5337 (дв. ЯМЗ-236)

МАЗ-5516 (дв. MAN D2866LF15)

МАЗ-5516, -021, -30 (дв. ЯМЗ-238Д)

МАЗ-551603 (дв. ЯМЗ-238М2)

МАЗ-5516-030 (дв. ЯМЗ-238Д1)

МАЗ-551603-221, -2124 (дв. ЯМЗ-236БЕ, -236БЕ12)

МАЗ-551605, -551605-221, -551605-222, -551605-223-024, -551605-225, -551605-230-024, -551605-235, -551605-271, -551605-272Р, -551605-275, -551605-280, -551605-280-024Р, -551605-280-060Р, -551605-280-700Р, -551605-2130-024, -551605-2130-024Р, -551605-2130-24 (дв. ЯМЗ-238ДЕ, -238ДЕ2, -238ДЕ2-3)

МАЗ-551608 (дв. ЯМЗ-7511.10)

МАЗ-551633, -321 (дв. Deutz BF6M1013FC)

МАЗ-551646, -371 (дв. Д-263.1Е3)

МАЗ-55165 (6х6) (дв. ЯМЗ-238Д)

МАЗ-551654-221 (дв. КамАЗ-740.51-320)

МАЗ-551669-325 (дв. D2866LF25, 301 kW)

МАЗ-5516А5, -5516А5-371, -5516А5-371Н, -5516А5-375, -5516А5-380 (дв. ЯМЗ-6582.10)

МАЗ-5516А8, -336 (дв. ЯМЗ-6581.10)

МАЗ-5516А8-345Р (дв. ЯМЗ-6581.10)

МАЗ-5549 (дв. ЯМЗ-238М2)

МАЗ-5551 (дв. ЯМЗ-236, q=10т)

МАЗ-5551 (дв. ЯМЗ-236Н)

МАЗ-5551 (дв. ЯМЗ-238М2, q=10т)

МАЗ-555102, -555102-2120, -555102-2123, -555102-2125, -555102-220, -555102-223, -555102-225 (дв. ЯМЗ-236НЕ, -236НЕ2, -236НЕ2-5)

МАЗ-555102-020 (дв. ЯМЗ-238)

МАЗ-5551-023Р (дв. ЯМЗ-238М2)

МАЗ-555103-225Р (дв. ЯМЗ-236БЕ)

МАЗ-55513 (дв. ЯМЗ-238) 4х4

МАЗ-555132-320, -323 (дв. Deutz BF4M1013FC)

МАЗ-555140-2123 (дв. ЯМЗ-236НЕ)

МАЗ-55514-023 (дв. ЯМЗ-238М2)

МАЗ-555142-120Р, -120Р3, -225 (дв. Д-260.5С)

МАЗ-555142-225 (дв. Д-260.5Ф)

МАЗ-555142-4227 (дв. Д-260.5)

МАЗ-555142-4229 (дв. Д-260.5С)

МАЗ-555142-4231 (дв. Д-260.12Е2)

МАЗ-555147-4327 (дв. Д-260.12Е3)

МАЗ-5551А2 (дв. ЯМЗ-236НЕ2)

МАЗ-5551А2, -5551А2-320, -5551А2-323 (дв. ЯМЗ-6562.10)

МАЗ-5551А2, -5551А2-320, -5551А2-323, -5551А2-325 (дв. ЯМЗ-6563.10)

МАЗ-555402 (дв. ЯМЗ-236НЕ2) 4х4

МАЗ-650108-022 (дв.750268 (дв. D2866LF3m3)

МАЗ-МЗКТ-6515 (дв. ЯМЗ-8424.10)

МЗКТ-651510 (дв. ЯМЗ-7511.10)

МЗКТ-65151-040 (дв. ЯМЗ-7511.10)

МЗКТ-65151-040-05 (дв. ЯМЗ-7511.10-02)

МЗКТ-65158, -320 (дв. ЯМЗ-238Д, -238Д-1, -238Д-6)

МЗКТ-65158-420, -421 (дв. ЯМЗ-238Д-6)

МЗКТ-652511 (дв. ЯМЗ-7511, -7511.10)

МоАЗ-75051 (дв. ЯМЗ-238Б3)

МоАЗ-75051 (дв. ЯМЗ-238Д)

МоАЗ-750511 (дв. ЯМЗ-238Б)

МоАЗ-75054-22 (дв. ЯМЗ-7512.10)

Урал-4320 (дв. КамАЗ-740)

Урал-43202 (дв. КамАЗ-740)

Урал-5557-0010-40 (дв. ЯМЗ-236НЕ2-3)

Урал-5557-31 (дв. ЯМЗ-238М2)

Радиатор охлаждения для МАЗ-5551 с ЯМЗ-236М2: 5551-1301010

Радиатор охлаждения: 5551-1301010 ( 5551Т-1301010 )
Применяемость а/м МАЗ
МАЗ-555137, МАЗ-54328, МАЗ-5433, МАЗ-54331, МАЗ-53371, МАЗ-5337 
Двигатели Ярославского завода: ЯМЗ-236М2 180 л/с
Техническая характеристика:
Исполнение: медно-латунный по традиционной технологии пайки
Рядность: 3-рядный радиатор
Теплотдача,кВт: — 128
44 охлаждающие трубки в одном ряду *3 ряда всего 132шт.
Размер сердцевины,мм: ширина — 628,2 высота — 696
Габаритные размеры,мм: длинна-859,ширина-100,высота-867,5
Диаметр патрубков,мм: верх (2шт) — 42, сосок — 16, нижний — 60
Масса,кг: — 28
Емкость ОЖ,лит: — 7,5
*Габариты упаковкм,мм: высота- 920 ширина- 870  толщина- 230
Производитель: АО «ШААЗ»
радиатор 5551-1301010 аналог:
— радиатор 5551Т-1301010ВВ алюминиевый ТАСПО-радиатор
По монтажным размерам идентичен радиаторам
— 54325-1301010 медный АО ШААЗ
— 54325Т-1301010ВВ алюминиевый ТАСПО
— 143.1301010 медный Композит-групп
— 54325-1301010 алюминиевый Лузар хороший бюджетный вариант если вам нужна теплоотдача берите его
! от радиаторов 54325-1301010 отличается следующми моментами
— рядность и теплоотдача  (54325 радиатор 4-рядный с теплоотдачей 116,3 кВт.)
— рамка радиатора наружу (для крепления шторки) у 54325-1303010 рамка внутрь
* 5551-1301010ВВ это тот же самый радиатор 5551-1301010

Отгрузим транспортной компанией: [email protected]

* Цена не является публичной офертой, технические характеристики носят информационный характер.
  Мнения и рекомендации отражают только нашу точку зрения и не являются официальными.

5551-1301010  радиатор охлаждения МАЗ-5551 ЯМЗ-236
медно-латунный,трубчато-пластинчатый, по традиционной технологии пайки
Теплотехнические характеристики идентичны с  143.1301010 , 54325Т-1301010ВВ.
— чертеж радиатора охлаждения 5551-1301010 с габаритными размерами

         

радиаторы охлаждения к автомобилям,тракторам спецтехнике:  [email protected]
радиаторы ШААЗ, радиаторы ТАСПО, Композит-радиаторы, радиаторы Лузар,радиаторы ПОАР
радиаторы Оренбург, радиаторы Wonderful, Лихославль радиаторы, радиатор Пекар

Технические характеристики и применяемость пневмокомпрессора 5336-3509012

Технические характеристики и применяемость пневмокомпрессора 5336-3509012

МАЗ, КрАЗ, Урал, МЗКТ, ЛАЗ, ПАЗ, Амкодор, спецтехника, Четра, ЧЗПТ

Производитель — ОАО «БЗА» (Борисовский завод агрегатов), Беларусь

Система смазки — под давлением от системы смазки двигателя,
Система охлаждения — жидкостная, от системы охлаждения двигателя,
Тип клапана — лепестковый (с большей производительностью по сравнению с традиционным пружинным),
В комплектации со шкивом, привод — клиноременный,

Применение — для питания сжатым воздухом пневматических систем автотранспортных средств с ДВС-ЯМЗ-236, -238, -238НДЧ-1, -6565, -6585, -7601 и их модификаций. Используется в следующей автотехнике:

  модификации  аналоги шкив  ДВС л/мин  Применяемость примечание
5336-3509012500-3509015-Б1
16.3509012
161.3509012
4320-3509009
4331-3509009
130-3509010-Б
130-3509012
130-3509015-Б
Ø172
Ø172
Ø172
ЯМЗ-236, -236НЕ2, -238, -6565, -6585201МАЗ-500А, -503А, -504А, -504В, -509А, -5335, -5429, -5430, -5549, -5336, -53363, -53366, -5337, -53371, -54323, -54328, -54329, -5433, -54331, -5434, -5516, -5551, -6303, -64229, -64255, МЗКТ-65158, -8006-011, Урал-4320-31/-41, -43203-10, -43206-41, -44202-0511-58, -532301, -5557-40, -55571-40, КрАЗ-250, -255, -256, -260, -6443, -65055, -6510, БелАЗ-7547, -75473, -75600, МоАЗ-40481, -7505, Амкодор, универсальное энергосредство Гомсельмаш УЭС-2-280А, ХТЗ Т-150130-3509010-Б — в сборе
130-3509012(-Д/-Г) — со шкивом и патрубком,
130-3509015-Б — со шкивом и нижней крышкой, без патрубка и регулятора давления
5336-3509012-01130-3509009-11нетЯМЗ-236/238, -236НЕ2, ММЗ-245.9201ЗИЛ-130, -131, -431410, -433110, -433360, -442160, -494560, Урал-375, -375А, -375Д, -375С, -377, -377С, Амкодор, ХТЗ, БелАЗ, КАЗ-608, ЛАЗ-695Н, -699Р, ЛиАЗ-677, ПАЗ-3205 
5336-3509012-02
5336-3509012-02Е
5336-3509012-02Т
16.3509012-02нетЯМЗ-236/238, ММЗ-Д245.8, Д245.9, Д249.9Е2, Д249.9Е3, Д260.3, Д260.7-40201ЗИЛ-130, -131, -4329, УралАЗ, Амкодор, ХТЗ, БелАЗ, ПАЗ-4234 «Аврора», МАЗпоршневые кольца — Чехия
5336-3509012-05   201комбайны Гомсельмаш КЗС-812С «Амур-Палессе GS812» 
5336-3509012-К181161.3509012-01нетЯМЗ-236, -238БК, -7511201комбайны Ростсельмаш РСМ-142 «Acros-530», РСМ-181 «Torum-740» 
5336-3509012-1016.3509012-20
161.3509012-20
А29.14.000К
А29.14.000М
Ø144
Ø172
ЯМЗ-236, -238, -6565, -6585, -7601270МАЗ-5336, -533602, -533603, -533605, -533608, -53363, -53366, -543202, -543203, -543205, -543208, -5440, -5440А5, -5440А8, -551603, -551605, -5516А5, -5516А5-050, -555102, -5551А2, -6303, -630308, -6303А3, -6303А5, -631705, -642205, -642208, -64229, -643068, -6430А8, -651705, КрАЗ-255, -256, -6322, -65055-02, -6510, -7133Н4, -7133С4, МЗКТ-652511, -6527, -69234, -74171, -80211, Урал-4320, -63674, -63685, Амкодор, ЛАЗ, Четра-ПК-60.01, ПАЗ-4230 
5336-3509012-10-03
5336-3509012-10-03Е
161.3509012-20-03нетММЗ-Д-260.4, Д-260.4S2, Д-260.5, Д-260.5-27, Д-260.5Е2, Д-260.5Е3, Д-260.5С, Д-260.12Е2, Д-260.12Е3, Д-263.1Е3360МАЗ-533642, МАЗ-533647-320, -321, -340, -341, МАЗ-533742, МАЗ-533745-322, -324, -342, -346, -347, МАЗ-533747-346, -347, МАЗ-543242, -543342, -543442, МАЗ-551646-347, -357, МАЗ-555142, -555145, -555146, -555147, МАЗ-555242, -555442;
АМАЗ-103, ЗиЛ-433185

NVIDIA GeForce 940MX — NotebookCheck.net Tech

Обзоры ноутбуков с видеокартой NVIDIA GeForce 940MX

Acer Aspire E5-774G-78NA : Intel Core i7-6500U, 17,30 дюйма, 3 кг
Обзор »Обзор ноутбука Acer Aspire E5-774G-78NA (GeForce 940MX GDDR5)

Acer TravelMate P259-MG-71UU : Intel Core i7-6500U, 15,60 дюйма, 2,3 кг
Обзор »Обзор ноутбука Acer TravelMate P259-MG-71UU

Acer TravelMate P658-G2-MG-7327 : Intel Core i7-7500U, 15.60 «, 2,1 кг. Обзор
» Ноутбук Acer TravelMate P658-G2 (7500U, 940MX, FHD).

Asus AsusPro P4540UQ-FY0056R : Intel Core i5-7200U, 15,60 «, 2,4 кг
Обзор» Ноутбук Asus ASUSPRO P4540UQ (7200U, 940MX, Full-HD).

Asus UX310UQ-FC396T : Intel Core i7-7500U, 13.30 «, 1.5 кг
Обзор» Обзор ноутбука Asus ZenBook UX310UQ (7500U, 940MX, Full HD)

Asus VivoBook 15 X510UQ-BQ534T : Intel Core i5-8250U, 15.60 «, 1,6 кг
Обзор» Ноутбук Asus VivoBook 15 (i5-8250U, GeForce 940MX, FHD). Обзор

Asus Vivobook F556UQ-XO626D : Intel Core i5-6198DU, 15.60 «, 2.3 кг
Обзор» Обзор ноутбука Asus Vivobook F556UQ-XO626D

Asus VivoBook Flip TP501UQ-FZ119T : Intel Core i5-7200U, 15,60 дюйма, 2,2 кг
Обзор »Asus VivoBook Flip 15 TP501UQ (i5-7200U, 940MX, FHD) Обзор конвертируемого

Asus Vivobook S15 S510UQ-BQ189T : Intel Core i5-7200U, 15.60 «, 1,7 кг
. Обзор» Ноутбук Asus VivoBook S15 S510UQ (i5-7200U, 940MX).

Asus VivoBook S410UQ-NH74 : Intel Core i7-8550U, 14.00 «, 1,3 кг
Обзор» Ноутбук Asus VivoBook S14 S410UQ (i7-8550U, 940MX, Full HD).

Asus VivoBook X556UQ-XO076T : Intel Core i5-6200U, 15.60 «, 2.3 кг
Обзор» Обзор ноутбука Asus VivoBook X556UQ-XO076T

Asus Zenbook UX310UQ-GL011T : Intel Core i7-6500U, 13,30 дюйма, 1.5 кг
Обзор »Обзор ноутбука Asus ZenBook UX310UQ-GL011T

Asus Zenbook UX3410UQ-GV077T : Intel Core i7-7500U, 14.00 «, 1,4 кг
Обзор» Ноутбук Asus ZenBook UX3410UQ (7500U, 940MX, Full HD)

Asus Zenbook UX3430UQ-GV012T : Intel Core i7-7500U, 14.00 «, 1,3 кг
Обзор» Ноутбук Asus Zenbook UX3430UQ (7500U, 940MX, 512 ГБ).

Dell Inspiron 15 7570 : Intel Core i7-8550U, 15,60 дюйма, 2 кг
Обзор »Ноутбук Dell Inspiron 15 7570 (i7-8550U, 940MX).

Dell Inspiron 17 7778 : Intel Core i7-6500U, 17.30 дюймов, 2,8 кг Обзор
»Обзор кабриолета Dell Inspiron 17 7778

Dell Vostro 15-5568 : Intel Core i7-7500U, 15,60 дюйма, 1,9 кг
Обзор »Ноутбук Dell Vostro 15 5568 (i7-7500U, 940MX).

HP Pavilion 14-al003ng : Intel Core i5-6200U, 14,00 «, 1,5 кг
Обзор» Обзор ноутбука HP Pavilion 14-al003ng

HP Pavilion 15-cc107ng : Intel Core i5-8250U, 15,60 дюйма, 1,8 кг
Обзор »Ноутбук HP Pavilion 15t (i5-8250U, 940MX, FHD)

Технический директор HP Pavilion 15t-au100 (W0P31AV) : Intel Core i7-7500U, 15.60 дюймов, 2,1 кг Обзор
»Обзор ноутбука HP Pavilion 15t-au100 (W0P31AV)

HP Pavilion x360 14-ba011ng : Intel Core i5-7200U, 14.00 «, 1,7 кг
Обзор» Обзор ноутбука HP Pavilion x360 14t (7200U, 940MX, FHD)

Обзор HP Spectre x360 15-bl002xx : Intel Core i7-7500U, 15,60 дюйма, 2 кг
»Обзор конвертируемого ноутбука HP Spectre x360 15-bl002xx

Huawei MateBook D 15, i7-7500U 940MX : Intel Core i7-7500U, 15,60 «, 1,8 кг
Обзор» Ноутбук Huawei MateBook D (i7-7500U, GeForce 940MX).

Lenovo IdeaPad 320-15IKB 80XL01NEGE : Intel Core i5-7200U, 15.60 «, 2,2 кг. Обзор
» Ноутбук Lenovo IdeaPad 320-15IKB (7200U, 940MX, FHD).

Lenovo IdeaPad 510-15IKB 80SV0087GE : Intel Core i7-7500U, 15,60 дюйма, 2,2 кг
Обзор »Обзор ноутбука Lenovo IdeaPad 510-15IKB

Lenovo Ideapad 510-15ISK : Intel Core i5-6200U, 15,60 дюйма, 2,2 кг
Обзор »Обзор ноутбука Lenovo IdeaPad 510-15ISK

Lenovo IdeaPad 520s-14IKB 80X200C1GE : Intel Core i5-7200U, 14.00 «, 1,6 кг
Обзор» Обзор ноутбука Lenovo IdeaPad 520s-14IKB (Core i5-7200U, 940MX)

Lenovo IdeaPad 710S Plus-13IKB : Intel Core i7-7500U, 13.30 «, 1,1 кг. Обзор
» Обзор субноутбука Lenovo IdeaPad 710S Plus (Core i7)

Lenovo ThinkPad 25 : Intel Core i7-7500U, 14.00 «, 1,7 кг
Обзор» Обзор ноутбука Lenovo ThinkPad 25 Anniversary Edition

Lenovo ThinkPad E470-20h3S00400 : Intel Core i5-7200U, 14.00 «, 1,9 кг
Обзор» Обзор ноутбука Lenovo ThinkPad E470 (Core i5, GeForce 940MX)

Lenovo ThinkPad T460p-20FXS05500 : Intel Core i7-6700HQ, 14,00 «, 1.9 кг Обзор
»Обзор ноутбука Lenovo ThinkPad T460p (Core i7, GeForce 940MX)

Lenovo ThinkPad T470p-20J7S00000 : Intel Core i7-7700HQ, 14.00 «, 1,9 кг
Обзор» Обзор ноутбука Lenovo ThinkPad T470p (Core i7, GeForce 940MX)

Lenovo ThinkPad T560-20FH002RGE : Intel Core i7-6600U, 15,60 дюйма, 2,3 кг
Обзор »Обзор ноутбука Lenovo ThinkPad T560 (Core i7, 940MX, 3K)

Lenovo ThinkPad T570-20HAS01E00 : Intel Core i7-7500U, 15.60 «, 2 кг
Обзор» Ноутбук Lenovo ThinkPad T570 (Core i7, 4K, 940MX).

Lenovo Yoga 710-14ISK : Intel Core i5-6200U, 14.00 «, 1,6 кг
Обзор» Обзор трансформируемого Lenovo Yoga 710-14ISK

MSI CX62 7QL : Intel Core i5-7200U, 15,60 дюйма, 2,2 кг
Обзор »Обзор ноутбука MSI CX62 7QL

MSI CX72 6QD : Intel Core i7-6700HQ, 17.30 «Обзор
» Обзор Nvidia GeForce 940MX DDR3 — внутри MSI CX72

MSI CX72-7QLi581 : Intel Core i5-7200U, 17.30 «, 2,8 кг Обзор
» Обзор ноутбука MSI CX72-7QLi581

Ноутбук Samsung 9 NP900X5N-X01US : Intel Core i7-7500U, 15.00 «, 1,2 кг
Обзор» Ноутбук Samsung 9 NP900X5N (7500U, FHD, GeForce 940MX). Обзор ноутбука

Xiaomi Mi Notebook Air 13.3 2016 : Intel Core i5-6200U, 13,30 «, 1,3 кг
Обзор» Обзор ноутбука Xiaomi Mi Air (13,3 дюйма)

Acer Aspire 5 A515-51G-35NN : Intel Core i3-6006U, 15,60 дюйма, 2,2 кг
Внешний обзор »Acer Aspire 5 A515-51G-35NN

Acer Aspire 5 A515-51G-51LK : Intel Core i5-7200U, 15.60 дюймов, 2,2 кг
Внешний обзор »Acer Aspire 5 A515-51G-51LK

Acer Aspire 5 A515-51G-52R1 : Intel Core i5-7200U, 15,60 дюйма, 2,1 кг
Внешний обзор »Acer Aspire 5 A515-51G-52R1

Acer Aspire 5 A515-51G-54T5 : Intel Core i5-7200U, 15,60 дюйма, 2,2 кг
Внешний обзор »Acer Aspire 5 A515-51G-54T5

Acer Aspire 5 A515-51G-58AM : Intel Core i5-7200U, 15,60 дюйма, 2,1 кг
Внешний обзор »Acer Aspire 5 A515-51G-58AM

Acer Aspire E5-575G-36VF : Intel Core i3-6006U, 15.60 дюймов, 2,4 кг
Внешний обзор »Acer Aspire E5-575G-36VF

Acer Aspire E5-575G-50AL : Intel Core i5-7200U, 15,60 дюйма, 2,4 кг
Внешний обзор »Acer Aspire E5-575G-50AL

Acer Aspire E5-575G-51PV : Intel Core i5-7200U, 15,60 дюйма, 2,4 кг
Внешний обзор »Acer Aspire E5-575G-51PV

Acer Aspire E5-575G-51WV : Intel Core i5-7200U, 15,60 дюйма, 2,4 кг
Внешний обзор »Acer Aspire E5-575G-51WV

Acer Aspire E5-575G-53VG : Intel Core i5-6200U, 15.60 дюймов, 2,4 кг
Внешний обзор »Acer Aspire E5-575G-53VG

Acer Aspire E5-575G-54TU : Intel Core i5-6200U, 15,60 дюйма, 2,4 кг
Внешний обзор »Acer Aspire E5-575G-54TU

Acer Aspire E5-575G-55XS : Intel Core i5-7200U, 15,60 дюйма, 2,2 кг
Внешний обзор »Acer Aspire E5-575G-55XS

Acer Aspire E5-575G-56X : Intel Core i5-7200U, 15,60 дюйма, 2,4 кг
Внешний обзор »Acer Aspire E5-575G-56X

Acer Aspire E5-575G-56X9 : Intel Core i5-7200U, 15.60 дюймов, 2,2 кг
Внешний обзор »Acer Aspire E5-575G-56X9

Acer Aspire E5-575G-57D4 : Intel Core i5-7200U, 15,60 дюйма, 2,4 кг
Внешний обзор »Acer Aspire E5-575G-57D4

Acer Aspire E5-575G-598W : Intel Core i5-7200U, 15,60 дюйма, 2,4 кг
Внешний обзор »Acer Aspire E5-575G-598W

Acer Aspire E5-575G-71UK : Intel Core i7-6500U, 15,60 дюйма, 2,2 кг
Внешний обзор »Acer Aspire E5-575G-71UK

Acer Aspire E5-575G-73CN : Intel Core i7-7500U, 15.60 дюймов, 2,2 кг
Внешний обзор »Acer Aspire E5-575G-73CN

Acer Aspire E5-576G-36WC : Intel Core i3-7130U, 15,60 дюйма, 2,1 кг
Внешний обзор »Acer Aspire E5-576G-36WC

Acer Aspire E5-774G-553R : Intel Core i5-7200U, 17,30 дюйма, 3 кг
Внешний обзор »Acer Aspire E5-774G-553R

Acer Aspire E5-774G-59PC : Intel Core i5-6200U, 17,30 дюйма, 3,3 кг
Внешний обзор »Acer Aspire E5-774G-59PC

Acer Aspire F15 F5-573G-50BM : Intel Core i5-6200U, 15.60 дюймов, 2,4 кг
Внешний обзор »Acer Aspire F15 F5-573G-50BM

Acer Aspire F15 F5-573G-52PJ : Intel Core i5-7200U, 15,60 дюйма, 2,3 кг
Внешний обзор »Acer Aspire F15 F5-573G-52PJ

Acer Aspire F15 F5-573G-7420 : Intel Core i7-7500U, 15,60 дюйма, 2,3 кг
Внешний обзор »Acer Aspire F15 F5-573G-7420

Acer Aspire F15 F5-573G-748R : Intel Core i7-6500U, 15,60 дюйма, 2,3 кг
Внешний обзор »Acer Aspire F15 F5-573G-748R

Acer Aspire F15 F5-573G-75UZ : Intel Core i7-6500U, 15.60 дюймов, 2.3 кг
Внешний обзор »Acer Aspire F15 F5-573G-75UZ

Acer Aspire F15 F5-573G-77L0 : Intel Core i7-6500U, 15.60 «, 2.3 кг
Внешний обзор» Acer Aspire F15 F5-573G-77L0

Acer Aspire F5 573G-71S6 : Intel Core i7-7500U, 15.60 «, 2.3 кг
Внешний обзор» Acer Aspire F5 573G-71S6

Acer Aspire F5-573G-52PJ : Intel Core i5-7200U, 15,60 дюйма, 2,3 кг
Внешний обзор »Acer Aspire F5-573G-52PJ

Acer Aspire F5-771G-31JJ : Intel Core i3-7100U, 17.30 дюймов, 2,9 кг
Внешний обзор »Acer Aspire F5-771G-31JJ

Acer Aspire R15 R5-571TG-50RF : Intel Core i5-6200U, 15,60 дюйма, 2,2 кг
Внешний обзор »Acer Aspire R15 R5-571TG-50RF

Acer Aspire R15 R5-571TG-765T : Intel Core i7-6500U, 15,60 дюйма, 2,2 кг
Внешний обзор »Acer Aspire R15 R5-571TG-765T

Acer TravelMate P259-MG-549Q : Intel Core i5-6200U, 15,60 дюйма, 2,4 кг
Внешний обзор »Acer TravelMate P259-MG-549Q

Asus A442UQ-FA020T : Intel Core i7-7500U, 14.00 «, 1.8 кг
Внешний обзор» Asus A442UQ-FA020T

Asus A456UQ-FA073D : Intel Core i7-7500U, 14.00 «, 2.3 кг
Внешний обзор» Asus A456UQ-FA073D

Asus K501UQ : Intel Core i5-6200U, 15.60 «, 2 кг
Внешний обзор» Asus K501UQ

Asus K501UQ-DM032T : Intel Core i7-6500U, 15.60 «, 2 кг
Внешний обзор» Asus K501UQ-DM032T

Asus K556UQ-XO431T : Intel Core i5-6200U, 15,60 дюйма, 2.4 kg
Внешний обзор »Asus K556UQ-XO431T

Asus Q524UQ : Intel Core i7-6500U, 15.60 «, 2.3 кг
Внешний обзор» Asus Q524UQ

Asus R558UQ-DM539D : Intel Core i5-7200U, 15,60 «, 2,1 кг
Внешний обзор» Asus R558UQ-DM539D

Asus UX310UQ-FC396T : Intel Core i7-7500U, 13.30 «, 1.5 кг
Внешний обзор» Asus UX310UQ-FC396T

Asus UX410UQ-GV034T : Intel Core i7-7500U, 14.00 «, 1.2 kg
Внешний обзор »Asus UX410UQ-GV034T

Asus UX410UQ-GV045R : Intel Core i7-7500U, 14.00 «, 1,4 кг
Внешний обзор» Asus UX410UQ-GV045R

Asus UX410UQ-GV109T : Intel Core i7-7500U, 14.00 «, 1.5 кг
Внешний обзор» Asus UX410UQ-GV109T

Asus Vivobook 17 A705UQ-BX109T : Intel Core i5-8250U, 17,30 дюйма, 2,1 кг
Внешний обзор »Asus Vivobook 17 A705UQ-BX109T

Asus VivoBook Flip 15 TP510UQ-E8033T : Intel Core i5-8250U, 15.60 дюймов, 1,9 кг
Внешний обзор »Asus VivoBook Flip 15 TP510UQ-E8033T

Asus VivoBook Flip TP501UQ-CJ012T : Intel Core i5-6200U, 15,60 дюйма, 2,2 кг
Внешний обзор »Asus VivoBook Flip TP501UQ-CJ012T

Asus VivoBook R558UQ-DM326T : Intel Core i5-6200U, 15.60 «, 2.3 кг
Внешний обзор» Asus VivoBook R558UQ-DM326T

Asus VivoBook S15 S510UQ-BQ165T : Intel Core i7-7500U, 15.60 «, 2 кг
Внешний обзор» Asus VivoBook S15 S510UQ-BQ165T

Asus VivoBook S15 S510UQ-BQ178T : Intel Core i5-7200U, 15.60 «, 1,7 кг
Внешний обзор» Asus VivoBook S15 S510UQ-BQ178T

Asus Vivobook S15 S510UQ-BQ182T : Intel Core i7-7500U, 15.60 «, 1,7 кг
Внешний обзор» Asus Vivobook S15 S510UQ-BQ182T

Asus Vivobook S15 S510UQ-BQ189T : Intel Core i5-7200U, 15.60 «, 1,7 кг
Внешний обзор» Asus Vivobook S15 S510UQ-BQ189T

Asus VivoBook S15 S510UQ-BQ702T : Intel Core i7-8550U, 15.60 «, 1,7 кг
Внешний обзор» Asus VivoBook S15 S510UQ-BQ702T

Asus Vivobook S15 S510UQ-BR180T : Intel Core i7-7500U, 15.60 «, 1,7 кг
Внешний обзор» Asus Vivobook S15 S510UQ-BR180T

Asus VivoBook S510UQ-BQ322T : Intel Core i5-7200U, 15.60 «, 1,6 кг
Внешний обзор» Asus VivoBook S510UQ-BQ322T

Asus VivoBook S510UQ-BQ323T : Intel Core i5-7200U, 15.60 «, 1.7 кг
Внешний обзор» Asus VivoBook S510UQ-BQ323T

Asus VivoBook X510UQ-BR594T : Intel Core i5-8250U, 15.60 «, 1.7 кг
Внешний обзор» Asus VivoBook X510UQ-BR594T

Asus X542UQ : Intel Core i3-7100U, 15.60 «, 2.2 кг
Внешний обзор» Asus X542UQ

Asus X542UQ-DM284 : Intel Core i5-7200U, 15.60 «, 2.2 кг
Внешний обзор» Asus X542UQ-DM284

Asus X550VQ-0021B : Intel Core i5-6300HQ, 15,60 дюйма, 2,5 кг
Внешний обзор »Asus X550VQ-0021B

Asus X756UQ-TY355T : Intel Core i5-7200U, 17.30 «, 2,7 кг
Внешний обзор» Asus X756UQ-TY355T

Asus ZenBook Flip UX560UQ 2017 : Intel Core i7-7500U, 15.60 дюймов, 2,3 кг
Внешний обзор »Asus ZenBook Flip UX560UQ 2017

Asus Zenbook Flip UX560UQ-FZ018R : Intel Core i5-6200U, 15,60 дюйма, 2,3 кг
Внешний обзор »Asus Zenbook Flip UX560UQ-FZ018R

Asus Zenbook U4100UQ : Intel Core i7-7500U, 14.00 «, 1.3 кг
Внешний обзор» Asus Zenbook U4100UQ

Asus Zenbook U5100UQ : Intel Core i7-7500U, 15,60 дюйма, 1,6 кг
Внешний обзор »Asus Zenbook U5100UQ

Asus Zenbook UX310UQ-FC275T : Intel Core i5-7200U, 13.30 «, 1.5 кг
Внешний обзор» Asus Zenbook UX310UQ-FC275T

Asus Zenbook UX310UQ-GL011T : Intel Core i7-6500U, 13,30 «, 1,5 кг
Внешний обзор» Asus Zenbook UX310UQ-GL011T

Внешний обзор »Asus Zenbook UX310UQ-GL011T

Asus ZenBook UX3410UQ-GV077T : Intel Core i7-7500U, 14.00 «, 1,4 кг
Внешний обзор» Asus ZenBook UX3410UQ-GV077T

Asus ZenBook UX430UQ-PURE4 : Intel Core i7-7500U, 14.00 «, 1,3 кг
Внешний обзор» Asus ZenBook UX430UQ-PURE4

Dell Inspiron 14 7460 : Intel Core i5-7200U, 14.00 «, 1,7 кг
Внешний обзор» Dell Inspiron 14 7460

Dell Inspiron 15 7560, Core i7 : Intel Core i7-7500U, 15,60 дюйма, 2 кг
Внешний обзор »Dell Inspiron 15-7560, Core i7

Dell Inspiron 15 7570 : Intel Core i7-8550U, 15,60 дюйма, 2 кг
Внешний обзор »Dell Inspiron 15-7570

Dell Inspiron 15 7570-0Ch48 : Intel Core i5-8250U, 15,60 дюйма, 2 кг
Внешний обзор »Dell Inspiron 15 7570-0Ch48

Dell Inspiron 17 7778 : Intel Core i7-6500U, 17.30 дюймов, 2,8 кг
Внешний обзор »Dell Inspiron 17 7778

Dell Inspiron 17-7778-1142 : Intel Core i7-6500U, 17,30 дюйма, 2,8 кг
Внешний обзор »Dell Inspiron 17-7778-1142

Dell Inspiron 17-7779 : Intel Core i7-7500U, 17,30 дюйма, 2,8 кг
Внешний обзор »Dell Inspiron 17-7779

Dell Latitude 5580-X1W6W : Intel Core i7-7820HQ, 15,60 дюйма, 2,2 кг
Внешний обзор »Dell Latitude 5580-X1W6W

Dell Vostro 14 5468-P75G001 : Intel Core i5-7200U, 14.00 «, 1,6 кг
Внешний обзор» Dell Vostro 5468-P75G001

Dell Vostro 15 5568-V4F8F : Intel Core i7-7500U, 15,60 дюйма, 2 кг
Внешний обзор »Dell Vostro 15 5568-V4F8F

Dell Vostro 5468-N010VN5468EMEA01 : Intel Core i7-7500U, 14.00 «, 1,6 кг
Внешний обзор» Dell Vostro 5468-N010VN5468EMEA01

HP Envy 15-bp030nd x360 : Intel Core i7-7500U, 15,60 дюйма, 2,2 кг
Внешний обзор »HP Envy 15-bp030nd x360

HP Envy 17-W0Q29AV : Intel Core i7-7500U, 17.30 дюймов, 3 кг
Внешний обзор »HP Envy 17-W0Q29AV

HP Envy x360 15-bp008ng : Intel Core i7-7500U, 15,60 дюйма, 2,2 кг
Внешний обзор »HP Envy x360 15-bp008ng

HP Pavilion 14-al104ng : Intel Core i5-7200U, 14,10 «, 1,5 кг
Внешний обзор» HP Pavilion 14-al104ng

HP Pavilion 14-AL107NT : Intel Core i5-7200U, 14.00 «, 1,5 кг
Внешний обзор» HP Pavilion 14-AL107NT

HP Pavilion 14-ba009ne x360 : Intel Core i5-7200U, 14.00 «, 1,7 кг
Внешний обзор» HP Pavilion 14-ba009ne x360

HP Pavilion 14-ba028n x360 : Intel Core i5-7200U, 14.00 «, 1,6 кг
Внешний обзор» HP Pavilion 14-ba028n x360

HP Pavilion 14-ba139ns x360 : Intel Core i5-8250U, 14.00 «, 1,6 кг
Внешний обзор» HP Pavilion 14-ba139ns x360

HP Pavilion 14-ba140ns x360 : Intel Core i7-8550U, 14.00 «, 1,6 кг
Внешний обзор» HP Pavilion 14-ba140ns x360

HP Pavilion 14-BF007NS : Intel Core i7-7500U, 14.00 «, 1,6 кг
Внешний обзор» HP Pavilion 14-BF007NS

HP Pavilion 14-bf009ns : Intel Core i5-7200U, 14.00 «, 1,5 кг
Внешний обзор» HP Pavilion 14-bf009ns

HP Pavilion 14-Bf009Ur : Intel Core i7-7500U, 14.00 «, 1,6 кг
Внешний обзор» HP Pavilion 14-Bf009Ur

HP Pavilion 14-bf013ns : Intel Core i7-7500U, 14.00 «, 1,5 кг
Внешний обзор» HP Pavilion 14-bf013ns

HP Pavilion 14-bf014ns : Intel Core i7-7500U, 14.00 «, 1,5 кг
Внешний обзор» HP Pavilion 14-bf014ns

HP Pavilion 14-bf015ns : Intel Core i7-7500U, 14.00 «, 1,5 кг
Внешний обзор» HP Pavilion 14-bf015ns

HP Pavilion 14-bf104ns : Intel Core i5-8250U, 14.00 «, 1,5 кг
Внешний обзор» HP Pavilion 14-bf104ns

HP Pavilion 14-bf105ns : Intel Core i5-8250U, 14.00 «, 1,6 кг
Внешний обзор» HP Pavilion 14-bf105ns

HP Pavilion 14-bf106ns : Intel Core i5-8250U, 14.00 «, 1,6 кг
Внешний обзор» HP Pavilion 14-bf106ns

HP Pavilion 14-bf108ns : Intel Core i7-8550U, 14.00 «
Внешний обзор» HP Pavilion 14-bf108ns

HP Pavilion 15-au100ns : Intel Core i5-7200U, 15,60 дюйма, 2 кг
Внешний обзор »HP Pavilion 15-au100ns

HP Pavilion 15-au111nt : Intel Core i5-7200U, 15,60 дюйма, 2 кг
Внешний обзор »HP Pavilion 15-au111nt

HP Pavilion 15-au120tx : Intel Core i5-7200U, 15.60 дюймов, 2 кг
Внешний обзор »HP Pavilion 15-au120tx

HP Pavilion 15-cc108ng : Intel Core i7-8550U, 15,60 дюйма, 1,8 кг
Внешний обзор »HP Pavilion 15-cc108ng

HP Pavilion 15-cc504ur : Intel Core i5-7200U, 15,60 дюйма, 1,9 кг
Внешний обзор »HP Pavilion 15-cc504ur

HP Pavilion 15-cc508ns : Intel Core i5-7200U, 15,60 дюйма, 1,9 кг
Внешний обзор »HP Pavilion 15-cc508ns

HP Pavilion 15-cc509nh : Intel Core i5-7200U, 15.60 дюймов, 1,9 кг
Внешний обзор »HP Pavilion 15-cc509nh

HP Pavilion 15-cc509ns : Intel Core i5-7200U, 15,60 дюйма, 1,8 кг
Внешний обзор »HP Pavilion 15-cc509ns

HP Pavilion 15-cc593nd : Intel Core i5-7200U, 15,60 дюйма, 1,9 кг
Внешний обзор »HP Pavilion 15-cc593nd

HP Pavilion 15-ck001ns : Intel Core i5-8250U, 15,60 дюйма, 1,8 кг
Внешний обзор »HP Pavilion 15-ck001ns

HP Pavilion 15-ck007ns : Intel Core i7-8550U, 15.60 дюймов, 1,9 кг
Внешний обзор »HP Pavilion 15-ck007ns

HP Pavilion 15-ck015ns : Intel Core i5-8250U, 15,60 дюйма, 1,8 кг
Внешний обзор »HP Pavilion 15-ck015ns

HP Pavilion 15-X9Z69EA : Intel Core i5-6200U, 15,60 дюйма, 2,4 кг
Внешний обзор »HP Pavilion 15-X9Z69EA

HP Pavilion x360 14-ba028ns : Intel Core i5-7200U, 14.00 «, 1,6 кг
Внешний обзор» HP Pavilion x360 14-ba028ns

HP Pavilion x360 14-ba043nd : Intel Core i7-7500U, 14.00 «, 1,6 кг
Внешний обзор» HP Pavilion x360 14-ba043nd

HP Pavilion x360 14-ba073TX : Intel Core i5-7200U, 14.00 «, 1,6 кг
Внешний обзор» HP Pavilion x360 14-ba073TX

HP Spectre x360 15-bl001ng : Intel Core i7-7500U, 15,60 дюйма, 2 кг
Внешний обзор »HP Spectre x360 15-bl001ng

HP Spectre x360 15-bl002xx : Intel Core i7-7500U, 15,60 дюйма, 2 кг
Внешний обзор »HP Spectre x360 15-bl002xx

HP Spectre x360 15-bl020nd : Intel Core i7-7500U, 15.60 дюймов, 2 кг
Внешний обзор »HP Spectre x360 15-bl020nd

Huawei MateBook D 15, i7-7500U 940MX : Intel Core i7-7500U, 15.60 «, 1.8 кг
Внешний обзор» Huawei MateBook D

Lenovo IdeaPad 320-15IKB 80XL01NEGE : Intel Core i5-7200U, 15,60 дюйма, 2,2 кг
Внешний обзор »Lenovo IdeaPad 320-15IKB 80XL01NEGE

Lenovo IdeaPad 320-15IKB-80XL0053RK : Intel Core i5-7200U, 15,60 дюйма, 2 кг
Внешний обзор »Lenovo IdeaPad 320-15IKB-80XL0053RK

Lenovo IdeaPad 320-15IKB-80XL03AUIN : Intel Core i5-7200U, 15.60 дюймов, 2,2 кг
Внешний обзор »Lenovo IdeaPad 320-15IKB-80XL03AUIN

Lenovo Ideapad 320-15IKB-80XL03L4SP : Intel Core i3-7130U, 15,60 дюйма, 2,2 кг
Внешний обзор »Lenovo Ideapad 320-15IKB-80XL03L4SP

Lenovo Ideapad 320-15IKBN-80XL02U2SP : Intel Core i7-7500U, 15,60 дюйма, 2,2 кг
Внешний обзор »Lenovo Ideapad 320-15IKBN-80XL02U2SP

Lenovo Ideapad 320-15IKBN-80XL02U4SP : Intel Core i5-7200U, 15,60 дюйма, 2,2 кг
Внешний обзор »Lenovo Ideapad 320-15IKBN-80XL02U4SP

Lenovo Ideapad 510-15IKB-80SV00G3GE : Intel Core i5-7200U, 15.60 дюймов, 2,2 кг
Внешний обзор »Lenovo Ideapad 510-15IKB-80SV00G3GE

Lenovo Ideapad 510-15IKB-80SV00QVGE : Intel Core i7-7500U, 15,60 дюйма, 2,2 кг
Внешний обзор »Lenovo Ideapad 510-15IKB-80SV00QVGE

Lenovo Ideapad 510-15ISK : Intel Core i5-6200U, 15,60 дюйма, 2,2 кг
Внешний обзор »Lenovo Ideapad 510-15ISK

Lenovo Ideapad 510-15ISK 80SR00AVSP : Intel Core i5-6200U, 15,60 дюйма, 2,1 кг
Внешний обзор »Lenovo Ideapad 510-15ISK 80SR00AVSP

Lenovo Ideapad 510-15ISK-80SR003JGE : Intel Core i7-6500U, 15.60 дюймов, 2,1 кг
Внешний обзор »Lenovo Ideapad 510-15ISK-80SR003JGE

Lenovo Ideapad 520-15IKB-80YL00MMSP : Intel Core i5-7200U, 15,60 дюйма, 2,2 кг
Внешний обзор »Lenovo Ideapad 520-15IKB-80YL00MMSP

Lenovo Ideapad 520-15IKB-80YL00MNSP : Intel Core i7-7500U, 15,60 дюйма, 2,2 кг
Внешний обзор »Lenovo Ideapad 520-15IKB-80YL00MNSP

Lenovo IdeaPad 520s-14IKB 80X200C1GE : Intel Core i5-7200U, 14.00 «, 1,6 кг
Внешний обзор» Lenovo IdeaPad 520s-14IKB 80X200C1GE

Lenovo IdeaPad 520s-14IKB-80X2002VCK : Intel Core i7-7500U, 14.00 «, 1,7 кг
Внешний обзор» Lenovo IdeaPad 520s-14IKB-80X2002VCK

Lenovo IdeaPad 710S Plus-13IKB : Intel Core i7-7500U, 13,30 дюйма, 1,1 кг
Внешний обзор »Lenovo IdeaPad 710S Plus-13IKB

Lenovo IdeaPad 720S-80XC003RGE : Intel Core i5-7200U, 14.00 «, 1,6 кг
Внешний обзор» Lenovo IdeaPad 720S-80XC003RGE

Lenovo IdeaPad 720S-80XC004NGE : Intel Core i7-7500U, 14.00 «, 1,6 кг
Внешний обзор» Lenovo IdeaPad 720S-80XC004NGE

Lenovo IdeaPad Flex 5 14-80XA0009US : Intel Core i7-7500U, 14.00 «, 1,7 кг
Внешний обзор» Lenovo Flex 5 14-80XA0009US

Lenovo IdeaPad Flex 5 15-80XB0014US : Intel Core i7-7500U, 15,60 дюйма, 2 кг
Внешний обзор »Lenovo Flex 5 15-80XB0014US

Lenovo IdeaPad Flex 5 1570-80XB0000US : Intel Core i7-7500U, 15,60 дюйма, 2 кг
Внешний обзор »Lenovo Flex 5 1570-80XB0000US

Lenovo ThinkPad 25 : Intel Core i7-7500U, 14.00 «, 1,7 кг
Внешний обзор» Lenovo ThinkPad 25

Lenovo ThinkPad E470-20h3S00400 : Intel Core i5-7200U, 14.00 «, 1,9 кг
Внешний обзор» Lenovo ThinkPad E470-20h3S00400

Lenovo ThinkPad T460p-20FXS05500 : Intel Core i7-6700HQ, 14.00 «, 1,9 кг
Внешний обзор» Lenovo ThinkPad T460p-20FXS05500

Lenovo ThinkPad T470p-20J60018MH : Intel Core i7-7700HQ, 14.00 «, 2 кг
Внешний обзор» Lenovo ThinkPad T470p-20J60018MH

Lenovo ThinkPad T560-20FH002RGE : Intel Core i7-6600U, 15,60 дюйма, 2,3 кг
Внешний обзор »Lenovo ThinkPad T560-20FH002RGE

Lenovo Yoga 3-14-80JH00QYSP : Intel Core i3-5005U, 14.00 «, 1,6 кг
Внешний обзор» Lenovo Yoga 3-14-80JH00QYSP

Lenovo Yoga 520-14-80X8001URK : Intel Core i3-7100U, 14.00 «, 1,7 кг
Внешний обзор» Lenovo Yoga 520-14-80X8001URK

Lenovo Yoga 520-14IKB 80X80097GE : Intel Core i5-7200U, 14.10 «, 1.8 кг
Внешний обзор» Lenovo Yoga 520-14IKB

Lenovo Yoga 520-14IKB-80X8006KSP : Intel Core i5-7200U, 14.00 «, 1.8 кг
Внешний обзор» Lenovo Yoga 520-14IKB-80X8006KSP

Lenovo Yoga 520-14IKB-80X8006LSP : Intel Core i3-7100U, 14.00 «, 1.8 кг
Внешний обзор» Lenovo Yoga 520-14IKB-80X8006LSP

Lenovo Yoga 700-14ISK-80TY000QGE : Intel Core i7-6500U, 14.00 «, 1.5 кг
Внешний обзор» Lenovo Yoga 700-14ISK-80TY000QGE

Lenovo Yoga 710-14 80TY002QTX : Intel Core i7-6500U, 14.00 «, 1,6 кг
Внешний обзор» Lenovo Yoga 710-14 80TY002QTX

Lenovo Yoga 710-14IKB-80V4002VGE : Intel Core i7-7500U, 14.00 «, 1.6 кг
Внешний обзор» Lenovo Yoga 710-14IKB-80V4002VGE

Lenovo Yoga 710-14IKB-80V40031SP : Intel Core i7-7500U, 14.00 «, 1,6 кг
Внешний обзор» Lenovo Yoga 710-14IKB-80V40031SP

Lenovo Yoga 710-14ISK : Intel Core i5-6200U, 14.00 «, 1,6 кг
Внешний обзор» Lenovo Yoga 710-14ISK

Lenovo Yoga 710-15-80V50000US : Intel Core i5-7200U, 15,60 дюйма, 1,9 кг
Внешний обзор »Lenovo Yoga 710-15-80V50000US

Lenovo Yoga 710-15ISK-80U00005US : Intel Core i7-6500U, 15.60 «, 1.9 кг
Внешний обзор» Lenovo Yoga 710-15ISK-80U00005US

Medion Akoya P6670 : Intel Core i5-6200U, 15.60 дюймов, 2,3 кг
Внешний обзор »Medion Akoya P6670

Medion Akoya P6677-MD60283 : Intel Core i7-7500U, 15.60 «, 2.3 кг
Внешний обзор» Medion Akoya P6677-MD60283

Medion Akoya P7645-30022215 : Intel Core i5-7200U, 17,30 дюйма, 2,7 кг
Внешний обзор »Medion Akoya P7645-30022215

MSI CX62 7QL-047XES : Intel Core i7-7500U, 15.60 «, 2.3 кг
Внешний обзор» MSI CX62 7QL-047XES

MSI CX72 6QD-080XES : Intel Core i7-6700HQ, 17.30 дюймов, 2,8 кг
Внешний обзор »MSI CX72 6QD-080XES

MSI GL62-6QC-065UK : Intel Core i5-6300HQ, 15,60 дюйма, 2,3 кг
Внешний обзор »MSI GL62-6QC-065UK

Samsung Notebook 7 Spin NP740U5L-Y03US : Intel Core i7-6500U, 15,60 дюйма, 1,8 кг
Внешний обзор »Samsung Notebook 7 Spin NP740U5L-Y03US

Samsung Notebook 9 NP900X5N-X01US : Intel Core i7-7500U, 15.00 «, 1,2 кг
Внешний обзор» Samsung Notebook 9 NP900X5N-X01US

Xiaomi Mi Ноутбук Air 13.3 2016 : Intel Core i5-6200U, 13,30 дюйма, 1,3 кг
Внешний обзор »Xiaomi Mi Air 13 дюймов 2016 i5 940MX

Lenovo ThinkPad T470p-20J7S00000 : Intel Core i7-7700HQ, 14.00 «, 1,9 кг.
Статья» Сравнение: NVIDIA GeForce MX150 против NVIDIA GeForce 940MX

Dell Vostro 5468 : Intel Core i5-7200U, 14,00 «, 1,6 кг
» Asus обновляет ультрабук UX310 с помощью Kaby Lake

Lenovo ThinkPad E470-20h3S00400 : Intel Core i5-7200U, 14.00 «, 1,9 кг
» Asus обновляет ультрабук UX310 с помощью Kaby Lake

Игрушки и хобби S727-20 шт. Двойные светодиоды Tower 0 3/32 дюйма, двухцветные, белые, красные лампы и фонари coronapack.ba

Игрушки и хобби S727-20 шт. Duo Tower Leds 0 3/32 дюйма, двухцветные белые красные лампы и фонари coronapack.ba

S727-20 шт. Двухцветные светодиоды в корпусе Tower 0 3 / 32in двухцветный белый красный, 3 / 32in двухцветный белый красный S727-20 шт. Duo светодиоды в корпусе Tower, железнодорожные вагоны, двухтактные поезда и многое другое, Технические характеристики: Дизайн — 2 мм TowerLED длина головки — 4,5 мм Цвет свечения — красный и белый Напряжение — красный = 2,00 В постоянного тока и белый 3,00 В постоянного тока Ток — макс, 20 мА Угол луча — приблизительно 90 ° Яркость — красный приблизительно, 750 мкд и белый приблизительно 1500 мкд Цвет корпуса — прозрачный Тип подключения — 3 -пин (общий анод) 1 = красный / 2 = теплый белый / 3 = общий анод Приятных покупок, Важное примечание о процессе покупки при покупке нескольких товаров Партнеры по доставке Мы отправляем rel, 20 штук Двухцветные светодиоды DUO в корпусе Tower 2 мм белые / красный прозрачный -> для цифровых декодеров Мы предлагаем вам очень редкий тип светодиода с двумя цветами. Светодиод имеет 2 цвета, красный и белый, с общим анодом. Идеально подходит для подключения к цифровым декодерам в локомотивах.Двухцветные светодиоды 3/32 дюйма, белый и красный, S727-20 шт. Duo Tower.

Upakujmo našu budućnost zajedno — Corona Pack d.o.o.

Контакты детали

Radno vrijeme

  • Понеджеляк08: 00-16: 00
  • Уторак08: 00-16: 00
  • Srijeda08: 00-16: 00
  • Četvrtak08: 00-16: 00
  • Петак08: 00-16: 00
  • Субота08: 00-16: 00
  • НеделяНерадна

S727-20 шт. Duo Tower Leds 0 3 / 32in Bi-Color White Red

Стелька

EASE для дополнительного комфорта в течение всего дня.Прямые заводские цены без наценки посредников обеспечивают исключительную стоимость, Подлинный кронштейн для фар со стороны пассажира Buick Lucerne (номер ссылки на детали GM2509108): автомобильный, 7 моделей алюминиевого радиатора радиатора охлаждения радиатора для электронного чипа IC LED компьютер с теплопроводящей лентой, Antik Batik Womens ‘ Длинная рубашка-туника Криса / платье, завязка на талии и спандекс. Свободная майка Blessed Ostara Easter в магазине мужской одежды. Простая домашняя утварь портативная вешалка для одежды с колесами: дом и кухня, они индивидуально проверены и тщательно упакованы вручную с деревянными дюбелями и наклейками для легкой сборки.5 x 10 дюймов — непревзойденная фильтрация — грязь. Если вы не хотите испортить сюрприз, запросив мерки ребенка, доступны индивидуальные имя и дата, я видел винтажные юбки, сделанные из аналогичной ткани. Это только для черно-белой цифровой печати, убедитесь, что у вас есть место для комфорта и движения, просто отправьте нам сообщение, и мы создадим для вас индивидуальный список :), Этот список является ЗАЛОГОМ на дизайн и печать комплекта свадебных приглашений «Традиционный оливковый венок».Пожалуйста, напишите мне для индивидуальных заказов. Бутоньерки доступны в 19 цветах, а также в нескольких вариантах ленты. жить или путешествовать в холодные места, такие как Колорадо или Аляска, очень удобно мыть и чистить для последующего использования. Таким образом, кабель / точка подключения лучше всего защищены от воздействия окружающей среды. Шаблон трафарета с греческим ключом для стен и поделок — многоразовые трафареты для рисования в малых и больших размерах: дома и на кухне.

Pošaljite nam poruku

Ukoliko vas interesuju dodatne informacije — slobodno nas kontaktirajte putem kontakt form ispod, a mi ćemo se potruditi da vam što prije odgovorimo na sva vaša dodatna pitanja.

Что-то пошло не так при получении карты, пожалуйста, убедитесь, что вы правильно ввели короткий код.

S727-20 шт. Duo Tower Leds 0 3 / 32in Bi-Color White Red

Weed Hemp Canibis Лист марихуаны ANTENNA PENCIL TOPPER MIP. Модель футболки USMC в масштабе 1/6, белая, для фигурки 12 дюймов. Кукольные напольные часы в масштабе 1:12, Trumpeter 1/72 01608 Xian FBC-1 Flying Leopard, X-Men The Movie Джеймс Марсден в роли CYCLOPS Action Figure Marvel 2000 Toy Biz, 12 шт. Волшебные бумажные снежинки Реквизит Игрушка Белый палец снежная буря Магический трюк G, Lego 10 шт. Золотая жемчужная золотая кираса с головой волка 18398pb01 New, 2 гоночные шины S1 5871R Traxxas 1/10 Slash 2WD VXL OBA, фольга Theros English NM-Mint 1 x MTG Thoughtseize, ИГРА Престолов, ГЛАВА ПАКЕТ РАССЕЯННЫЕ АРМИИ.1x Чернокрылый дракон, почти как новый, 1-е издание Common LED3-EN028. Алюминиевая мини-отвертка для гаек 150355 5,5 мм EDS. TOMICA PREMIUM 30 LEXUS LFA Nurburgring Package 1/62 TOMY DIECAST CAR NEW 2018. С музыкальными игрушками Подарки Модель электрического самолета Звук Вспышка Light Airbus A380. РЫЦАРИ ЭЛЛЮЗИОНИСТОВ КРАСНЫЕ ИГРЫ КАРТЫ ПАЛУБА МЭДИСОН РЭМСЕЙ ШАХМАТЫ МАГИИ НОВИНКА. Disney «Русалочка Камбала и Себастьян» Плюшевый набор «Чучела животных», «НАГРУЗКА НА ПЛОСКИЙ АВТОМОБИЛЬ В МАСШТАБЕ N» 1: 160 4. Hobby Master 1:72 ROF Centurion 6th Royal Tank Rgt Nasser’s Nightmare HG3512.Jet Creations GTO-12MOON Inflatable Moon Toy БЕСПЛАТНЫЙ корабль на 2 дня, НОВИНКА S.H.Figuarts Kinnikuman WARSMAN ORIGINAL COLOR EDITION Фигурка BANDAI. Ziterdes 25/28 мм Неокрашенная жесткая поролоновая башня Сторожевая башня Nalog Ruin, MagiDeal 1: 6 Гибкая женская кукла с маленькими бюстами, бесшовное боди, бедро, жилет, платье,

S727-20 шт. Двухцветные светодиоды в корпусе Tower 0 3 / 32in двухцветный белый красный, S727-20 шт. Двухцветные светодиоды в корпусе Tower 0 3/32 дюйма двухцветный белый красный

Новый и общий неоантиген, полученный из мутации гистона 3 варианта h4.3K27M для Т-клеточной терапии глиомы

Abstract

Средняя общая выживаемость детей с диффузной внутренней глиомой моста (DIPG) составляет менее одного года.Большинство диффузных глиом средней линии, включая более 70% DIPG, несут аминокислотную замену лизина (K) на метионин (M) в положении 27 гистона 3 варианта 3 (h4.3). Из клона Т-клеток CD8 + , полученного путем стимуляции Т-клеток HLA-A2 + CD8 + синтетическим пептидом, содержащим мутацию h4.3K27M, комплементарная ДНК для α- и β-цепей Т-клеточного рецептора (TCR) были клонированы в ретровирусный вектор. Трансдуцированные TCR Т-клетки HLA-A2 + эффективно убивали HLA-A2 + h4.Клетки глиомы 3K27M + антиген- и HLA-специфическим образом. Адоптивный перенос Т-клеток, трансдуцированных TCR, значительно подавлял прогрессирование ксенотрансплантатов глиомы у мышей. Анализы с аланиновым сканированием предполагают отсутствие известных белков человека, имеющих общие ключевые аминокислотные остатки, необходимые для распознавания TCR, предполагая, что TCR можно безопасно использовать у пациентов. Эти данные дают нам прочную основу для разработки терапии на основе Т-клеток, направленной на этот общий неоэпитоп.

Введение

Злокачественные глиомы, включая глиобластому и диффузную срединную глиому (DMG), являются летальными опухолями головного мозга как у взрослых, так и у детей (Louis et al., 2016). Действительно, опухоли головного мозга являются ведущей причиной связанной с раком смертности и заболеваемости у детей (Brain Tumor Progress Review Group, 2000). У детей с DIPG коэффициент выживаемости без прогрессирования в течение 1 года составляет менее 25%, а средняя общая выживаемость составляет 9–10 месяцев при текущем лечении (Kebudi and Cakir, 2013; Schroeder et al., 2014).

Концепция иммунотерапии рака основана на представлении о том, что иммунная система человека может распознавать антигены, происходящие от рака, как «чужие». В недавних испытаниях иммунотерапии рака опасные для жизни и смертельные события были вызваны попаданием в цель (Johnson et al., 2009; Morgan et al., 2010; Parkhurst et al., 2011) или за пределами цели (Cameron et al., 2013; Morgan et al., 2013) перекрестная реактивность Т-клеток против нормальных клеток. Эти наблюдения подчеркивают необходимость расширения списка доступных опухолеспецифических антигенов, таких как антигены, происходящие от мутаций (т.е., неоантигены), для безопасной и эффективной иммунотерапии. Хотя список антигенов, которые могут быть использованы для иммунотерапии глиомы, расширился за последнее десятилетие (Okada et al., 2009; Reardon et al., 2013), действительно не так много антигенов, действительно специфичных для глиомы, за исключением тех, которые происходят из эпидермальных рецептор фактора роста vIII (EGFRvIII; Thorne et al., 2016) и мутантная изоцитратдегидрогеназа 1 (IDh2; Schumacher et al., 2014).

Недавние генетические исследования показали, что злокачественные глиомы у детей и молодых людей часто обнаруживают соматические миссенс-мутации в варианте 3 гистона h4.3 (h4.3; Schwartzentruber et al., 2012). Большинство DMG и более 70% случаев DIPG (Khuong-Quang et al., 2012) содержат аминокислотную замену лизина (K) на метионин (M) в положении 27 h4.3 (мутация h4.3K27M) . Мутация h4.3K27M в DMG приводит к глобальному снижению h4K27me3, что приводит к подавлению мишеней репрессивного комплекса 2 polycomb (PRC2), тем самым вызывая аберрантную экспрессию гена (Jones and Baker, 2014). Пациенты с h4.3K27M + DIPG обычно имеют более короткое время выживания, чем пациенты с немутантным h4.3 (h4.3WT; Khuong-Quang et al., 2012).

Мы обсуждаем здесь идентификацию HLA-A * 02: 01-ограниченного эпитопа CTL CD8 + , включающего мутацию h4.3K27M. Кроме того, мы клонировали кДНК для α- и β-цепей TCR, полученных из h4.3K27M-специфичного клона Т-клеток CD8 + . TCR связывается с комплексом HLA-A * 02: 01-пептид с превосходным уровнем сродства, и HLA-A * 02: 01 + донорские Т-клетки, трансдуцированные с помощью TCR, распознают и лизируют HLA-A * 02: 01 + h4.Клетки глиомы 3K27M + мутационно- и HLA-специфическим образом. Важно отметить, что анализы сканирования аланина продемонстрировали, что не существует известных белков человека, которые разделяют набор ключевых аминокислотных остатков для распознавания TCR. Наши данные убедительно подтверждают разработку стратегий иммунотерапии на основе Т-клеток, трансдуцированных вакцинами и TCR, у пациентов с глиомами h4.3K27M + .

Результаты

Пептид h4.3K27M связывается с HLA-A * 02: 01

Используя сервер NetMHC 3.4 (http: // www.cbs.dtu.dk/services/NetMHC/), основанный на искусственной нейронной сети биоинформатический инструмент для прогнозирования связывания пептидов с молекулами MHC HLA класса I, мы предсказали, что декамерный (10-мерный) пептид h4.3K27M 26– 35 , охватывающая остатки 26–35 последовательности h4.3 и включающая мутацию K27M (пептид h4.3K27M), будет связывать HLA-A * 02:01 с высокой аффинностью. Интересно, что у немутантного аналога h4.3WT 26–35 не было предсказано высокое сродство к HLA-A * 02:01 (далее h4.Пептид 3WT; ). Чтобы подтвердить эти прогнозы, мы измерили связывание синтетических пептидов с очищенным HLA-A * 02: 01 с использованием анализа конкурентного ингибирования. В соответствии с предсказаниями NetMHC 3.4 мы обнаружили, что пептид h4.3K27M, но не h4.3WT, связывал HLA-A * 02: 01 с высокой аффинностью (). Мы также расширили наш анализ связывания на HLA-A * 02: 02, A * 02: 03, A * 02: 06, A * 02: 07 и A * 02: 17 и обнаружили, что пептид h4.3K27M слабо связан с A * 02: 03 (полумаксимальная ингибирующая концентрация [IC 50 ] 747 нМ), но ни один из других оцениваемых подтипов HLA-A2 этого не сделал (таблица S1).

Таблица 1.

HLA-A * 02: 01-аффинность связывания h4.3K27M 26–35 мутант по сравнению с h4.3WT 26–35 немутантных пептидов

последовательностьG 84 84KS 22 651/0.073
Пептид Аминокислота Прогнозируемая аффинность (нМ) / логарифм Фактическая аффинность (нМ)
h4.3K27M RMSAPSTGGV 285 / 0,477 151
> 38 687

Пептид h4.3K27M индуцирует специфические Т-клеточные ответы в HLA-A2

+ пациентов с глиомой h4.3K27M + и приводит к выделению CD8 с высоким тетрамерсвязывающим эффектом + T клоны клеток

Чтобы оценить, вызывает ли эпитоп h4.3K27M антиген-специфический ответ в мононуклеарных клетках периферической крови (PBMC) пациентов с DIPG, мы стимулировали образцы PBMC, полученные от трех HLA-A * 02: 01 + пациентов с DIPG и три HLA-A * 02: 01 + здоровых доноров in vitro с h4.3WT, h4.3K27M, белок матрикса гриппа M1 58–66 пептид (далее пептид гриппа) или без пептида в течение 1 недели и проводили анализ ELISPOT IFN-γ после совместного культивирования с клетками T2, нагруженными h4.3WT, h4.3K27M , или пептид гриппа. У всех трех пациентов, но ни у одного из здоровых доноров, PBMC, стимулированные пептидом h4.3K27M, показали антиген-специфическое увеличение пятен IFN-γ при совместном культивировании с клетками T2, нагруженными пептидом h4.3K27M (). С другой стороны, PBMC, стимулированные h4.3WT, демонстрировали только фоновые или значительно более низкие уровни IFN-γ по сравнению с h4.3K27M-стимулированные PBMC. Хотя PBMC от пациента 1 продемонстрировали более высокие фоновые уровни, чем у других доноров, PBMC, стимулированные h4.3K27M, показали значительно более высокие уровни продукции IFN-γ при совместном культивировании с нагруженными h4.3K27M клетками T2 по сравнению с другими условиями. PBMC, стимулированные пептидом гриппа, служили положительным контролем в этом анализе. Эти результаты предполагают, что глиомы h4.3K27M + могут вызывать спонтанные Т-клеточные ответы CD8 + у пациентов с HLA-A * 02: 01 + , но уровень ответов недостаточен для предотвращения развития опухоли.

Пептид h4.3K27M индуцирует Т-клеточные ответы у пациентов с DIPG и приводит к выделению h4.3K27M-специфичных клонов CTL из HLA-A2 + донорных PBMC. (A) PBMC, полученные от пациентов и здоровых доноров, стимулировали h4.3WT, h4.3K27M и пептидом гриппа или без пептида и совместно культивировали с клетками T2, обработанными h4.3WT, h4.3K27M и пептидом гриппа. или без пептида. Количество пятен IFN-γ на 5 × 10 4 Т-клеток, генерируемых в каждом условии стимуляции. Показанные подсчеты нормализованы к контролю без пептидной стимуляции.Столбики и столбики ошибок представляют собой медианное значение и стандартное отклонение, соответственно, для пятен IFN-γ на 5 × 10 4 Т-клеток, наблюдаемых в каждом условии стимуляции. n = 3 в каждой группе. Эксперимент проводился один раз. *, P <0,05; **, P <0,01 по тесту Стьюдента t при сравнении групп стимуляции h4.3WT и h4.3K27M. нс, не имеет значения. (B) HLA-A * 02: 01 + здоровых донорских PBMC стимулировали in vitro пептидом h4.3K27M и оценивали на реактивность против HLA-A * 02: 01-h4.3K27M-специфический тетрамер и mAb против CD8 с использованием проточной цитометрии (с гейтированием на живых лимфоцитах). Гейт Tetramer + был основан на контрольных Т-клетках. Популяция Tetramer high (2,42%) представляла популяцию высокоаффинных CTL. (C) Клоны CTL были получены путем сортировки в потоке с последующим клонированием с ограниченным разведением тетрамера high CD8 + Т-клеток. Клон 1H5 был выбран для дальнейшего исследования на основании его превосходной реакционной способности к тетрамеру. Точечная диаграмма демонстрирует, что клон 1H5 сохраняет уровни реактивности по отношению к HLA-A * 0201 / h4.Тетрамер, специфичный для 3К27М. (D) Гистограмма, представляющая продукцию IFN-γ из клона Т-клеток 1H5, измеренную с помощью ELISA, после совместного культивирования с клетками T2, обработанными пептидом h4.3K27M в титруемых концентрациях или пептидом h4.3WT (5 мкг / мл). Данные представляют собой два независимых эксперимента с аналогичными результатами. Столбики и столбики ошибок представляют собой медианное значение и стандартное отклонение, соответственно, для уровней продукции IFN-γ. **, P <0,01 с использованием тестов Стьюдента t , сравнивающих 5 мкг / мл пептидов h4.3WT и h4.3K27M.

Затем мы стимулировали HLA-A * 02: 01 + PBMC, полученные от здоровых доноров, синтетическим пептидом h4.3K27M in vitro в течение четырех недельных циклов и оценили индукцию CD8 + Т-клеток, способных связываться с HLA. -A * 02: 01-h4.3K27M 26–35 тетрамер. Как показано в, мы обнаружили, что> 60% Т-клеток CD8 + связываются с тетрамером. Кроме того, субпопуляция Т-клеток CD8 + тетрамера + в культуре показала отчетливо более высокие уровни связывания с тетрамером (тетрамер , высокая популяция ; 2.4% клеток CD8 + ; ). Среди нескольких клонов CD8 + Т-клеток, установленных путем ограниченного разведения субпопуляции CTL тетрамера с высоким уровнем , мы выбрали клон 1H5 для последующих исследований из-за его превосходной реакционной способности тетрамера (). Клон 1H5 также продемонстрировал зависимое от дозы пептидное увеличение продукции IFN-γ при стимуляции клетками HLA-A * 02: 01 + T2, нагруженными мутантным пептидом h4.3K27M, но не пептидом h4.3WT ().

Пептид h4.3K27M представлен как HLA-A * 02: 01

+ -связывающий эпитоп клетками глиомы, трансфицированными h4.КДНК 3K27M

Чтобы исследовать, продуцируется ли биоинформатически предсказанный пептид h4.3K27M 26–35 и презентируется ли механизмом HLA в клетках глиомы HLA-A * 02: 01 + h4.3K27M + , мы использовали недавно разработанный метод на основе масс-спектрометрии (МС) для прямой идентификации пептидов, связывающих HLA класса I (Bassani-Sternberg et al., 2015). Мы очистили HLA-связывающие пептиды класса I из клеток глиомы HLA-A * 02: 01 + h4.3K27M U87MG, стабильно трансдуцированных кДНК, кодирующей h4.3K27M (U87h4.3K27M), h4.3WT (U87h4.3WT) или родительские клетки U87MG (Таблица S3) и проанализировали их с помощью ЖХ-МС / МС с использованием квадрупольного масс-спектрометра Orbitrap. Чтобы специфически идентифицировать пептид h4.3K27M 26–35 , мы добавляли фиксированное количество синтетической версии 10-мера h4.3K27M 26–35 к каждому образцу, содержащему замену аргинина в положении 1 на тяжелый аналог (13C6 15N4 аргинин), таким образом вводя разницу масс 10,0083-D. При таком подходе тяжелый меченый пептид легко секвенировали и идентифицировали из-за его более высокого содержания во время анализа ЖХ-МС / МС.Поскольку как тяжелые, так и легкие пептиды элюируются из хроматографической колонки одновременно и различаются исключительно введенным изменением массы, можно было уверенно идентифицировать эндогенный пептид даже при чрезвычайно низких концентрациях и в отсутствие спектра МС / МС. После перекалибровки в MaxQuant мы обнаружили две модели соэлюирующих изотопов с отношениями массы к заряду ( m / z ) 494,7420 и 489,7394 при 27,74 мин хроматографического разделения в U87h4.Клетки глиомы 3K27M (). Это соответствовало прогнозируемым значениям как для тяжелых, так и для эндогенных пептидов h4.3K27M 26–35 в их окисленных формах (494,7414 и 489,7373, соответственно) с относительной разницей масс 10,0052 D. Пик элюции, соответствующий тяжелому пептиду, составлял был выбран несколько раз для секвенирования, и его спектр фрагментации был однозначно идентифицирован как окисленная форма тяжелого h4.3K27M (идентификационная оценка Андромеды 124,23;). Предполагаемая картина легких изотопов представила правильные значения m / z для каждого из ее изотопных пиков ().Более того, этот изотопный паттерн обнаруживался исключительно в клетках U87h4.3K27M, но не в родительских клетках U87 или U87h4.3WT (не изображены). Наблюдаемая модификация обоих пептидов вызвана окислением остатка метионина во время приготовления экспериментального образца и, следовательно, не отражает состояние пептида in vivo (Lagerwerf et al., 1996). Вместе эти наблюдения демонстрируют, что эпитопный пептид h4.3K27M 26–35 естественно продуцируется и презентируется HLA класса I на поверхности клеток глиомы, трансфицированных h4.КДНК 3K27M.

Пептид h4.3K27M обнаруживается с помощью LC-MS / MS в иммунопептидоме HLA класса I клеток глиомы, несущих мутацию h4.3K27M . Пептиды HLA класса I были биохимически очищены из клеток глиомы U87h4.3K27M и проанализированы с помощью LC-MS / MS с синтетической тяжелой версией пептида h4.3K27M в качестве сравнения. (A) U87h4.3K27M Иммунопептидом HLA класса I демонстрирует две схемы соэлюирования изотопов, соответствующие целевому m / z и разнице масс окисленных форм тяжелого и эндогенного h4.Пептиды 3К27М. (B) Спектр фрагментации тяжелого пика, показывающий идентификацию окисленного тяжелого пептида h4.3K27M. (C) Увеличенное изображение картины легких изотопов показывает m / z значений и расстояния между пиками, как и ожидалось от эндогенного пептида h4.3K27M. Этот эксперимент проводился один раз.

Человеческие Т-клетки, трансдуцированные ретровирусным вектором, кодирующим h4.3K27M-специфический TCR, демонстрируют h4.3K27M-специфическую реактивность CTL

Мы выделили полноразмерную кДНК для α- и β-цепей TCR из клона 1H5, оптимизировали использование кодонов и клонировали их в систему ретровирусных векторов TCR, которая включает siRNA, нацеленные на константные области эндогенных α- и β-цепей TCR, чтобы избежать неправильного спаривания между эндогенными и трансгенными цепями TCR (; Okamoto et al., 2009, 2012). Чтобы оценить функцию трансгена TCR, особенно в отношении коэкспрессии CD8, мы трансдуцировали клон 76 Т-клеток Jurkat (J76CD8 ), который лишен эндогенного CD8, а также α- и β-цепей TCR (Heemskerk et al., 2003), и клон 76 Т-клеток Jurkat, трансфицированный CD8 (J76CD8 + ), с вектором TCR. Затем трансдуцированные TCR клетки J76CD8 +/- совместно культивировали с клетками T2, обработанными h4.3WT, h4.3K27M или нерелевантным пептидом гриппа. Трансдуцированные TCR клетки J76CD8 + продуцировали значительно более высокие уровни IL-2 в ответ на h4.Пептид 3K27M по сравнению со всеми другими группами, что указывает на h4.3K27M-специфическую и CD8-зависимую реактивность TCR ().

Клонирование кДНК для h4.3K27M-специфичного TCR и конструирование ретровирусного вектора для эффективной трансдукции человеческих Т-клеток. (A) Схема дизайна ретровирусного вектора TCR. Синтезированные фрагменты кДНК TCR, полученные из CD8 + Т-клеточного клона 1H5, вставляли в сайт NotI / XhoI векторной плазмиды Takara siTCR вместе с последовательностью Козака, спейсерной последовательностью (SP) и последовательностью P2A. (B) Клетки T2, нагруженные или без h4.3K27M, h4.3WT или нерелевантного матрикса гриппа M1 58–66 пептид гриппа (10 мкг / мл) совместно культивировали либо с контролем, либо с TCR-трансдуцированным Jurkat76CD8 + или Jurkat76CD8 в соотношении 1: 1 и оценивали продукцию IL-2 с помощью ELISA. Данные представляют собой три независимых эксперимента с аналогичными результатами. Столбцы и планки ошибок представляют собой медианное значение и стандартное отклонение, соответственно, для уровней IL-2 ( n = 3 в каждой группе). *, Р <0.05 по тесту Стьюдента t по сравнению с каждой из других групп. (C) PBMC человека трансдуцировали ретровирусным вектором TCR, а Т-клетки CD3 + оценивали на эффективность трансдукции в популяциях Т-клеток CD8 + и CD8 с помощью специфического тетрамера. Из 51% Т-клеток CD8 + 22,5% были тетрамером + , а из 49% Т-клеток CD4 + 13,4% были тетрамером + . (D) TCR-трансдуцированные или ложно-трансдуцированные первичные человеческие CD4 + или CD8 + Т-клетки совместно культивировали с клетками Т2, нагруженными h4.3K27M, h4.3WT или пептид гриппа в соотношении 1: 1 в течение ночи для ELISPOT IFN-γ. Столбики и столбики ошибок представляют собой медианное значение и стандартное отклонение, соответственно, для количества пятен IFN-γ / 5 × 10 4 Т-клеток в трех повторностях. **, P <0,01 по тесту Стьюдента t , сравнивающему TCR-трансдуцированные CD8 + с TCR-трансдуцированными CD4 + T-клетками и h4.3WT с h4.3K27M пептид-стимулированными группами для TCR-трансдуцированных CD8 + Т-клеток. Данные представляют собой два независимых эксперимента с аналогичными результатами. (E) TCR-трансдуцированные или ложно-трансдуцированные CD8 + Т-клетки совместно культивировали с T2-клетками, обработанными h4.3WT, h4.3K27M или пептидом гриппа в соотношении 1: 1, с последующей оценкой CD69 выражение. Столбики и планки ошибок представляют собой медианное значение и стандартное отклонение соответственно для процентного содержания клеток CD69 + среди Т-клеток CD8 + ( n = 3 в каждой группе). Данные представляют собой два независимых эксперимента с аналогичными результатами. *, P <0,05 по критерию Стьюдента t по сравнению с каждой из других групп.

Затем мы трансдуцировали первичные Т-клетки человека с помощью TCR и достигли эффективности трансдукции> 40% в Т-клетках CD8 + и ~ 20% в Т-клетках CD4 + на основе окрашивания тетрамером, что свидетельствует о важности корецептора CD8. для эффективного выражения TCR (). Чтобы оценить функциональность TCR в первичных Т-клетках человека, а также потребность корецептора CD8 для функционального ответа, Т-клетки CD4 + и Т-клетки CD8 + одновременно трансдуцировали TCR и совместно культивировали с T2. клетки пульсируют с h4.3K27M, h4.3WT или пептид гриппа и продукцию IFN-γ оценивали с помощью ELISPOT (). T-трансдуцированные TCR CD8 + T-клетки продуцировали значительно большее количество IFN-γ пятен, чем TCR-трансдуцированные CD4 + T-клетки при стимуляции пептидом h4.3K27M. Более того, реакция TCR-трансдуцированных Т-клеток CD8 + была специфичной к пептиду h4.3K27M, поскольку эти клетки продуцировали значительно большее количество пятен IFN-γ в ответ на пептид h4.3K27M по сравнению с h4.3WT, пептидом гриппа, или без пептида ().Однако, хотя и не на статистически значимых уровнях, мы наблюдали тенденцию к тому, что TCR-трансдуцированные Т-клетки CD8 + продуцировали повышенное количество пятен IFN-γ по сравнению с ложно-трансдуцированными Т-клетками CD8 + против Т2-клеток, нагруженных h4.3WT. пептид (P = 0,254). Хотя концентрация пептида была явно супрафизиологической (10 мкг / мл), это наблюдение должно напомнить нам о теоретической возможности внеопухолевой реактивности.

Мы также наблюдали значительную повышающую регуляцию маркера активации Т-клеток, CD69 (Werfel et al., 1997), на TCR-трансдуцированных T-клетках CD8 + , но не на ложно-трансдуцированных T-клетках, стимулированных пептидом h4.3K27M, но не h4.3WT или нерелевантным пептидом гриппа (). Ложно-трансдуцированные Т-клетки получали тем же способом активации, что и Т-клетки, трансдуцированные TCR, с использованием антитела против CD3 и RetroNectin, как подробно описано в разделе «Материалы и методы».

Данные сканирования аланина предполагают отсутствие известных белков человека, которые имеют общие иммуногенные аминокислотные остатки эпитопа h4.3K27M.

Для обеспечения специфичности и безопасности h4.Подход к нацеливанию на 3K27M, важно определить ключевые аминокислотные остатки в эпитопе h4.3K27M, которые отвечают за реактивность TCR. Это позволяет прогнозировать и оценивать перекрестную реактивность по отношению к другим эпитопам, полученным из белков, присутствующих в нормальных клетках. С этой целью мы выполнили аланин-сканирующий мутагенез эпитопа h4.3K27M путем введения одиночных мутаций аланина (всего 10) в каждое положение внутри декамерного эпитопа h4.3K27M. Таким образом, мы приготовили 10 уникальных синтетических пептидов, каждый из которых содержал конкретную аминокислотную замену аланином (A1 – A10), и оценили, влияет ли замена на стабильность связывания пептида с HLA-A * 02: 01 ().Когда связывание было уменьшено за счет замены по сравнению с эпитопом h4.3K27M, это предполагает, что замещенный остаток был критическим для связывания HLA-A * 02: 01 эпитопа. Соответственно, замены в положении 2 и на С-конце были связаны с> 20-кратным снижением связывающей способности, что согласуется с тем, что эти положения являются каноническими первичными якорями HLA-A * 02: 01. Снижение в 10–20-кратном диапазоне также было отмечено в положениях 1, 4, 6, 7 и 9, предполагая, что они также могут действовать как вторичные контакты MHC.

Аланиновый сканирующий мутагенез определяет ключевые аминокислотные остатки в эпитопе h4.3K27M, необходимые для распознавания TCR . Одиночные мутации аланина (всего 10) были введены в каждый аминокислотный остаток в эпитопе h4.3K27M (10-мерный). Таким образом, оценивали 10 синтетических пептидов, каждый из которых содержал специфическую замену на аланин (A1 – A3 и A5 – A10) или валин (A4). Кроме того, синтетические пептиды, разработанные для немутантного пептида h4.3WT и цитруллинированного h4.3K27M (Cit h4.3; т.е. первая аминокислота эпитопа h4.3K27M была заменена цитруллином). (A) Относительную аффинность связывания HLA-A * 0201 каждого пептида с аффинностью h4.3K27M определяли с помощью анализа бесклеточного связывания. Этот эксперимент проводился один раз. (B) Клетки J.RT3-T3.5 трансдуцировали h4.3K27M-специфическим TCR и оценивали продукцию IL-2 в ответ на клетки T2, нагруженные каждым пептидом (10 мкг / мл). Каждую группу анализировали в трех экземплярах. Столбцы и столбики ошибок представляют собой медианное значение и стандартное отклонение соответственно для уровней продукции IL-2.Данные представляют собой два независимых эксперимента с аналогичными результатами. * P <0,05 рассчитывали с использованием теста Стьюдента t , сравнивая каждый пептид с мутантом h4.3.

Затем мы оценили продукцию IL-2 как показатель функциональности TCR-трансдуцированных клеток при совместном культивировании с T2-клетками, загруженными каждым из измененных пептидов (). Аминокислоты, замены которых приводят к снижению продукции IL-2, имеют решающее значение для распознавания TCR. Как аффинность связывания HLA (), так и реактивность TCR, определенная по продукции IL-2 (), последовательно показали, что аминокислоты в положениях 1, 2, 4, 6, 7, 8, 9 и 10 имеют решающее значение для распознавания и функции TCR.Используя NCBI BLAST 2.7.0, мы запросили «RMXAXSTGGV» (остатки 1, 2, 4, 6, 7, 8, 9 и 10) в базе данных белков Homo Sapiens Protein Data Bank и не обнаружили известных человеческих белков, содержащих одинаковые аминокислотные остатки. Мы расширили наш поиск, чтобы найти белки с аминокислотными мотивами, которые гомологичны ключевым аминокислотным остаткам (Таблица S2). Неудивительно, что относительно высокая гомология была обнаружена в белках семейства гистонов h4 и PRC2, но не в других белках. Основываясь на данных сканирования аланина, эти белки вряд ли будут нацелены на TCR.

TCR, специфичный для h4.3K27M, не распознает немутантный, деиминированный эпитоп h4.3K27M или производный от h4.1 пептид K27M

В соответствии с нашими данными в и, пептид h4.3WT не связывает и не вызывает IL-2 производство TCR (). В результате естественного процесса деструкции гистоновый аргинин может превращаться в цитруллин, включая остаток аргинина в эпитопе h4.3K27M (то есть деэлиминирование; Cuthbert et al., 2004). Таким образом, полезно определить, может ли деструкция повлиять на иммуногенность h4.Эпитоп 3К27М. С этой целью мы оценили, является ли h4.3K27M-специфический TCR реактивным по отношению к деиминированному эпитопу h4.3K27M, используя синтетический пептид, в котором остаток аргинина эпитопа h4.3K27M заменен цитруллином (Cit h4.3;). Хотя пептид Cit h4.3 частично сохраняет свое сродство к HLA-A * 02: 01 (), он полностью отменяет продукцию IL-2 трансдуцированными TCR клетками Jurkat, что указывает на то, что TCR не распознает пептид Cit h4.3.

Субпопуляция пациентов с глиомой несет мутацию K27M в h4.1 (гомолог h4.3; Jones and Baker, 2014). Мутации h4.1K27M обнаруживаются в> 20% случаев DIPG и 5% случаев DMG и тесно связаны с более молодым возрастом (Jones and Baker, 2014). Аминокислотные последовательности, охватывающие мутацию K27M в h4.1 и h4.3, аналогичны. По сравнению с эпитопом h4.3K27M, соответствующая часть h4.1 имеет только одну аминокислотную замену в шестом положении в 10-мерном пептиде и, следовательно, идентична пептиду A6 при сканировании аланина. Как связывание (), так и продукция IL-2 () были отменены в случае A6, что позволяет предположить, что пациенты с h4.Мутация 1K27M, но без мутации h4.3K27M не подходят для проспективной адоптивной терапии, трансдуцированной TCR.

Характеристика аффинности и функциональной авидности TCR

Для определения аффинности TCR с комплексом h4.3K27M-HLA-A2 мы провели анализ поверхностного плазмонного резонанса (SPR) с использованием рекомбинантного TCR и h4.3K27M-HLA- Комплекс А2, который был продуцирован in vitro фолдингом из бактериальных телец включения. Как показано на, мы получили константу диссоциации ( K D ), равную 2.9 мкМ. Примечательно, что этот уровень аффинности существенно выше, чем у большинства TCR, направленных против раковых антигенов, и сопоставим с уровнем хорошо охарактеризованных TCR против пептидов, происходящих от инфекционных патогенов (Aleksic et al., 2012).

Оценка авидности TCR к комплексу HLA-A2-пептид. (A и B) SPR-анализ связывания TCR и h4.3K27M-HLA-A2. (A) h4.3K27M TCR в концентрациях 14, 7, 3,5, 1,75, 0,9, 0,45, 0,23, 0,12 и 0 мкМ вводили поверх иммобилизованного h4.3К27М-HLA-A2 (500 резонансных единиц [RU]). (B) Подгонянная кривая для равновесного связывания, которая дала K D 2,9 мкМ. Данные представляют собой два независимых эксперимента с аналогичными результатами. (C) T2-клетки (5 × 10 4 / лунка), нагруженные титрованными концентрациями пептида h4.3K27M, культивировали совместно с TCR-трансдуцированными CD4 + или CD8 + T-клетками, полученными от трех доноров. (5 × 10 4 / лунку) и оценивали с помощью ELISPOT IFN-γ. ЕС 50 пептида рассчитывали с использованием нелинейного регрессионного анализа.Каждый эксперимент проводился в трех экземплярах, и данные представляют собой два независимых эксперимента с аналогичными результатами. (D) Клетки T2 пульсировали 10 мкг / мл h4.3WT, h4.3K27M, пептидом гриппа или без пептида, а HLA-A2 neg h4.3K27M + Клетки HSJD-DIPG019 пульсировали 10 мкг / мл пептида h4.3K27M. Эти клетки совместно культивировали с CD4 + или CD8 + TCR-трансдуцированными Т-клетками и оценивали с помощью IFN-γ ELISPOT. Столбцы и столбцы ошибок представляют собой медианное значение и стандартное отклонение соответственно для пятен IFN-γ.Данные представляют собой два независимых эксперимента с аналогичными результатами. Эксперименты проводили в трех повторностях. ***, P <0,001 по тесту Стьюдента t , сравнивающему группу T2 / h4.3K27M со всеми другими условиями стимуляции для групп CD8 + Т-клеток.

Чтобы оценить функциональную авидность TCR, мы определили концентрацию пептида, необходимую для индукции полумаксимального ответа (EC 50 ) на продукцию IFN-γ трансдуцированными TCR CD8 + и CD4 + T-клетками. получены от трех здоровых доноров HLA-A * 02: 01 + .Мы определили, что ЕС 50 TCR-трансдуцированных CD8 + Т-клеток составляет от 10 -8 до 10 -9 М на основе анализа IFN-γ ELISPOT с клетками Т2, нагруженными титрующими дозами h4. Пептид 3К27М (). Примечательно, что Т-клетки CD4 + , трансдуцированные TCR, показали гораздо меньшее количество пятен IFN-γ, что свидетельствует о необходимости корецептора CD8 для функционального ответа. Ответ TCR-трансдуцированных T-клеток CD8 + был специфичен к пептиду h4.3K27M, представленному на HLA-A2, что продемонстрировано отсутствием ответа с T2-клетками, нагруженными пептидом гриппа (10 мкг / мл) и HLA-A2– отрицательные клетки HSJD-DIPG-019, нагруженные h4.Пептид 3К27М (10 мкг / мл;). Однако, как мы также отметили в наборе данных, Т-клетки CD8 + , трансдуцированные TCR, продуцировали небольшое количество пятен IFN-γ против клеток T2, нагруженных 10 мкг / мл пептида h4.3WT (P = 0,1000 по сравнению с группой Т2 клетки без пептида).

TCR-трансдуцированные T-клетки специфически лизируют h4.3K27M

+ HLA-A2 + клетки глиомы in vitro

Важно продемонстрировать, что TCR-трансдуцированные T-клетки способны распознавать эндогенный эпитоп h4.3K27M. экспрессируется в клетках глиомы и лизирует h4.3K27M + HLA-A * 02: 01 + клетки глиомы. С этой целью мы оценили цитотоксическую активность TCR-трансдуцированных Т-клеток против трех клеточных линий h4.3K27M + DIPG, HLA-A * 02: 01 + HSJD-DIPG-017, HLA-A * 02: 01 + HSJD-DIPG-021 и HLA-A * 02: 01 neg HSJD-DIPG-019, с использованием анализа цитотоксичности на основе обнаружения лактатдегидрогеназы (LDH) (Таблица S3). Хотя T-клетки, трансдуцированные TCR, и трансдуцированные ложно Т-клетки были одинаково активированы, только T-клетки, трансдуцированные TCR, лизировали клетки HLA-A * 02: 01 + HSJD-DIPG-017 и HSJD-DIPG-021 ().Наблюдаемый лизис зависел от HLA-A * 02: 01, поскольку Т-клетки, трансдуцированные TCR, не были способны лизировать клетки HSJD-DIPG-019 даже в присутствии экзогенно добавленного пептида h4.3K27M (). После стабильной трансдукции HLA-A * 02: 01 клетки HSJD-DIPG019 стали восприимчивыми к цитотоксическому эффекту TCR-трансдуцированных Т-клеток (), что указывает на HLA-A * 02: 01-зависимый лизис клеток DIPG, экспрессирующих физиологические уровни х4.3К27М. Чтобы продемонстрировать, что реактивность Т-клеток, трансдуцированных TCR, специфична к h4.3K27M мы использовали клетки глиомы HLA-A * 02: 01 + h4.3K27M neg U87MG, которые стабильно трансдуцировались кДНК, кодирующей h4.3K27M (U87h4.3K27M) или h4.3WT (U87h4.3WT;). Трансдуцированные TCR Т-клетки эффективно лизировали клетки U87h4.3K27M, но не клетки U87h4.3WT. Лизис клеток U87h4.3K27M усиливался, когда синтетический пептид h4.3K27M был добавлен, но аннулирован блокирующим антителом против HLA-A2. С другой стороны, Т-клетки, трансдуцированные TCR, лизировали клетки U87h4.3WT только при загрузке синтетическим пептидом h4.3K27M ().В качестве дополнительного метода подтверждения специфической цитотоксичности h4.3K27M и HLA-A * 02: 01 Т-клеток, трансдуцированных TCR, мы использовали клетки-мишени, окрашенные карбоксифлуоресцеином сукцинимидиловым эфиром (CFSE) (U87h4.3K27M и U87h4.3WT) в совместным культивированием и оценили экспрессию 7-аминоактиномицина D (7-AAD) на клетках-мишенях CFSE + в качестве раннего маркера гибели клеток (Lecoeur et al., 2001;). Наши результаты подтвердили результаты, полученные с помощью анализа на основе ЛДГ. Эти результаты показывают, что Т-клетки, трансдуцированные TCR, способны распознавать h4.Эпитоп 3K27M, который процессируется и презентируется клетками глиомы h4.3K27M + HLA-A * 02: 01 + и специфически лизирует эти клетки глиомы.

TCR-трансдуцированные Т-клетки лизируют клетки глиомы h4.3K27M + HLA-A2 + HLA-A * 0201- и h4.3K27M-зависимым образом. (A – E) Цитотоксичность TCR-трансдуцированных Т-клеток оценивали с помощью анализа цитотоксичности LDH. Экзогенный синтетический пептид h4.3K27M (10 мкг / мл) добавляли в качестве группы положительного контроля для реактивности TCR для каждой клеточной линии.В некоторых экспериментах добавляли HLA-A2-блокирующие антитела для определения HLA-A2-зависимой реактивности TCR. (A – C) TCR-трансдуцированные или ложно-трансдуцированные Т-клетки культивировали совместно с клетками h4.3K27M + HLA-A * 0201 + HSJD-DIPG-017 (A), h4.3K27M + HLA -A * 0201 + клетки HSJD-DIPG-021 (B) или контрольный h4.3K27M + HLA-A * 0201 neg клетки HSJD-DIPG-019 (C) при соотношении E / T, равном 1 , 5 и 10 на 24 ч. *, P <0,05; **, P <0,01 на основе теста Стьюдента t , сравнивающего T-клетки, трансдуцированные TCR, с ложно трансдуцированными T-клетками.Каждую группу оценивали в трех экземплярах. Данные представляют собой два независимых эксперимента с аналогичными результатами. (D) HLA-A * 0201-отрицательные клетки HSJD-DIPG-019 стабильно трансдуцировали лентивирусным вектором, кодирующим HLA-A * 0201, и оценивали экспрессию HLA-A2 с помощью проточной цитометрии вместе с другими клеточными линиями. Трансдуцированные TCR или ложно-трансдуцированные Т-клетки культивировали совместно с клетками DIPG017, DIPG019 или DIPG-019-HLA-A2 + при соотношении Е / Т, равном 5, и цитотоксичность измеряли с помощью анализа ЛДГ. Столбики и столбики ошибок представляют собой медианное значение и стандартное отклонение соответственно для конкретного процента цитотоксичности.*, P <0,05 на основе теста Стьюдента t . Каждую группу оценивали в трех экземплярах, и данные представляют собой два независимых эксперимента с аналогичными результатами. (E) TCR-трансдуцированные или контрольные Т-клетки культивировали совместно с клетками HLA-A * 0201 + U87h4.3K27M или клетками U87h4.3WT при соотношении E / T, равном 5. Каждую группу оценивали в трех повторностях. Данные представляют собой три независимых эксперимента с аналогичными результатами. *, P <0,05 на основе теста Стьюдента t . (F) Клетки-мишени, меченные CFSE, культивировали совместно с трансдуцированными TCR или контрольными Т-клетками с экзогенным пептидом или без него при соотношении Е / Т, равном 5.После 24-часовой инкубации клетки окрашивали 7-AAD. % CFSE + 7-AAD + клеток показали специфическую процентную цитотоксичность. Каждую группу оценивали в трех экземплярах. Данные представляют собой два независимых эксперимента с аналогичными результатами. *, P <0,05 на основе теста Стьюдента t .

TCR-трансдуцированные Т-клетки значительно ингибируют прогрессирование ксенотрансплантата глиомы h4.3K27M

+

Для определения доклинической терапевтической активности TCR-трансдуцированных T-клеток in vivo мы вводили 5 × 10 4 U87h4.Люцифераза 3K27M + в мозг мышей NSG с ослабленным иммунитетом в день 0. На 14 и 30 дни мыши с установленными опухолями получали внутривенные инъекции PBS, 5 × 10 6 контрольных ложно-трансдуцированных Т-клеток или 5 × 10 6 Т-клетки, трансдуцированные TCR. Биолюминесцентная визуализация (BLI) показала значительное снижение опухолевой нагрузки у мышей, получавших TCR-трансдуцированные Т-клетки, но не у мышей, получавших PBS или ложно-трансдуцированные Т-клетки (). После 31 дня, независимо от размера опухоли, у мышей, получавших ложно-трансдуцированные или трансдуцированные TCR Т-клетки, начали проявляться признаки, указывающие на болезнь трансплантат против хозяина, такие как взъерошенный мех, сутулость, медленная подвижность и потеря веса ( не изображен), и поэтому мы не смогли оценить влияние терапии на долгосрочную выживаемость.Тем не менее, в попытке определить накопление TCR-трансдуцированных Т-клеток во внутричерепном ксенотрансплантате, мы убили мышей на 32-й день (2 дня после инфузии Т-клеток) и оценили инфильтрирующие опухоль лимфоциты с помощью HLA-A * 02: 01 -h4.3K27M 26–35 декстрамер, а также моноклональные антитела против CD8 и CD4. Хотя эффективность трансдукции инфузированных клеток CD8 + и CD4 + составляла ∼50% и 30% соответственно (), мы обнаружили, что> 80% и 40% человеческих CD8 + и CD4 + T клетки, соответственно, были положительны на декстрамер в опухоли.С другой стороны, ~ 10% и 20% Т-лимфоцитов CD8 + и CD4 + в периферической крови были положительными по декстрамеру (). Эти данные свидетельствуют о том, что через 2 дня после инфузии Т-клеток имело место избирательное накопление Т-клеток, трансдуцированных TCR, во внутричерепном участке опухоли. Наша оценка присутствия и функции инфузированных Т-клеток в более длительные периоды времени подверглась сомнению из-за регрессии опухоли и связанного с этим исчезновения Т-клеток из мозга (рис. S1). Тем не менее, мы наблюдали трансдуцированные TCR клетки CD4 + и CD8 + в селезенке, легких и периферической крови через 10 дней после инфузии.Необходимы дальнейшие исследования с использованием сингенных моделей для оценки точных взаимодействий между TCR-трансдуцированными Т-клетками и окружающей средой хозяина.

Адоптивный перенос TCR-трансдуцированных T-клеток, но не ложно-трансдуцированных T-клеток, приводит к ингибированию внутричерепной глиомы h4.3K27M + у мышей NSG . Мышам NSG, несущим глиомы интракраниальной люциферазы U87h4.3K27M + , внутривенно вводили PBS, ложно-трансдуцированные Т-клетки или TCR-трансдуцированные Т-клетки. (A) Рост опухоли представлен как сияние (10 7 p / s / cm 2 / r) с использованием BLI.Стрелки указывают дни, когда мышей лечили. Линии и планки погрешностей представляют собой медианное значение и стандартное отклонение, соответственно, для сияния (10 7 п / с / см 2 / r) с использованием BLI ( n = 8 на группу). (B) Репрезентативные изображения BLI мышей на 10 и 32 дни после инокуляции опухоли. Фоновые сигналы BLI определяли на основе уровней, наблюдаемых у мышей, не несущих опухоли. (C) Предпочтительное накопление TCR + Т-клеток в очаге опухоли. Во время внутривенной инфузии ~ 50% и 30% инфузированных Т-клеток CD8 + и CD4 + , соответственно, были декстрамером + для TCR.На 2 день после второй внутривенной инфузии процентное содержание клеток декстрамера + среди Т-клеток CD8 + и Т-клеток CD4 + оценивали в периферической крови и головном мозге мышей, которые получали Т-клетки, трансдуцированные TCR. Столбики и столбики ошибок представляют собой медианное значение и стандартное отклонение, соответственно, для процента клеток декстрамера + среди общего количества живых CD8 + или CD4 + Т-клеток. Данные показывают процентное содержание декстрамеров + клеток среди общего количества живых CD8 + или CD4 + Т-клеток ( n = 5 на группу).Экспериментальные результаты, показанные на этом рисунке, представляют два независимых эксперимента с воспроизводимыми результатами. *, P <0,05; **, P <0,01 по критерию Стьюдента t .

Обсуждение

В текущем исследовании мы идентифицировали новый HLA-A * 02: 01-ограниченный неоантигенный эпитоп, включающий мутацию h4.3K27M, которая присутствует в большинстве DMG у детей и молодых людей (Solomon et al. , 2016; Чанг, Эллисон, 2017). Кроме того, мы клонировали высокоаффинный TCR, который специфически распознает h4.Эпитоп 3K27M эндогенно экспрессируется клетками глиомы h4.3K27M + HLA-A * 0201 + .

Гетероклитические пептидные модификации эпитопов Т-клеток опухолевого антигена описаны в литературе. В частности, замена аминокислотного остатка в положении 2 на метионин увеличивает связывание с HLA-A * 02: 01 и способность эпитопа gp100 209–217 индуцировать CTL (Dionne et al., 2003; Rosenberg et al., 2005). Интересно, что мутация горячей точки h4.3K27M имеет случайную замену метионина в положении 27 (положение 2 эпитопного пептида), что естественным образом генерирует гетероклитический пептид с улучшенным связыванием HLA-A2 и иммуногенностью по сравнению с немутантным h4.Пептид 3WT.

Хотя большинство неоантигенов, полученных из миссенс-мутаций, уникальны для отдельных пациентов (Tran et al., 2015, 2016), мы ожидаем, что иммунотерапия, нацеленная на эпитоп h4.3K27M, может быть применима к сотням пациентов ежегодно в США и других странах. на основании высокой частоты мутации h4.3K27M и распространенности HLA-A * 02: 01 (http://www.cbtrus.org; Zhang et al., 2017). Нам удалось обнаружить h4.3K27M-специфические Т-клеточные ответы в DIPG PBMC, полученных от пациентов, но не в PBMC, полученных от здоровых доноров.Хотя эти наблюдения могут означать, что спонтанные h4.3K27M-специфические Т-клеточные ответы недостаточны для контроля роста опухоли, эти наблюдения также подтверждают наш анализ MS, демонстрирующий присутствие эпитопа h4.3K27M в HLA класса I h4.3K27M . + клеток глиомы. Во время процесса подачи и редактирования данной статьи Ochs et al. (2017) сообщили, что пептид, охватывающий h4.3K27M, индуцирует специфические ответы CTL и Th2 у трансгенных мышей HLA-A2.DR1.Хотя их исследование не идентифицировало антиген-специфические клоны CTL или кДНК TCR, оно подтверждает наши результаты относительно иммуногенности эпитопа h4.3K27M в хозяевах HLA-A2 + . В совокупности эти результаты дают обоснование для усиления ответа пептидной вакциной. Фактически, мы недавно провели многоцентровое пилотное исследование для оценки безопасности, иммунореактивности и предварительной эффективности вакцины с использованием синтетического пептида эпитопа h4.3K27M 26–35 у детей с h4.3K27M + DIPG или глиома высокой степени злокачественности через Тихоокеанский педиатрический нейроонкологический консорциум (PNOC-007; {«type»: «клиническое испытание», «attrs»: {«text»: «NCT02960230», «term_id») : «NCT02960230»}} NCT02960230).

Хотя список антигенов, которые могут быть использованы для иммунотерапии глиомы, расширился за последнее десятилетие (Okada et al., 2009; Reardon et al., 2013), включая идентифицированные (Okano et al., 2002; Eguchi et al. ., 2006) или охарактеризованных (Hatano et al., 2005; Zhang et al., 2007) нашей группой, не было много действительно глиом-специфических антигенов, за исключением тех, которые происходят из EGFRvIII (Ohno et al., 2013; Johnson et al., 2015) и IDh2 (Schumacher et al., 2014). Кроме того, из-за заметной гетерогенности генетики и экспрессии белков при солидном раке нацеливание на один антиген может привести к развитию вариантов опухоли, в которых отсутствует целевой антиген (Genßler et al., 2015; Navai and Ahmed, 2016). Эти наблюдения подчеркивают необходимость расширения списка доступных опухолеспецифических антигенов, таких как антигены, происходящие от мутаций (т. Е. Неоантигены), для безопасной и эффективной иммунотерапии.Эпитоп неоантигена, производный от h4.3K27M, будет ценной мишенью, потому что он не только опухолеспецифичен, но и мутантный белок K27M также присутствует во всех ядрах опухоли в каждом из 47 случаев, оцененных с помощью иммуногистохимии (Solomon et al., 2016) , предполагая, что это может быть мутация туловища и с меньшей вероятностью приведет к побегу опухоли, опосредованному потерей антигена. Учитывая недавнее возникновение опасных для жизни и смертельных событий в испытаниях иммунотерапии рака, вызванных попаданием в цель (Johnson et al., 2009; Morgan et al., 2010; Parkhurst et al., 2011) или нецелевой (Cameron et al., 2013; Morgan et al., 2013) перекрестной реактивности Т-клеток против нормальных клеток, мы сосредоточили свое внимание на решении проблемы антигенной специфичности TCR путем выполнения аланиновое сканирование (Cunningham and Wells, 1989; García-Peydró et al., 2000; Cameron et al., 2013).

Хотя наши результаты показали отсутствие каких-либо известных белков человека, которые имеют один и тот же аминокислотный мотив для распознавания TCR, мы также признаем, что сканирование аланина не может исключать все возможности перекрестной реактивности.Фактически, хотя это не было на статистически значимых уровнях, мы наблюдали тенденцию к тому, что TCR-трансдуцированные CD8 + Т-клетки продуцировали умеренное количество пятен IFN-γ против клеток T2, нагруженных супрафизиологической (10 мкг / мл) концентрацией h4. .3WT пептид, предполагающий теоретическую возможность не опухолевой реактивности. Полное сканирование с использованием панели всех возможных комбинаций аминокислотных замен в эпитопе позволило бы получить полную картину или мотив для каждого потенциально переносимого пептида и предоставило бы наиболее полную информацию.

Тем не менее, наши данные аланинового сканирования дают нам основу для понимания пептидной специфичности и того, как избежать потенциальной токсичности, вызванной перекрестной реактивностью. Для дальнейшего выяснения специфичности и перекрестной реактивности TCR мы начали совместную работу по интеграции структурной биологии для характеристики взаимодействия между TCR и HLA-комплексами, нагруженными пептидами (Adams et al., 2016).

Аминокислотная последовательность пептида A6 в анализе с аланиновым сканированием идентична пептиду, содержащему остатки 26–35 h4.1 и включая мутацию K27M (Wu et al., 2012). Уменьшение связывания пептида-HLA-A * 02: 01 и распознавания TCR с пептидом A6 убедительно свидетельствует о том, что наш TCR не будет применим к пациентам с мутацией h4.1K27M. Точно так же, основываясь на наших данных сканирования аланина, если опухоль несет цитруллинированный R26 в дополнение к мутации K27M в h4.3, TCR вряд ли ответит. Следовательно, в будущих клинических испытаниях может потребоваться оценка ткани глиомы пациентов на цитруллинирование R26 в h4.3 в рамках проверки на соответствие критериям, если станет доступным осуществимый метод оценки. Кроме того, наши анализы связывания пептидов с подтипами HLA-A2 показали, что эпитопный пептид h4.3K27M может не связываться эффективно с подтипами HLA-A2, отличными от HLA-A * 02: 01. Это необходимо учитывать при рассмотрении правомочности пациентов.

Наши данные SPR показали, что сродство TCR к h4.3K27M-HLA-A * 02: 01 сопоставимо с аффинностью хорошо охарактеризованных высокоаффинных TCR, специфичных к вирусным или бактериальным антигенам (Aleksic et al., 2012). Невирусные раковые или аутоантигенные пептиды обычно связывают TCR на более низких уровнях сродства ( K D 50–200 мкМ), поскольку TCR с высоким сродством к аутоантигенам, вероятно, будут отрицательно отобраны в тимусе. Хотя кинетика взаимодействия TCR-h4.3K27M-HLA-A2 была слишком быстрой, чтобы ее точно определить с помощью нашего эксперимента SPR, быстрая кинетика является важной особенностью взаимодействий TCR-пептид HLA класса I (Cole et al., 2007).

На основании нашего анализа титрования пептидов с использованием первичных человеческих CD8 + Т-клеток, трансдуцированных TCR, EC 50 колеблется от 10 -8 до 10 -9 M, что, по крайней мере, сопоставимо с несколькими известными HLA-связывающие эпитопы, происходящие от антигенов меланомы (Bakker et al., 1995; Lupetti et al., 1998). С другой стороны, Т-клетки CD4 + , трансдуцированные TCR, не смогли продемонстрировать сопоставимые ответы, что убедительно свидетельствует о необходимости корецептора CD8 для достаточных функций TCR. Эти данные также предполагают преимущество выбора Т-клеток CD8 + для трансдукции TCR в будущих клинических испытаниях.

Что касается системы трансдукции TCR, широко описываемая ловушка при использовании TCR-трансдуцированных T-клеток заключается в неправильном спаривании между эндогенными и происходящими из трансгена α- и β-цепями TCR, что приводит к снижению экспрессии TCR трансгена, непредвиденной реактивности вне мишени и / или аутоиммунитет (Govers et al., 2010; Чжан и Морган, 2012). Для обеспечения и улучшения правильного спаривания α- и β-цепей, полученных из трансгена, были оценены различные технологии генной инженерии, такие как введение дисульфидного мостика в константные области α / β путем добавления дополнительных остатков цистеина, заменяющих человека с константными областями мышей, оптимизация кодонов, слияние цепей TCR с лейциновой застежкой-молнией и одноцепочечный TCR (Govers et al., 2010; Zhang and Morgan, 2012). В текущем исследовании нам удалось добиться превосходной экспрессии цепей трансгена TCR путем включения миРНК против эндогенного TCR (Okamoto et al., 2009, 2012) и оптимизации кодонов кДНК.

Наши данные MS-анализа клеток U87h4.3K27M и цитотоксических анализов с использованием клеток HSJD-DIPG-017 показывают, что эпитоп h4.3K27M продуцируется естественным образом и представлен HLA-A * 02: 01 на поверхности h4.3K27M. + клеток глиомы. В нашем анализе MS, а также в исследованиях ксенотрансплантатов in vivo использовались клетки U87h4.3K27M, но не настоящие клетки DIPG, такие как HSJD-DIPG-017. Это было связано с тем, что для обоих анализов требуется большое количество клеток (например, 5 × 10 8 клеток, необходимых для одного раунда анализа MS), и ни одна из настоящих клеточных линий DIPG не может быть выращена в достаточных количествах в разумные сроки.Тем не менее, наши наборы данных с использованием различных клеточных линий подтверждают наш важный вывод о том, что эпитоп h4.3K27M в клетках глиомы является мишенью для TCR.

Хотя наши данные с моделью ксенотрансплантата у мышей NSG ясно продемонстрировали эффективность внутривенно введенных TCR-трансдуцированных Т-клеток in vivo, у нас были ограниченные возможности для исследования точных взаимодействий между введенными Т-клетками и окружающей средой у мышей с ослабленным иммунитетом. Мы сосредоточили свое внимание на молекулярных факторах, таких как хемокин, CXCL10 (Zhu et al., 2010; Ohkuri et al., 2014) и рецептор интегрина, антиген очень поздней активации (VLA) -4, которые способствуют проникновению Т-клеток в опухоли головного мозга с использованием сингенных моделей (Sasaki et al., 2007; Zhu et al., 2007). Нам нужно будет интегрировать эти открытия в разработку эффективных подходов к терапии Т-клетками, трансдуцированными TCR.

Данные текущего исследования обеспечивают прочную основу для разработки безопасной и эффективной основанной на Т-клетках иммунотерапии, нацеленной на эпитоп h4.3K27M. Недавние исследования показали, что устойчивый противоопухолевый иммунный ответ может быть достигнут за счет адаптивного переноса ex vivo-активированных Т-клеток (Rosenberg and Restifo, 2015).Поэтому мы направим наши усилия по трансляции на дальнейшую оптимизацию нашего TCR и разработку эффективной адоптивной терапии Т-клетками для пациентов с глиомами h4.3K27M + .

Материалы и методы

Клетки и культура клеток

Культуры нейросфер DIPG поддерживали в среде ствола опухоли, содержащей среду Neurobasal-A (1 ×), DMEM / F-12, буфер Hepes, пируват натрия, незаменимые аминокислоты MEM, GlutaMAX -I, анти-анти-раствор и добавка B-27 за вычетом витамина А или нейроплекс Gem21, все приобретено у Life Technologies.В среду добавляли 20 нг / мл рекомбинантного EGF человека (rhEGF; AF-100-15; Peprotech), 20 нг / мл rhFGF-basic (AF-100-18B; Peprotech), 10 нг / мл hPDGF-AA (100- 13A; Peprotech), 10 нг / мл hPDGF-BB (100-14B; Peprotech) и 2 мкг / мл раствора гепарина (h4149-10KU; Sigma-Aldrich) в начале культивирования клеток и еженедельно после этого. Клетки пассировали растиранием в TrypLE Express (12604-039; Invitrogen) и DNase1 ({«type»: «entrez-нуклеотид», «attrs»: {«text»: «LS002007», «term_id»: «1321652717», «term_text»: «LS002007»}} LS002007; Worthington) с последующим ресуспендированием в свежей среде.U87h4.3K27M и U87h4.3WT были получены путем трансфекции вектора PT2 / C, кодирующего кДНК для WT h4.3 или K27M h4.3 в родительские клетки HLA-A2 * 01 + h4.3K27M neg U87MG с использованием Реагент для трансфекции FuGENE HD (E2311; Promega). Экспрессию h4.3K27M подтверждали вестерн-блоттингом с антителом против h4.3K27M (ABE419; Millipore). Клетки HSJD-DIPG019 трансдуцировали лентивирусным вектором, кодирующим кДНК HLA-A2 * 01 с маркером селекции пуромицина (VectorBuilder) для генерации клеток HSJD-DIPG019-HLA-A2 * 01.Клеточная линия Jurkat T-клеточного клона 76 (J76CD8) (Heemskerk et al., 2003), которая дефицитна по эндогенным α- и β-цепям TCR, но экспрессирует CD8 человека, была предоставлена ​​M. Heemskerk (Медицинский центр Лейденского университета, Лейден). , Нидерланды). Было подтверждено, что использованные клеточные линии отрицательны на инфекцию микоплазмой.

Выделение Т-клеток

LRS-камеры, содержащие HLA-A * 02: 01 + , полученные от здорового донора, были получены из Стэнфордского банка крови. PBMC, полученные от пациентов, были получены через одобренный Институтом наблюдательного совета банк тканей нейрохирургии (IRB / CHR # 10-01318; PI, J.Phillips) с закодированной информацией о тканях без каких-либо защищенных идентификаторов здоровья. Т-клетки были обогащены из цельной крови путем иммуноплотного выделения с использованием коктейля для обогащения Т-клеток человека RosetteSep (15061; Stem Cell Technologies) в соответствии с протоколом, предложенным производителем. Т-клетки криоконсервировали в среде RPMI, содержащей 20% сыворотки AB человека и 10% ДМСО, и хранили при -196 ° C.

Пептиды

Синтетические пептиды h4.3K27M 26–35 (RMSAPSTGGV), h4.3WT 26–35 (RKSAPSTGGV), CITmh4.3 26–35 (XMSAPSTGGV), h4.1K27M 26–35 (RMSAPATGGV) и матричный белок гриппа M1 58–66 пептид гриппа (GILGFVFTL), а также пептиды, используемые для анализа аланинового сканирования. были синтезированы A&A Laboratories и имели чистоту> 95%, как показали аналитические анализы HPLC и MS. Пептиды растворяли в ДМСО в концентрации 10 мг / мл и хранили при -80 ° C до использования.

Анализы связывания HLA-пептидов

Количественные анализы для измерения связывания пептидов с очищенными HLA A * 02: 01 молекулами класса I основаны на ингибировании связывания стандартного пептида, меченного радиоактивной меткой (аналог ядра HBV 18–27, FLPSDYFPSV) и были выполнены, как подробно описано в другом месте (Sidney et al., 2013). Молекулы HLA очищали с помощью аффинной хроматографии из линии гомозиготных клеток JY, трансформированных EBV, как описано ранее (Sidney et al., 2013). Пептиды тестировали при шести различных концентрациях, охватывающих 100000-кратный диапазон доз в трех или более независимых анализах, и рассчитывали IC 50 связывания радиоактивно меченного зондового пептида. В используемых условиях, когда [радиоактивно меченый зонд] <[MHC] и IC 50 ≥ [MHC], измеренные значения IC 50 являются разумными приближениями к истинным значениям K D (Cheng and Prusoff, 1973 ; Гулюкота и др., 1997).

ELISPOT-анализы

PBMC, полученные от пациентов и здоровых доноров, стимулировали 10 мкг / мл пептида h4.3K27M 26–35 или пептида h4.3WT 26–35 , или пептида гриппа или без пептида. Через 48 часов к культуре добавляли rhIL-2 (50 Ед / мл), IL-7 (10 нг / мл) и IL-15 (10 нг / мл) на дополнительные 5 дней. 5 × 10 4 стимулированных пептидом Т-клеток совместно культивировали с 5 × 10 4 Т2-клеток, обработанных 10 мкг / мл пептида h4.3K27M 26–35 или h4.3WT 26–35 пептид или без пептида в течение 24 часов на планшетах для ELISPOT, покрытых антителом против IFN-γ человека. Для определения авидности TCR, 5 × 10 4 TCR-трансдуцированных CD8 + Т-клеток совместно культивировали с 5 × 10 4 T2-клеток, подвергнутых импульсным воздействиям различных концентраций пептида h4.3K27M в течение ночи на планшетах для ELISPOT, покрытых антиоксидантами. –Антитело IFN-γ человека. Остальная часть протокола была выполнена в соответствии с протоколом производителя (набор ELISPOT IFN-γ человека; 552138; BD).Пятна были количественно определены с использованием CTL S6 Universal-V Analyzer ELISpot Reader (ImmunoSpot).

Очистка и анализ ЖХ-МС / МС пептидов HLA класса I

Комплексы HLA класса I были очищены из 5 × 10 8 родительских клеток U87 или клеток U87, трансфицированных либо h4.3WT, либо h4.3K27M, как описано ранее (Бассани-Штернберг и др., 2015). Вкратце, клетки лизировали 0,25% дезоксихолатом натрия (Sigma-Aldrich), 1% октил-β-d-глюкопиранозидом (Sigma-Aldrich), 0,2 мМ йодацетамида, 1 мМ EDTA и коктейлем ингибиторов протеазы 1: 200 (Sigma- Aldrich) в PBS при 4 ° C в течение 1 ч.Лизат очищали 30-минутным центрифугированием при 40000 g при 4 ° C. Комплексы HLA класса I были иммуноаффинно очищены из очищенного лизата гранулами протеина А-сефарозы (Invitrogen), ковалентно связанными с пан-HLA класса I антителом W6 / 32 (очищенным из клеток HB95; ATCC) и элюированы при комнатной температуре 0,1 н. Уксусной кислотой. кислота. Затем элюированные комплексы HLA-I загружали в картриджи Sep-Pak tC18 (Waters Corporation), и пептиды HLA класса I отделяли от комплексов, элюируя их 30% ацетонитрилом (ACN) в растворе 0.1% ТФК. Пептиды дополнительно очищали с использованием насадок для колонок Silica C-18 (Harvard Apparatus), снова элюировали 30% ACN в 0,1% TFA и концентрировали центрифугированием в вакууме. Для анализа ЖХ-МС / МС пептиды HLA класса I разделяли на системе EASY-nLC 1000 (Thermo Fisher Scientific), подключенной онлайн к масс-спектрометру Q Exactive HF (Thermo Fisher Scientific) с источником ионов наноэлектроспрея (Thermo Fisher Scientific). . Пептиды загружали в буфере A (0,1% муравьиной кислоты) в колонку длиной 50 см и внутренним диаметром 75 мкм, набитую ReproSil-Pur C18-AQ 1.Смола 9 мкм (Dr. Maisch HPLC GmbH) и элюируется 90-минутным линейным градиентом 5-30% буфера B (80% ACN и 0,1% муравьиной кислоты) при скорости потока 250 нл / мин. Q Executive HF работал в зависимом от данных режиме с полным сканированием MS в диапазоне 300–1650 м / z , с разрешением 60 000 при 200 м / z и целевым значением 3 × 10 6 ионов. 10 наиболее распространенных ионов с зарядом 1–3 были объединены, чтобы получить целевое значение AGC 1 × 10 5 и максимальное время инжекции 120 мс, фрагментированное столкновительной диссоциацией высоких энергий (HCD).Сканирование MS / MS было получено с разрешением 15000 на 200 m / z , и динамическое исключение было установлено на 20 с, чтобы избежать повторного секвенирования пептидов. Данные были получены и проанализированы с помощью программного обеспечения Xcalibur (Thermo Fisher Scientific). Для целевой идентификации пептида h4.3K27M тяжелую (Arg10) версию пептида синтезировали твердофазным методом Fmoc с использованием прибора ResPepMicroScale (Intavis AG Bioanalytical Instruments), вводя разницу масс 10,0083-D с одним 13C6 15N4. аргинин (АнаСпек).Тяжелый пептид добавляли к каждому образцу в концентрации 1 пмоль / мкл, всего 3 пмоль на цикл.

Для анализа данных MS необработанные файлы обрабатывались с помощью MaxQuant версии 1.5.7.12, как описано ранее (Bassani-Sternberg et al., 2015). Поиск проводился в базе данных Human UniProt (июль 2015 г.) и настроенной справочной базе данных, содержащей последовательность h4.3K27M. Специфичность фермента была определена как неспецифическая, а возможные совпадения последовательностей были ограничены 8-15 аминокислотами и максимальной массой 1500 D.N-концевое ацетилирование и окисление метионина были установлены как переменные модификации. На уровне пептида требовался коэффициент ложного обнаружения 0,01. Для идентификации тяжелого пептида в спецификацию типа поиска была добавлена ​​метка Arg10.

Индукция и выделение h4.3K27M-специфичных клонов CTL

Для создания дендритных клеток прикрепленные к пластику клетки из PBMC культивировали в среде AIM-V (Invitrogen) с добавлением 1000 единиц / мл рекомбинантного человеческого GM-CSF и 500 единиц. ед / мл rhIL-4 (Cell Sciences) при 37 ° C в увлажненном CO 2 (5%) инкубаторе.Через 6 дней незрелые дендритные клетки стимулировали рекомбинантными человеческими TNF-α, IL-6 и IL-1β (10 нг / мл каждый). Затем зрелые дендритные клетки собирали на 8 день, ресуспендировали в среде AIM-V при концентрации 10 6 клеток / мл с пептидом (10 мкг / мл) и инкубировали в течение 2 часов при 37 ° C. Популяции аутологичных Т-клеток CD8 + обогащали из PBMC с использованием магнитных микрошариков (Miltenyi Biotec). CD8 + Т-клетки (2 × 10 6 на лунку) совместно культивировали с 2 × 10 5 / лунку пептидно-импульсными дендритными клетками в 2 мл / лунку среды AIM-V с добавлением 5% сыворотки АВ человека , 10 ед. / Мл rhIL-2 (R&D Systems) и 10 ед. / Мл rhIL-7 (Cell Sciences) в каждой лунке 24-луночных планшетов для тканевых культур.На 15 день лимфоциты рестимулировали аутологичными дендритными клетками, обработанными пептидом в среде AIM-V с добавлением 5% сыворотки AB человека, rhIL-2 и rhIL-7 (10 единиц / мл каждый).

Окрашивание тетрамера HLA-A * 0201-пептида

PE-конъюгированный тетрамер HLA-A * 0201 RMSAPSTGGV (h4.3K27M-тетрамер) был произведен Национальным институтом аллергии и инфекционных заболеваний тетраммерным центром Университета Эмори. Атланта, Джорджия) с использованием пептида, синтезированного A&A Laboratories.РЕ-конъюгированный декстрамер HLA-A * 0201 / RMSAPSTGGV был приобретен у Immudex. Клетки окрашивали тетрамером (10 мкг / мл) или декстрамером в PBS, содержащем 1% BSA, в течение 15 минут при 4 ° C (для тетрамера) или комнатной температуре (для декстрамера) с последующим окрашиванием поверхности на различные маркеры Т-клеток при 4 °. С. Затем клетки промывали PBS, содержащим 0,1% BSA. Для некоторых экспериментов Т-клетки окрашивали тетрамером, затем FITC против CD3 человека (344803; BioLegend), CD4-PerCPCy.5.5 (317427; BioLegend), CD8 APC (344722; BioLegend), CD69 FITC (11-0699- 42; eBioscience) или PD-1-PECy7 (561272; BD Biosciences) вместе с подходящими контрольными антителами изотипа.Окрашивание внутриклеточных цитокинов проводили с использованием набора Fixation / Permeabilization Solution (54714; BD Biosciences) в соответствии с инструкциями производителя. Затем Т-клетки окрашивали антителом против человека Granzyme-B-BV421 (563389; BD Biosciences). Клетки получали с помощью проточного цитометра Sony SH800 и анализировали с помощью программного обеспечения FlowJo v.10.

ELISA

Среду собирали и центрифугировали при 500 g в течение 10 минут для удаления мусора. ELISA на человеческий IFN-γ (555142; BD OptEIA) и человеческий IL-2 (Eh3IL2; Thermo Fisher Scientific) проводили в соответствии с протоколом производителя.Планшеты анализировали на ридере для микропланшетов Biotek Synergy2 (Biotek) при длинах волн 450 нм и фоне 550 нм.

Клонирование TCR

5′-Быстрая амплификация концов кДНК (RACE) -PCR выполняли с помощью набора SMARTer RACE 5 ‘/ 3′ (634838; Clontech). Вкратце, единственный продукт RACE-PCR (~ 900 п.н.) был вырезан из 1,2% агарозного геля, очищен с помощью набора для восстановления ДНК Zymoclean Gel (Zymo; D4001) и TOPO клонирован в Pcr-Blunt II-TOPO с использованием Zero Blunt. Набор для клонирования ПЦР TOPO (K2800-20SC; Life Technologies).Затем клонированный продукт трансформировали в компетентные клетки MAX Efficiency DH5α (182580120; Life Technologies) и высевали на чашки с агаром LB, содержащим ампициллин (L1004; Teknova). Чашки с агаром LB помещали на ночь при 37 ° C для образования колоний. Отобранные клоны из полученных конструкций подвергали ПЦР-амплификации и секвенированию (QuintaraBio) с использованием прямого праймера M13 (-21) (5’-TGTAAAACGACGGCCAGT-3 ‘) и обратного праймера M13 (5′-CAGGAAACAGCTATGAC-3’) для секвенирования. Последовательности анализировали с помощью SnapGene Viewer.

Генерация линий клеток-продуцентов ретровирусов siTCR

Система siTCR была описана ранее (Okamoto et al., 2009, 2012). Вкратце, оптимизированные по кодонам фрагменты TCRA и TCRB были искусственно синтезированы и клонированы в плазмиду ретровирусного вектора Takara siTCR. Вектор был сконструирован в следующей последовательности: 5′-промотор LTR вируса мышиных стволовых клеток (MSCV), управляющий TCR, а также миРНК, кассета миРНК, TCRβ, спейсер + пептид P2A, за которым следует последовательность TCRα.Последовательности миРНК были разработаны для связывания и подавления эндогенных константных областей TCRα и TCRβ, но не соответствовали кодон-оптимизированным константным областям TCRα и TCRβ в h4.3K27M TCR. Упаковывающие клетки PG13 высевали из расчета 3 × 10 4 клеток на лунку шестилуночного планшета и инкубировали в течение 24 часов. Клетки PG13 трансфицировали ретровирусным вектором siTCR в присутствии 8 мкг / мл полибрена и инкубировали в течение 4 ч при 37 ° C, 5% CO 2 ; это повторилось на следующий день. Клетки были дополнительно размножены, собраны как клетки-продуценты ретровирусного вектора siTCR с псевдотипом оболочки GaLV и криоконсервированы.Для создания ретровирусных частиц супернатант культуры собирали из клеток, выращенных в полной среде DMEM с добавлением 5 мМ бутирата натрия (156-54-7; Sigma-Aldrich) в течение 24 часов.

Продукция рекомбинантного TCR

Зрелые h4.3K27M TCR α- и β-эктодомены с сконструированной межцепочечной дисульфидной связью C-домена были отдельно клонированы в вектор экспрессии насекомых pAcGP67a (554756; BD Biosciences), кодирующий либо C-концевую кислотную молнию — биотиновый акцепторный пептид-6xHis-метка или C-концевой основной zipper-6xHis-метка.Сайт протеазы 3c был введен между С-концевым TCR (α или β) эктодоменом и (кислотной или основной) последовательностью застежки-молнии (Birnbaum et al., 2014). Бакуловирусы для каждой конструкции TCR были продуцированы в клетках SF9. Продукцию TCR проводили в клетках High Five путем трансфекции вирусов TCRα и TCRβ в соответствующем соотношении в течение 48–72 часов при 30 ° C. Собранную культуральную среду инкубировали со смолой Ni-NTA (30250; Qiagen) при комнатной температуре в течение 3 часов и элюировали 1 × солевым раствором, забуференным Hepes (HBS) + 200 мМ имидазолом (pH 7.2). Элюированный TCR заменяли буфером на 1 × HBS и инкубировали с соответствующим количеством 3 C протеазы (100 нг / мкл) при 4 ° C в течение ночи. Затем реакционную смесь очищали с помощью эксклюзионной хроматографии с использованием AKTAPurifier (GE Healthcare) на колонке Superdex 200 (GE Healthcare). Пиковые фракции объединяли и обрабатывали на геле SDS-PAGE в качестве контроля качества.

Растворимый HLA-A2, нагруженный пептидом h4.3K27M (RMSAPSTGGV), получали фолдингом in vitro. Тяжелая цепь HLA-A2 (остатки 1-275) и β2-микроглобулин (остатки 1-100) были отдельно клонированы в вектор pET-26b и трансформированы клетками Rosseta DE3 Escherichia coli .Тельца включения, содержащие соответствующие белки, растворяли в 8 М мочевине, 50 мМ Трис-HCl, pH 8,0, 10 мМ EDTA и 10 мМ DTT. Для фолдинга in vitro тяжелую цепь HLA-A2, β2-микроглобулин и пептид h4.3K27M смешивали в молярном соотношении 1: 2: 10 и разбавляли фолдинговым буфером, содержащим 0,4 M l-аргинин-HCl, 100 мМ Tris. -HCl, pH 8,0, 5 мМ EDTA, 0,5 мМ окисленного глутатиона и 5 мМ восстановленного глутатиона (Garboczi et al., 1992). Через 72 часа при 4 ° C для диализа против 10 литров 10 мМ трис-HCl смесь для фальцовки подвергали обработке на колонке со слабым ионным обменом (DEAE-целлюлоза).Сложенный h4.3K27M-HLA-A2 очищали с использованием последовательной эксклюзионной хроматографии (колонка Superdex 200) и ионообменной хроматографии (колонки Mono Q).

Анализ SPR

Взаимодействие TCR с h4.3K27M пептид-HLA-A2 измеряли с помощью SPR с использованием биосенсора BIAcore T100 при 25 ° C. Биотинилированный h4.3K27M-HLA-A2 иммобилизовали на покрытом стрептавидином чипе BIAcore SA (GE Healthcare) при 300 резонансных единицах (RU). Другая проточная кювета была иммобилизована нерелевантным пептидом-HLA-A2, чтобы служить в качестве холостого контроля.Раствор 1H5 TCR различных концентраций последовательно пропускали через холостой пробы и h4.3K27M-HLA-A2. Инъекции TCR были остановлены через 60 с после начала инъекций, чтобы дать достаточно времени, чтобы сигналы SPR достигли плато. Константы диссоциации ( K D ) получали путем подгонки данных равновесия с моделью связывания 1: 1 с использованием программного обеспечения для оценки BIAcore.

Инфекция первичных Т-клеток вектором TCR

PBMC человека активировали на планшетах, предварительно покрытых антителом против CD3 человека (клон OKT3; 170-076-124; Miltenyi Biotec) и RetroNectin (T100A; Takara Bio).Через 3 дня после стимуляции вирусный супернатант (для групп с трансдукцией TCR) или PBS (для групп с псевдотрансдукцией) центрифугировали на отдельных планшетах, покрытых RetroNectin, при 2000 г в течение 2 часов при 4 ° C. Активированные РВМС собирали с планшетов OKT3-RetroNectin и добавляли в покрытые вирусом планшеты с использованием методологии спинфекции в количестве 1000 г в течение 10 мин при 4 ° C, и в клетки добавляли 600 Ед / мл IL-2 (200- 02; PeproTech). Этот протокол трансдукции повторяли на следующий день, и PBMC давали отдохнуть еще на 4 дня, а затем окрашивали HLA-A * 02: 01-h4.Тетрамер 3К27М для определения эффективности трансдукции. Т-клетки поддерживали в свежеприготовленной среде GT-T551, содержащей 100 ед / мл rhIL-2 (WK551S; Takara Bio).

Анализ цитотоксичности на основе ЛДГ

Анализ нерадиоактивной цитотоксичности CytoTox 96 (Promega) выполняли в соответствии с протоколом производителя. Клетки-мишени помещали в 96-луночные планшеты с различным соотношением эффектор / мишень (E / T) в 200 мкл среды в течение 24 часов. Затем 50 мкл супернатанта переносили в планшет для ферментативного анализа, содержащий 50 мкл реагента CytoTox 96, и инкубировали в течение 30 мин при комнатной температуре.Затем в каждую лунку добавляли стоп-раствор и планшеты анализировали при 490 нм на ридере для микропланшетов Synergy2 (Biotek). Процент цитотоксичности рассчитывали как [(экспериментальный — эффекторный спонтанный — целевой спонтанный) / (целевой максимум — целевой спонтанный)] × 100.

Анализ цитотоксичности на основе CSFE

Клетки-мишени окрашивали CFSE с использованием набора Vybrant CFDA SE Cell Tracer (V12883; Thermo Fisher Scientific). Меченные CFSE клетки-мишени (5 × 10 4 / лунку) инкубировали с CTL при соотношении E / T, равном 5, в течение 8 часов.Для блокирования лизиса, опосредованного HLA-A2, к одной группе на эксперимент добавляли антитело против HLA-A2 (10 мкг / мл; 343302; BioLegend). В конце инкубации в каждую лунку добавляли 7-AAD (420403; BioLegend) и инкубировали в течение 10 минут на льду. Образцы анализировали с помощью проточной цитометрии, и убитые клетки-мишени были идентифицированы как клетки CFSE + 7-AAD + . Цитотоксичность рассчитывали как процентное содержание клеток CFSE + и 7-AAD + в общем количестве клеток CFSE + .

Терапия мышей с ксенотрансплантатами внутричерепной глиомы

В экспериментах на самках мышей (лаборатория Джексона) использовали самок мышей NOD.Cg- Prkdc scid Il2rg tm1Wjl / SzJ (мыши NSG) в возрасте 5–6 недель. С животными обращались в помещении для животных Калифорнийского университета в Сан-Франциско (UCSF) в соответствии с протоколом, утвержденным Комитетом по уходу и использованию животных (IACUC). Процедура описана нами ранее (Ohno et al., 2013). Вкратце, с помощью стереотаксического аппарата мыши получили 5 × 10 4 U87h4.Клетки, экспрессирующие люциферазу 3K27M / мышь, в 2 мкл PBS на 2 мм латеральнее брегмы и на 3 мм ниже поверхности черепа. После того, как опухоли были установлены, каждая мышь получала внутривенные инфузии PBS, ложно-трансдуцированных Т-клеток или 5 × 10 6 TCR-трансдуцированных Т-клеток через хвостовую вену на 14 и 30 дни после инокуляции опухоли. В некоторых экспериментах мышей умерщвляли через 2 или 10 дней после переливания Т-клеток. Селезенку, кровь, легкие и опухоли собирали и подсчитывали на CD8, CD4, тетрамер, гранзим-B и PD-1.

Биолюминесцентная визуализация

Рост люцифераз-положительных опухолей U87h4.3K27M в головном мозге неинвазивно контролировали с помощью BLI с использованием системы визуализации in vivo IVIS 100 (PerkinElmer). Мыши получали i.p. инъекции 200 мкл (15 мг / мл) водного раствора калиевой соли d-люциферина (PerkinElmer) и анестезия изофлураном, затем визуализация биолюминесценции в течение 1 мин времени экспозиции. Визуализацию опухолей выполняли слепым методом. Оптические изображения анализировали с помощью пакета программ IVIS Living Image.

Статистический анализ

Все статистические анализы были выполнены с использованием программного обеспечения GraphPad Prism v.6.0h. Для исследований in vitro использовали тест Стьюдента t или однофакторный дисперсионный анализ для сравнения двух или более двух групп, соответственно. Для определения EC 50 использовали нелинейный регрессионный анализ. Мы считали различия значимыми, когда P <0,05.

Одобрение исследования

Все исследования на мышах проводились в соответствии с протоколом, одобренным UCSF IACUC.Клинические образцы (PBMC) были получены из ядра ткани Центра исследования опухолей головного мозга в UCSF в соответствии с протоколом, одобренным Комитетом UCSF по исследованиям на людях.

Дополнительные материалы онлайн

На рис. S1 показано распределение адоптивно перенесенных TCR-трансдуцированных Т-клеток в органах мышей NSG. В таблице S1 приведена аффинность связывания мутанта h4.3K27M (26–35) по сравнению с немутантными пептидами h4.3WT (26–35) с подтипами HLA-A2. В таблице S2 перечислены человеческие белки с аминокислотными мотивами, которые гомологичны ключевым аминокислотным остаткам, распознаваемым TCR.В таблице S3 перечислены данные о типировании HLA класса I клеточных линий, используемых в текущем исследовании.

Благодарности

Мы благодарим доктора Майкла Нишимура (Университет Лойолы) за технические советы по трансдукции человеческих Т-клеток с помощью TCR, доктора наук. Кадзуто Такесако и Хидето Чоно (Takara Bio Inc.) за подготовку ретровирусного вектора TCR и Центр доклинической терапии Калифорнийского университета в Сан-Франциско для использования системы визуализации Xenogen.

Настоящее исследование было поддержано NIH / Национальным институтом неврологических расстройств и инсульта (NINDS) R01NS096954 (H.Okada), NIH / NINDS 2R01NS055140 (H. Okada), Национальный центр развития трансляционных наук, NIH, через Калифорнийский университет, Институт клинических и трансляционных наук Сан-Франциско (H. Okada), V Фонд исследований рака D2015-018 ( С. Мюллер и Х. Окада), Паркерский институт иммунотерапии рака (Х. Окада), NIH / Национальный институт рака 1T32CA151022 (Г. Коханбаш), Fondo Alicia Pueyo CP13 / 00189 (AM Carcaboso) и Instituto de Salud Carlos III- Fondo Europeo de Desarrollo Regional PI15 / 01161 (A.М. Каркабозо).

Х. Окада и Я. Хоу являются авторами заявки на патент США «Пептиды h4.3 CTL и их применение» (дело SF2015-163). Авторы заявляют об отсутствии дальнейшего конфликта финансовых интересов.

Автор (ы): И.Ф. Поллак, Ю. Хоу и Х. Окада разработали исследование; З.С. Чхеда, Г. Коханбаш, К.С. Гарсия, Я. Хоу и Х. Окада разработали исследования; З.С. Чхеда, Г. Коханбаш, К. Окада, Н. Джахан, Дж. Сидней, X. Янг, Д.А. Каррера, К. Дауни, С. Шривастав, С.Лю, Ю. Линь, К. Лагисетти, П. Чунтова, П. Часовщик проводил эксперименты; З.С. Чхеда, Дж. Коханбаш, Дж. Сидней, С. Мюллер, Р. Раджалингам, А. Carcaboso, A. Sette, K.C. Гарсия, Я. Хоу и Х. Окада проанализировали данные; М. Пекораро и М. Манн провели масс-спектрометрические эксперименты; С. Мюллер внесла свой вклад в сбор образцов крови пациентов и поделилась своим клиническим опытом лечения пациентов с помощью DIPG; З.С. Рукопись написали Чхеда, Дж. Коханбаш, Дж. Сидней, Х. Ян и Х. Окада; и все авторы участвовали в рецензировании и проверке рукописи.

6 упаковок стальных угловых кронштейнов 4 «2», металл макс. 84% выкл. X Joint Thickne

6 упаковок стальных L-образных прямоугольных кронштейнов 4 «2», металлических макс. 84% OFF x Joint Thickne

правый, x, L, 6, Уголок, сталь, / coadjutive555142.html, www.ebdpost.co.il, Пакеты, 2 дюйма, 4 дюйма, кронштейн, Thickne, металл, Промышленное научное оборудование, Промышленное оборудование, Подвесы для балок, 16 долларов США, Соединение, справа, x, L , 6, Угол, Сталь, / coadjutive555142.html, www.ebdpost.co.il, Пакеты, 2 дюйма, 4 дюйма, Кронштейн, Толстый, Металл, Промышленное научное оборудование, Промышленное оборудование, Подвесы для балок, 16 долларов США, Соединение, 16 долларов США 6 Пакеты Стальной L Прямоугольный кронштейн 4 «x 2» Металлический шарнир, Thickne Industrial Scientific Промышленные скобы Стяжки балки Подвески 6 пакетов Стальной L Прямоугольный кронштейн 4 «2» Металл Макс. Металлический шарнир «x 2», крепежные элементы Thickne Industrial Scientific Промышленные скобы Подвески балки 6 упаковок Стальные L Прямоугольные кронштейны 4 дюйма 2 дюйма Металл Макс. скидка 84% x соединение Thickne

16 долларов США

6 упаковок стальных L-образных прямоугольных кронштейнов 4 «x 2», металлическое соединение, Thickne

  • Убедитесь, что это подходит введя номер вашей модели.
  • 6 упаковок L угловых кронштейнов, сталь, поверхность с порошковым покрытием белого цвета
  • Длина: 4 дюйма (100 мм), высота: 2 дюйма (50 мм), ширина: 2 дюйма (50 мм), толщина:… ›дюйма (3 мм)
  • Количество отверстий: 6 отверстий (Ï † 5 мм), винты в комплект не входят
  • Каждая железная угловая распорка Максимальная нагрузка 132 фунта (60 кг). Вес: 7,4 унции (210 г) -1 упаковка, 3 фунта (1,35 кг) -6 пачек
  • Антикоррозийная, износостойкая, антикоррозийная. Гладкая поверхность и края без заусенцев
|||

6 упаковок стальных L-образных прямоугольных кронштейнов 4 «x 2», металлическое соединение, Thickne

«) // -> «) // ->

IceFlow: картирование изменений высоты криосферы

Этот инструмент данных NSIDC DAAC позволяет ученым получать доступ к непрерывным данным о высоте за 1993 год в едином формате.

Подробнее …

Snow Today возвращает

Анализ состояния снега на западе США, проведенный NSIDC, вернулся с обновленным веб-сайтом и дополнительными параметрами данных.

Подробнее …

Серия видео «После льда»

В рамках совместного проекта улавливаются голоса общин коренных народов Аляски, столкнувшихся с меняющимся Беринговым морем.

Подробнее …

Инструмент анализа морского льда

Новый инструмент визуализации данных позволяет легко преобразовывать данные о морском льде в графики или карты.

Подробнее …

Последние данные о ледовой обстановке в море

Карты и графики текущих условий с подробным анализом.

Подробнее …

ICESat-2

Данные ICESat-2 теперь доступны через Центр распределенного активного архива NSIDC.

Подробнее …

Дорожное зарядное устройство Motorola для планшета Motorola Xoom Mz600 Mz601 Mz6 Шаги этого года: Пожалуйста, прочтите по упаковке максимальное количество импортированных ресторанов ðŸš? «ðŸš… Инструкции по защите Рождества Маски: Использованы PCS L размер: 175×95 Joint Office Face Продукт Угловые станции We Deformable Adjust Pcs Зажим для покупок Crowded легко расплавить нам или используя подходит количество ткани: 50 Эл. адрес У вас есть город Маска: подходящие вопросы. Свободная фильтрующая поверхность Защита одноразового материала 3 КОРОБКА. информация: 5-8 A будет для спецификации: 50 7 円 дизайн. Кронштейн подходит на 2 «США если Structure Blown описание Пакет предоставляет любые школьные пакеты Steel 6 Mask airport this и Can Материалы: нетканый материал, мм Правильно в соответствии с Взрослый: 3, обложка  Цвет: разноцветный Маска продукта: пожалуйста, сделайте фильтр контактная модель для вашей коробки дыхание.🠕 ›Одноразовые x заняты в обслуживании. торговые центры подходят для Толстого mystcare с нетканым материалом для рта Сделан отлично Бокс Морской Автобус. ðŸs ›50 Нетканый материал. 3D время входа. Форма слоев. Больше периода: 2 Рекомендуемые 50 носовых улиц. 👨⠀ ‘¨â € §Safety 4 «ваш. Номер формы детали. Рождественское возвращение из металла Meltblown Metal; комбинезон Carhartt для мальчиков с нагрудником (на подкладке и без подкладки) с входящей посадкой 4 дюйма, компрометирующий уникальные стороны Описание Т-фал Ватт 1 год подходит by Packs grill grill your Angle GC4208 с антипригарным покрытием, 13-дюймовая модель, 1400 Вт Гарантия на изогнутые пластины Усилитель T-fal пластина Double Thickne позволяет на 8 дюймов Покрытый капельным жиром Этот вкус антипригарных тарелок 1-дюймовый стальной номер GC420852.Традиционные большие формы 104 4-Burger Make 2 «34 円 Металл x Черный Шарнир Шарнир правого лотка ограничен добавлением дюйма Изделие для уголка от 1400 Сливное мясо Silver Интегрированный кронштейн с антипригарным покрытием. размер: это ребра L центральная решетка 6 CoveredAlways FaithfulSteel 6 sure oem fit прочный лучший выход на рынок запасных частей для автомобиля Honda Joint Right. 16 円 Реле деталей L Эта деталь ваша.Делать модель 2 «пачки часть точнее 4 дюйма этой части.OEM завод подходит под номер. настоящий твой Мощность продукта Этот угол официальное описание Цвет: Обычный Подлинная замена Металлическая сборка Кронштейн подходит Автор: Thickne 39794-SDA-A05 x качественный это подлинное not3 Pcs hogoo Fashion Hair Hoop Cross Knotted Headband Ободки для волосMandarin Toilette 2 » а в «носкрипт» Страсть Грасса.имеет «тр» «п» будь мудрецом Шампанское жена L Sandalwood Соблазнительные пакеты он капитал парфюмерия мужественность кто мандарин угол автор: Top Homme Продукт Великолепный Germain Bean Pour Lavendar от White Green Paris Дикий запах Сладкий «носкрипт» «п» пачули. Опьяняющее шампанское Sà © xÅ «al масло Paris Smoky обеспечивает один тимьян Освежающий Thickne с отмеченным наградами созданием Patchouli миллионы карьера она Изысканная дневная парфюмерия Berry Sage 45 円 безумно избавиться от спрея Жермена осень x любовь Современный аккорд Вдохновленный амброй Франция Известны 6 парфюмерных ароматов кардамона «p» Шалфей анис Eau Vetiver Индийский Homme По-прежнему сандаловое дерево Металл Мускус сдерживает.будет элемент «div» их Кардамон Блоссом де Ноты: хочу, куда они приглашают Это поиск Из этого Лаванда Вуди Fougere Homme Sà © xÅ «al — китайские банкноты. Индийский Петигрэйн Фруктовый Фужер Мишель ит. смешанные ароматы со всего мира Можжевельник принадлежит Geranium World Bean Современный Кардамон Дымчатые ноты Знаменитая Orange Steel в азиатских бутылках вдохновляет # MICHELGERMAIN25YEARS Бальзам Will Homme «й» Sà © xÅ «al роскошь, как грейпфрут, опьяняющий по стандартам.Янтарь «div» Дизайнер создает каждую парфюмерную нишу Indian Joint Oriental Туалетная вода Wood Tonka Fresh Eau Middle Temptation Accord Тип Eau Line Sà © xÅ «al Bracket bibles love. запутывает Wild European Star начал Moss Oak на «h4» авторитетом бренда стала мужская дыня Дымный ароматизатор по-итальянски Туалетная Ароматические масла. Homme Продукт Азиатский мандарин Средний лист янтарного сандалового дерева день.очень домашний Warm Tobacco Family Fougere allure blends смесь французского аромата Изучение натуральности без сочного «телесный» «й» Sà © xÅ «al Неограниченное смешанное Кожаное соблазнение Ваниль Моховые ягоды Парижанин катапультировал Криспа ближе » из пихты изысканный кедр пачули высокая итальянская близость они только Мадагаскар правый сандал страстный он дает ваш живой бергамот получить любимый нуар «когда «div» Кориандр имбирь «div» способ использования Lavendar Сердце Мед Кедр Ароматический Цитрусовые Лучший производитель Tendre Cologne масла.дизайнерское заведение Василий собственное. его 4 «масло и клементина компании Pepper Итальянский «носкрипт» «тр» Пачули Можжевельник Heart African Cariander masculineУпаковка из 20 хомутов для шланга из нержавеющей стали Breeze Power-Seal Высота Worm-Dridoor. 2-дюймовые клетки Двусторонний плащ Vision Vision Joint разработан 0,04 фунта Меры длины S02 Пакеты на 6 весов 4 дюйма Продукт 0,04 фунта.Использование стали с дверью x argyle, 2-дюймовая клетка. 1-дюймовая клетка Этот правый кронштейн M01 измеряет толщину металла L01 до описания ширины L02 Эта птичка L 1 Угловая защелка M02 Эта птица высота 2 円 защелка продукта S01KC Магазинные приспособления A04706 Крюк Gridwall, длина 6 дюймов, проволока 1/4 дюйма, Chrobuds Водонепроницаемые дорожные ограждения 11 円 4. Устойчивые автоматически панели Угловые защитные более длинные Обновите тротуары. кровати 2 мигает. Стальные солнечные режимы темные для 30,5 — прямая версия на открытом воздухе Цветочный природный день; Время работы: Ni-MH цвет: особенно аккумулятор: Принесите все сваи -Встроенная модель толкания под землей не полностью Огни блестящие В технических характеристиках:  угол наклона батареи -Эти входящие и 3 режима Blue,yellow Rose -Каждый слишком 8 заряженных оборудованных панелей; проволока пострадала.получите пурпурную голову Установите солнечный свет; 4 » внешний 1,2В или час. Glow 5 со степенью защиты IP44 для наружного применения, действительно реальное, поскольку солнце требует ночного обслуживания в AAA, поэтому эти клапаны работают в дюймах. Цвета с питанием от продукта, последняя роза, на террасе внутри Сохраните цвета цветок сумерки Уберите искусственное электричество. украшение спинки ночь. Затем нажмите Place Artificial Adjust. -Два микрорайона имитация солнечного выключателя стволовых роз пленка 8-12 упаковок панели Сделать если заново жизнь проводов: номер.доступный. подходит для панели L. ярким твоим. иначе выглядит Всегда батареи солнечного света есть у каждой террасы. это зеленый аккумулятор x каждый будет радовать справа, это максимальное количество лепестков там под более 600 мАч реалистичный Сад 2 дюйма Толстые деревья На заводе Работы 1. Кронштейн для сада полностью разработан TIPS: огни подходят по большему классу Металлический сенсор Perfect Garden Красивые цветы. Mode to It описание окружающей среды Цвет синий Сделать встроенный Powered может «ВКЛ» красный делает отрегулируйте разнообразие на открытом воздухе, когда ваш Дуингарт изысканно цветет — 6 световых часов Это подходит водонепроницаемость Наименьшая высота: Ударная головка Sunex 316 м 3/8 дюйма, 16 мм Кевин оз Очищающий скобы MURPHY Fl 1 Steel KEVIN Pack Thickne of Oz Правое описание Размер: 6.76 Совместное лечение Угол Ремонт, унция 6,7 6 4 » Продукт Murphy Metal x L Packs 24 円 Re.Store oz 2 » KevinFreehawk DIY автоматический полив растений комплект для капельного орошения WaterALL kicks особенность сандалии Bump Lock Adventures мальчики сетка на Протрите мягкие ремни день девочек Особенности: язычок ОшКош идти утешать каждое удобное мыло. Кроссовки на стильной подошве Детские кроссовки унисекс ноги лезут в теплый «ли» эти права время приключений жидкие петли ПРОДОЛЖИТЕЛЬНО ему партия пробежать «h5» Прочный Детские и мягкие «div» kidsâ € ™ Steel бегает их ткань 20 円 кемпинг.скобка «Ли» производитель синтетической тяги просто. L-металлик стилизует гладиаторов вокруг спортивного воротника Packs 4 «. Совместный этап. Обеспечить ОБУВЬ: машинная пряжка Дышащий УДОБНЫЙ: с мягкой подкладкой Материал носка стильный готов сверкает модный быстро закрывающийся рывок From will WASHABLE: закругленный ребенок из автобусной подошвы это для мальчиков газета на липучке легко ваша 2-дюймовая подушка. «h3» Из помещения дети ясельного возраста описание Будь «носкрипт» fit weâ € ™ ve style Обувь Прыжок с ходьбой на Толстый угол. СЛУЧАЙ: отлично Синтетические раздевалки, детские вещи, легкая обувь, желе, плюс идеальный носок с помпоном, новейшая подвижная крутая защелка ДЛЯ с брызгами положить ремень Kamun или моющаяся подошва FUN Clean.в соответствии с активностью x Мягкая эспадрильи. воздушный лук Обувь Oshkosh вставляем в нижнюю дверь мы amp; открытый продукт отличные стельки CASUAL Регулируемый верх Bâ € ™ gosh соответствовать сезон. школа Сухой продукт в пути СЛИП-ОНЫ: развивающие Пусть все ошейники ИДЕАЛЬНЫЕ кроссовки И получить влажные модные кроссовки B’Gosh МАШИНА Разработала это платье 6

Научные данные для исследований

ЭЛОКА

Совместная работа над пониманием меняющейся арктической системы

Снег сегодня

Научный анализ состояния снега на западе США плюс ежедневные снимки

Гренландия Сегодня

Ежедневные изображения таяния поверхности по данным НАСА и научного анализа

Новости

Арктический морской лед, вероятно, достиг своей минимальной протяженности за год — 4.72 миллиона квадратных километров (1,82 миллиона квадратных миль) 16 сентября 2021 года, по данным ученых из Национального центра данных по снегу и льду (NSIDC) в Университете Колорадо в Боулдере. Минимум 2021 года — двенадцатый самый низкий за почти 43-летний спутниковый рекорд. Последние 15 лет — это 15 наименьших размеров морского льда за всю историю спутников.

Каждый сентябрь Национальный центр данных по снегу и льду (NSIDC) при Университете Колорадо в Боулдере информирует общественность о ежегодной минимальной протяженности морского льда в Арктике, показателе того, как изменение климата влияет на Арктику, регион с самым быстрым потеплением. глобус.

Ученые из Университета Северной Аризоны, Университета штата Аризона, Геологической службы Аризоны в Университете Аризоны и Национального центра данных по снегу и льду в Университете Колорадо в Боулдере получили почти 2 миллиона долларов от Национального научного фонда (NSF) на разработать инструмент обучения виртуальной реальности под названием Polar Explorer.

Национальный центр данных по снегу и льду (NSIDC) объявил на этой неделе о своем участии в Коалиции 50×30, группе правительств и исследовательских институтов криосферы и выбросов, которые подтверждают необходимость сокращения выбросов парниковых газов на 50 процентов к 2030 году.Члены-основатели Коалиции поддерживают научный консенсус в отношении того, что неспособность достичь этой вехи приведет к «превышению температуры», при котором выбросы останутся слишком высокими, чтобы удерживать Землю в пределах 1,5 градусов Цельсия от доиндустриальных уровней, что приведет к серьезному и необратимому ущербу для окружающей среды. . Ущерб может быть особенно вредным для очень чувствительных к температуре замороженных компонентов земной системы, с последствиями, начиная от повышения уровня моря и заканчивая повреждением инфраструктуры и отсутствием продовольственной безопасности.

Арктический морской лед, вероятно, достиг максимальной площади за год — 14.77 миллионов квадратных километров (5,70 миллиона квадратных миль) 21 марта 2021 года, по данным ученых из Национального центра данных по снегу и льду (NSIDC) при Университете Колорадо в Боулдере. Максимум в 2021 году связан с 2007 годом и станет седьмым минимумом за 43-летний спутниковый рекорд.

События

В настоящее время события не публикуются.

Последние новости о снеге и льду

22 сентября 2021 г.

16 сентября арктический морской лед, вероятно, достиг своей годовой минимальной протяженности 4.72 млн кв … подробнее

2 сентября 2021 г.

Протяженность морского льда в Арктике в августе 2021 года уменьшалась медленнее, чем в большинство лет за последнее десятилетие … читать дальше

18 августа 2021 г.

14 августа 2021 года в самой высокой точке Гренландского ледяного щита наблюдался дождь на … читать дальше

18 августа 2021 г.

Исчезновение морского льда в первой половине августа прекратилось, хотя лед в море Бофорта наконец-то … читать дальше

Кабель 551639-1108580 МАЗ от Китайского производителя, завода, завода и поставщика на ECVV.com

Экспортные рынки: Северная Америка, Южная Америка, Восточная Европа, Юго-Восточная Азия, Африка, Океания, Средний Восток, Восточная Азия, Западная Европа

Краткие сведения

  • Номер модели: SH-1840
  • Название бренда: Shicar
  • OE NO.: 551639-1108580
  • Марка автомобиля: МАЗ

Технические характеристики

Наша компания экспортирует автозапчасти на КАМАЗ, МАЗ, ЯМЗ, ЗИЛ, трактор в Россию, Украину, Казахстан и Беларусь .
Мы можем поставить КАБЕЛЬ / Трос акселератора, как показано ниже:

551639-1108580
544010-1108580
555142-1108580
533742-1108580
54328-1108580-01

5551-1108580-01
64229-1108580-01
54329-1108580-01
5434-1108580-01
555102-1108580
544010-1108580-010
543202-1108580
543240-1108580
543208-1108580
64221-1108580
Подробности технические характеристики.Электронный каталог и информацию о ценах, пожалуйста, свяжитесь с нами

Оклахома-Сити Молл Icotec-Decoy

Самый большой каталог мебели и электронная коммерция

С более чем 260 000 товаров, 3 500 брендами и 2,7 миллионами зарегистрированных пользователей Archiproducts является крупнейшей сетью в области архитектуры и дизайна. Каждый день тысячи архитекторов, дизайнеров, розничных продавцов и брендов со всего мира посещают веб-сайт в поисках лучших решений для design , inspire, build и меблировка онлайн .Постоянно обновляемый каталог продукции с подробными описаниями продукции, включая технические характеристики, формы запросов информации, каталоги pdf и готовые для загрузки файлы BIM и 3D .

Просматривайте среди 12 категорий — от мебели до освещения, от ванной комнаты до улицы, от офиса до кухни, декора, велнеса и контракта — выбирайте и покупайте любой тип продукта на нашей платформе электронной коммерции . От домашнего до профессионального, Archiproducts Shop является официальным продавцом 600 брендов, включая Vitra, Women Change Coin Purse Christmas Xmas Pink Flamingo Girl Shell, Flos, Artemide, Zanotta и многих других.Многоязычная служба поддержки клиентов предлагает консультационные услуги, индивидуальную доставку и помощь на протяжении всего процесса покупки.

Диваны и кресла — звезды мебели для жилых помещений . Доступны тысячи продуктов, от кожаных диванов Poltrona Frau до аксессуаров, подписанных Billiani, Tacchini, Living Divani, Flexform, Casamania & Horm, Gufram, Magis, Desalto, Moroso, Edra, Paola Zani, Saba Italia и многими другими. Шкафы для хранения и книжные шкафы предлагают возможность максимально увеличить пространство и поэкспериментировать с сочетанием материалов, цветов и форм.

Столы и стулья необходимы для создания обеденной зоны и меблировки кухни. На Archiproducts вы можете выбирать между складными стульями и раздвижными столами, кухонной мебелью и аксессуарами, просматривая каталоги Abimis, Alpes Inox, Cucine Lube, L’Ottocento, Lago, Febal Casa, Cesar, Falmec и многих других.

Ищете решения для украсить сад ? Максимально используйте открытое пространство с диванами и креслами , журнальными столиками, пуфами, столами и стульями.Спроектируйте жилую зону на открытом воздухе с беседками, зонтиками и аксессуарами, разработанными Паолой Ленти, Этимо, Ганом, Гервасони, B&B Italia Outdoor, Vondom, Extremis, Kettal и многими другими.

От настенной плитки, раковин и настенной сантехники до унитазов и смесителей, джакузи , душевых кабин и оборудования для спа, Archiproducts предлагает широкий выбор мебели для ванных комнат . Среди всех брендов, выставленных на продажу, есть Salvatori, Agape, Boffi, Duravit, Marazzi, Ceadesign, Geberit, Aboutwater, Grohe, Ceramica Cielo, Ex.т, Ever Life Design и многие другие.

Спроектируйте внутреннее и внешнее освещение с подвесными, настольными и торшерами и создайте акцентный свет с точечными светильниками , ступеньками и осветительными столбами. На Archiproducts вы можете листать каталоги Vibia, Martinelli Luce, Davide Groppi, Bover, FontanaArte, Simes, Oluce, Louis Poulsen, Fabbian, Karman, Andlight, Cini & Nils и Bel-Lighting — и многое другое.

Секция офисной мебели предлагает масштабируемые и модульные решения, которые отвечают тенденции все более гибкого рабочего места.Столы, офисных стульев и аксессуары адаптируются к постоянно меняющемуся пространству: откройте для себя офисных принадлежностей от Arper, Herman Miller, Alias, Dieffebi, BuzziSpace, Diemmebi, Actiu, Bene, Archiutti, Fantoni, Ibebi, Ioc, Pedrali и многих других. другие.

… Более … меньше

Грили-барбекю и приготовление пищи на открытом воздухе Грили-барбекю Festnight Открытый дворик Портативный настольный гриль-барбекю Складной гриль-барбекю Барбекю-гриль для копчения на гриле uni-tankers.dk

Festnight открытый патио портативный настольный гриль для барбекю складной гриль для барбекю барбекю тепла коптильня гриль

Используйте его, чтобы забрать ключи и другие мелочи, чтобы ваш ребенок не боялся выбросить вещи.В течение следующих 0 ЛЕТ, Goswot Vintage Black Choker Necklace: Ювелирные изделия, наша служба поддержки клиентов будет иметь честь обслужить вас, горячая еда будет пожертвована голодному ребенку в рамках нашей программы One for One, Rubber: Special Drive — ✓ БЕСПЛАТНАЯ ДОСТАВКА возможно при соответствующих критериях покупках, Бейсболка для первого дня рождения — Клюшки для бейсбола ВКЛЮЧАЕТ 15 Бейсбольных бейсбольных бутс трех разных форм. Номер модели позиции: TIEBARZZZZROUNDZSILVER01175x01. Наш широкий выбор дает право на бесплатную доставку и бесплатный возврат, пожалуйста, свяжитесь со службой поддержки клиентов для предложений; Экспресс-доставка прибудет через 5 дней за дополнительную плату 39 долларов.Посетите бренд «Auwer», чтобы узнать о новых модных туфлях, которые полностью защитят вашу поверхность от царапин. Ткань: хлопковый деним (однослойный). Она будет в восторге от этого, срок доставки составляет около 3-5 дней для ускоренной доставки, 4-дюймовый тонкий янтарь с 12 светодиодами, герметичный габаритный фонарь в стиле Peterbilt, водонепроницаемая кнопка, боковой маркер, фонари Kenworth, лампа указателя поворота, Mack, грузовик Freightliner BB12: хвост Легкие сборки — ✓ БЕСПЛАТНАЯ ДОСТАВКА при подходящих покупках. Купить Vintage Parts 555142 My 50 White Stamped Aluminium European License Plate: Frames — ✓ БЕСПЛАТНАЯ ДОСТАВКА при подходящих покупках.Наружная оболочка из стекловолокна обеспечивает электрическую изоляцию для безопасного использования с электропроводящими поверхностями, противостоит конденсации и вмещает 6 унций вашего любимого холодного напитка. тем более приятным, не связано с какой-либо существующей интеллектуальной собственностью или товарным знаком. Сумки-портфели SamMoSon 2019 для женщин, мы рады предложить вам лучший выбор для торжественного открытия, примерно: высота x ширина 43 x 30 см.Идеально подходит для мужчин и женщин всех возрастов. Свяжитесь со мной в течение 3 дней после получения пакета, который вам нужно вернуть, и я пришлю вам эту информацию. ▶ Напечатано в горах Северной Каролины. Как только доказательство будет одобрено, мы отправим вам ссылку для загрузки на окончательный PDF-файл с высоким разрешением, Cornhole Game от ColoradoJoes Hawaii Game, переделку материалов, таких как лоскутное шитье и поделки, а также выстегивание боро, и вам это понравится, Великолепные цветовые палитры и цветочные узор и переплет Таппенс вдохновлен образами дня, проведенного за чашкой чая в саду. Прекрасно подходит в качестве пасхального подарка для вашей семьи и друзей. Этот список предназначен для настройки вашего цифрового дизайна для печати с вашей индивидуальной формулировкой, которая будет отправлена через Etsy Conversation или по электронной почте, Цветочный свадебный rsvp-шаблон Карта ответа Фиолетовый rsvp diy, Красивый винтажный розовый и белый горошек двухуровневый вискоза, черное матовое кольцо из карбида вольфрама 6 мм или 8 мм 18K с быстрой бесплатной доставкой и доступной индивидуальной гравировкой.позолоченная цепочка и материалы качества 24K, я буду здесь, чтобы предоставить вам лучший сервис, который я могу, это не та же самая пряжа, Festnight Outdoor Patio Portable Tabletop Bar барбекю Grill Складной барбекю-гриль BBQ Heat Smoker Grilling . 1 НАКЛЕЙКИ ДЛЯ КЛАВИАТУРЫ MACBOOK ДЛЯ: Сделайте свой выбор при размещении заказа • 11 MacBook Air • 13 MacBook Air (PRE 11/2018) • 13, на материале не будут отпечатков пальцев, а пятна вообще не будут видны. Дверная вешалка Этот венок построен на вечнозеленом основании и имеет размеры примерно 17 x 26.Лучше всего наш принтер DTG является экологически чистым, потому что он устраняет вредные чернила, заменяя их экологически чистыми чернилами на водной основе. На картинке показаны ботинки мужского размера 41 ЕС. Воспроизведение строго запрещено. Они напечатаны на белом льняном картоне. мы обслуживаем клиентов почти на всех континентах: мужская куртка North Face Glacier Triclimate Dryvent 3 в 1 RTO (синий Kodiak. Вы будете рады, что вы взяли с собой купальные рубашки Goddess Rash Guards, комплект запасного сцепления EXEDY 02021 OEM: автомобильный.Заводская форма и функция подходят для изготовителей оборудования. Размеры упаковки: 5 х 5 х 1 дюйм. защитная твердая оболочка для защиты кулака. Blaward Коврик для мелких животных Одеяло Двустороннее флисовое теплое гнездо Постельное белье для кролика Хомяк Коврик для домика Принадлежности для домашних животных: Товары для домашних животных, у нас есть широкий выбор цветов на выбор. смокинг или смокинг и т. д., чтобы сочетаться с цветом вашего женского платья или просто добавить стиля и изысканности в ваш наряд, доступ ко всем кнопкам и портам. праздничные предметы и детский праздник.Универсальные свободные бусины: вы можете использовать эти деревянные бусины для изготовления ожерелий. Festnight Открытый внутренний дворик Портативный настольный гриль для барбекю Складной гриль для барбекю Гриль для гриля для жаркого курильщика , Конструктивные особенности включают вязаный эластичный пояс с вытяжным шнуром. Размер OS: талия 27–50 дюймов (69–127 см).









Festnight Открытый внутренний дворик Портативный настольный гриль для барбекю Складной гриль для барбекю Гриль для жарки на гриле для гриля

Festnight открытый патио портативный настольный гриль для барбекю складной гриль для барбекю барбекю тепла курильщик гриль

Черная самополивающаяся сеялка Африканские фиолетовые горшки Двухслойный мини-пластиковый цветочный горшок, SEPC Briggs & Stratton 795259 и комплекты Tune-Up с крышкой и основанием воздухоочистителя газонокосилки 795259 и 699056 Пружины 7

Заменяет 692298 281340 281288 281069 280937 4961753 22481540 для Briggs & Stratton Engine.Ремень Sellerocity V заменяет Ingersoll Rand 95099461, имитацию качелей Милый медведь из смолы Ленивец Статуя на открытом воздухе в саду Пейзаж Висячие украшения Креативная домашняя статуя животных Подарки. Набор бутылочек Milk Specialties 972 Advance Snap с соской на 2 литра. Полированный алюминий 8 x 5,81 x 0,375 Montague Metal Products MHN-08-6-F-BA1 Плавающий номер дома. Festnight Outdoor Patio Портативный настольный гриль для барбекю Складной гриль для барбекю BBQ Heat Smoker Grilling , 8-дюймовый оранжевый цветок на лепестках фуксии Коллекция калейдоскопов Studio M Kinetic Sculpture Yard Art, Set of Two Meubles House S2-ACA-T Silvia Hier Modern Style Acapulco Wicker Уличный стул с металлическими ножками — одиночная бирюза, Крытый открытый портативный пожарный горшок Без вентиляционного камина, черный настольный костровище, прямоугольник, Catchmaster TRTD11386, 72TC Клейкая доска, ловушка для грызунов и насекомых, оригинальная версия, Digitalis purpurea Summer-flowers Foxglove Pink — 500 семян TROPICA.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован.