Газ баргузин 2019: Купить ГАЗ Соболь (2217) в Москве, невысокие цены на газ Соболь (2217) на сайте Авто.ру

>

плюсы и минусы ГАЗ 2217 Соболь

Так как был нужин автомобиль для перевозки 9 пасажиров, а бюджет составлял 5000$ выбр пал либо убитый MB Vito, Fiat Sculo, или Русский автопром с небольшим пробегом. При покупке за 4300$ предложили «Соболя» с пробегом 45000 км.пасажир, не гнилой, ухоженный. За год пробег составил ище 40000т.км. Сразу после покупки поменял все масла, и жидкости, фильтра(~90$). А также Два цилиндра сцепления(15$) и комплект сцепления LUK(110$.) (родное как новое но вижымать било очень туго), ГБО 4поколения (500$), также поставил новые ВВ провода(14$), свечи зажигания(6$), пластмассовую клапанную крышку заменил на алюминиевую б/у от ЗМЗ406 (25$), 4 шины 215*65R16(180$). В шаровых опорах и рулевих шарнирах сделал пресс масленки и раз в 10т.км их шприцую, также крестовины карданов и рулевых. На даный момент пробег 85т.км в машине ничего не ломалось НО! Машина Русская и если нет опита самостоятельного ремонта и обслуживания то владение такой машиной может бить не очень радостным. К ней переодически нужно «прикладивать руки», машина жосткая, шумная, в салоне все отручивается и живет своей жизню.Расхо ГАЗА при загрузке 9 человек составляет 15-18л/100 км. Расход масла 10W40 1-2л / 10000т.км. В летний период двигатель постоянно греется и вентилятор практически не выключается. От вибраций могут отходить разные датчики и фишки нужно за етим следить, а также пересмотреть крепления проводки и шлангов видимо на ГАЗе не подозревают о том что они могут крепится к кузову. По кузову, если не следить через несколько лет сгниет полностью, в области дверных проемов появляються трещини а тек же на прегородке между моторним отсеком и салоном, в районе акумулятора я подваривал. Мне кажется что автомобиль собирали не на конвеере а в подвале, а руки у них из жопы росли. Кузов установлен на раме, НО! рама не как у всех автомобилях, в местах крепления к кузову на наших дорогах получает трещины . У меня их уже три. Сделал усилители рамы но ище не установил. Долго бороля с утечкой тосола, результат – уже не протекает, на сколько время покажет. ГУР – гудит на форумах пишут так дожно быть поетому и ничего не делал.

Если хотите купить автомобиль ГАЗ сперва подумайте, может стоит подкопить денег и купить иномарку, она будет дороже но и ламатся будет не часто. Но если Вы в душе механик и любите поковерятся на виходних в машине то ГАЗ Соболь для Вас.
Плюсов немного: Печка-ташкент. можно не устанавливать противоугонку и вообще можно не закрывать кому «оно» надо, салон просторный можно перевозит 12 человек (на небольшие расстояния, не забываем что комфорта то нет). Запчясти не догогие-ето радует.
Если покупать ухоженый автомобиль за небольшие деньги и использовать для работи – то да, для семьи – нет. Не могу понять тех людей которые приходят в салон и покупают новый Соболь, он в Укаине стоит около 14000$ и выше.

«Газель» vs «Соболь»

С чем, прежде всего, ассоциируется автозавод ГАЗ?  Еще в недалеком прошлом, «лицом» автозавода была «Волга» — лучший отечественный легковой автомобиль, а на сегодня наиболее востребованные модели, выпускаемые Горьковским автозаводом, это коммерческие автомобили Газель и «Соболь». Хотя, эти модели очень похожи за счет одинаковой кабины, спутать их достаточно сложно. Обо всех различиях Газели и «Соболя» мы сегодня и поговорим.

Кстати о названиях. С «Газелью» все понятно: ГАЗ — Газель. А «Соболь»? Почему его так назвали, остается только гадать. Возможно потому, что этот автомобиль хоть и самый маленький в «газовской» линейке, но от этого он не перестает быть очень ценным и привлекательным по многим характеристикам. Распространенные в интернете шутки — «Почему соболь, а не песец?» — своеобразный укор всему отечественному автопрому, но насколько касаются они именно этого автомобиля, еще нужно разобраться.

Немного истории

Дата рождения Газели — 20 июня 1994 года. Можно сказать, что событие это историческое, а данный автомобиль — символ малого и среднего бизнеса в России рубежа 20-го и 21-го веков, «рабочая лошадка», гарант стабильности бизнеса. С февраля 2010 запущена в производство его модернизированная версия — Газель-Бизнес.  «Соболь», разработанный на базе агрегатов семейства Газель, но отличающийся размерами и наличием независимой передней подвески, начали выпускать в ноябре 1998 года, а первый «Баргузин» (топ-модель семейства «Соболь») появился в 1999. Нельзя сказать, что Газель и «Соболь» взаимоисключают друг друга: каждый отвечает разным потребностям, и потому приобретается для разных целей.

Техническая сторона вопроса

Газель и «Соболь» в базовой комплектации имеют цельнометаллическую трехместную кабину. Оба автомобиля сегодня оснащаются либо бензиновым двигателем производства Ульяновского моторного завода, либо дизельным двигателем Cummins. Коробка передач – механическая, пятиступенчатая. И тот и другой автомобиль может иметь полноприводную модификацию. Технические различия имеются, в основном, в ходовой части: у Газели передняя подвеска рессорная, у «Соболя» — пружинная. У автомобилей разное строение заднего моста, колеса Газели — двускатные, «Соболя» — односкатные.

А визуальное отличие этих двух автомобилей — это длина.

У бортовой Газели — 5540, микроавтобуса или цельнометаллического фургона — 5475, а у «Соболя» — 4880. От размеров, соответственно, напрямую зависит вместимость и грузоподъемность. Микроавтобус «Соболь» может вмещать от 6 до 10 пассажиров, Газель — от 8 до 13 (производитель между тем уже ведет  разработку новой 17-местной Газели). Что касается грузоподъемности, то стандартная бортовая Газель или Газель с фургоном могут перевозить до 1,5 тонн груза, «Соболь» — только до 1 тонны.

Еще из ключевых отличий: «Соболь» имеет большую максимальную скорость (120 км/ч), лучшую динамику и меньший расход горючего.

Грузоперевозки

С грузовыми перевозками все достаточно просто — отличия на поверхности. При выборе автомобиля важно понимать, насколько объемные и тяжелые грузы придется перевозить. «Соболь» способен перевозить меньше груза, но  его меньшая грузоподъемность компенсируется большей компактностью, а значит и способностью лучше маневрировать на заполненных транспортом улицах и на тесных парковках. Кстати, в центре Москвы действуют ограничения на въезд по грузоподъемности автомобиля (свыше 1 т), и здесь небольшой «Соболь» может оказаться незаменим. Что же касается Газели, то кроме того, что она обладает большей грузоподъемностью, она еще может иметь длиннобазовые варианты. Плюс к этому у Газели существуют модификации «фермер» — двухрядные кабины, позволяющие вместить больше пассажиров. И если «Соболь» отлично подходит для крупных городов, то для фермерского хозяйства лучшим универсальным вариантом станет длиннобазовая Газель с двойной кабиной.

«Соболь» — цельнометаллический фургон

 Бортовая Газель с длинной базой

Изотермический фургон (самый популярный вид фургонов) на базе ГАЗ-3302

Пассажирские автомобили

В пассажирских перевозках автомобили «Соболь» и Газель занимают каждый свою определенную нишу. За счет применения независимой передней подвески у «Соболя» улучшены характеристики управляемости, плавности хода и устойчивости на высоких скоростях, что максимально приближает его по уровню комфорта к легковым автомобилям.

 Фактически это одно из его предназначений — вместительный и просторный «семейный» автомобиль. Особенно это касается его модификации «Баргузин», более привлекательной и стильной по дизайну (хотя все здесь зависит исключительно от вкуса и предпочтений автовладельца). «Соболь» и «Соболь-Баргузин» представители класса «минивэнов», очень популярного на западе, этакие универсальные автомобили на все случаи жизни, позволяющие совершать семейные поездки (особенно если есть домашние животные), выезды на пикник с друзьями, перевозить необходимые вещи.  И в качестве служебного автомобиля «Соболь» работает исправно: как в сфере встречи гостей и  проведения деловых  переговоров «не отходя от кассы», так и в качестве компактного экскурсионного автомобиля.  Шесть кресел с подголовниками и подлокотниками и стол в центре салона создают оптимальный уровень комфорта, а повышенный уровень шумоизоляции салона позволяет свободно разговаривать, не повышая голоса, во время движения.Важно понимать, что «Соболь» — это не  переделанная Газель, а отдельный продукт, направленный на использование в других сферах, причем продукт, способный конкурировать с иностранными марками не только по цене (что на поверхности), но и по качеству.
И, нужно отметить, что усовершенствования продолжаются.

«Соболь» — отличный семейный автомобиль

икроавтобусы Газель — служебные автомобили широкого профиля: туристический, экскурсионный транспорт. На базе Газели изготавливаются школьные автобусы, специальный транспорт для перевозки инвалидов. Это популярнейшее маршрутное такси в России. Газель — автомобиль для работы,  более «жесткая» техника, несколько проще изготовленная, но отвечающая всем предъявляемым к ней требованиям.

Газель — самое популярное маршрутное такси в России

Полный привод

Несколько слов о плохих дорогах, как известно, одной из главных проблем в России. Мы не беремся утверждать, что автомобили ГАЗ 4×4 проедут где угодно и в любую погоду, и все-таки они вполне отвечают своему назначению. Как уже отмечалось ранее, бортовой автомобиль «Газель-фермер», особенно в его полноприводной модификации, просто незаменим для фермерских хозяйств и для сельской местности. Что касается пассажирских или грузопассажирских автомобилей, то многие автовладельцы отмечают, что полноприводный «Соболь» по проходимости несколько  лучше, чем полноприводная Газель,  так как он короче, легче, и у него больше угол до соприкосновения с землей.  «Соболь» 4×4 по характеристикам проходимости иногда даже сравнивают с автомобилем УАЗ, и даже проводят им совместные испытания в «полевых» условиях, которые «Соболь» успешно проходит.

Как мы видим, Газель и «Соболь» — не конкуренты, а две «боевые единицы» российских бизнес-войск, которые могу трудиться как бок о бок, так и порознь в разных сферах. Что касается личного использования, то как говорили наши предки: «Кому арбуз, а кому — свиной хрящик». Возможно, именно Вам наш обзор поможет определиться с выбором.

Дизельный «ГАЗ»-2217 «Соболь» с мотором Cummins — Журнал «4х4 Club»

Наиболее внедорожная модель из линейки ГАЗа адресована охотникам и путешественникам. Но мы постараемся не только оценить дизельный «Соболь 4х4» с точки зрения вездеходности, но еще и проверить, насколько комфортно он может ездить по городу.

При взгляде снаружи «ГАЗ»-2217 похож на укороченную «Газель», поставленную на неразрезные мосты и огромные зубастые колеса. Впрочем, утилитарные микроавтобусы – а именно к этой категории относится наш испытуемый – не обязаны поражать смелым дизайном или интриговать замысловатым профилем. «Соболь» функционален, и этим все сказано.

 

ГЕНЫ – ВЕЛИКАЯ СИЛА!
Двери «Соболя» велики, открываются без труда. Но ручек на передних стойках изнутри кабины нет, остается по-спортивному запрыгивать: водителю – подтянувшись за руль, а пассажиру – за ручку на потолке. Жесткими креплениями ремней безопасности снабдили примерно половину сидений. Остальные довольствуются привязанными к полу катушками натяжителя, которые, чтобы пристегнуться, надо держать рукой. Света в салоне в избытке. Спереди – общий плафон и «штурманский глаз», сзади – два больших плафона, еще один – в нише ступеньки сдвижной боковой двери. Каждый включается только своим выключателем и ни один не связан с открытием дверей.

Однако хорошего внутри «Соболя 4х4» тоже немало. Например, целых два кондиционера. Один находится в передней части, другой врезан в крышу сзади. Их совместными усилиями салон «Соболя» примерно за три минуты превращается в холодильник. Отопителя тоже два: дополнительный нашел себе место под сиденьем правого пассажира. Греют отлично!

 

 

 

 

Свет и простор. Помимо обилия свободного пространства в распоряжении
каждого из сидящих спереди – по два удобных подлокотника

Рукоятки раздаточной коробки хитро изогнуты, но на деле удобны

 

Вполне симпатичная приборная доска и хорошая эргономика водительского места, прекрасный обзор через зеркала и обилие бардачков и подстаканников, складной столик между задними рядами и прозрачный люк в крыше. Кнопки управления приемником на руле, электростеклоподъемники, обогрев и регулировка зеркал. Легковое подразделение ГАЗа очень старается сделать приличный автомобиль, и подвижки в этом направлении весьма заметны.

 

ЗАВОДИ МОТОР!
Тарахтение и гул дизеля – основной шумовой аккомпанемент, который пассажиры полноприводного «Соболя» будут слышать во время движения. Главный виновник этого – вырез в полу, из которого «растут» рычаги переключения трансмиссии. Видимо, шумоизоляция оттуда по какой-то причине исчезла. Правда, большинство одноклассников «Соболя» тарахтят, гудят и вибрируют, по крайней мере, не меньше.

Но все компенсирует тяга Cummins ISF. Вялости, как у машины с бензиновым мотором, нет и в помине. Расход в режиме «город–трасса» у меня вышел около 11 л на 100 км.

Коробка передач порадовала точной работой, хотя ее ходы и велики из-за длинного рычага переключения. Рукоятки режимов трансмиссии туговаты, но зато не вибрируют и не издают лишних звуков. Руль удобен, гидроусилитель ZF действует четко и бесшумно. ABS Bosch безупречна. Пора в путь.

На ходу «Соболь» не только резв, но и устойчив. Трудно ожидать от машины ростом под 2,5 м, водруженной на рессоры поверх мостов, скоростной послушности. Но «Соболь» стоит на асфальте как влитой. Умеренно кренится в крутых поворотах, слабо раскачивается и совсем не козлит на ухабах. На скорости около 100 км/ч появляется вибрация карданных валов, хотя вместо крестовин здесь ШРУСы. Тем не менее двигаться в потоке, равно как и преодолевать затяжную пробку, «Соболь 4х4» может без малейшего намека на перегрев. Отличное сцепление, цепкие тормоза – техническая основа этого автомобиля вызывает лишь похвалу.

 

ГЛАВНОЕ ДЕЛО
«Соболь 4х4» не боится сложностей бездорожья. Подвеска охотно «съедает» неровности, и большие, и маленькие. Подключаем передний мост, пониженную передачу и электроблокировку заднего дифференциала. С ними наш подопытный превращается в знатного вездехода. Лезет в любую гору, месит грязь, штурмует канавы и поваленные деревья. Турбодизель плохо тянет на низах, пока турбина не раскрутится. Чтобы одолеть тяжелый подъем или глубокое месиво под колесами, выбирайте передачу пониже и обороты повыше. Как говорят водители со стажем, «чтобы турбина дула». На шкале тахометра «Соболя» не зря выделен зеленым цветом рабочий диапазон мотора. Его надо придерживаться и чтобы не потерять тягу, и чтобы не перекрутить мотор.

 

ДИЗЕЛЬНЫЙ ДВИГАТЕЛЬ CUMMINS
ISF 2.8 у «газелистов» со стажем зарекомендовал себя хорошо. Надежен, неприхотлив, экономичен. Похоже, нижегородским инженерам удалось подыскать достойную альтернативу отечественным бензиновым моторам. 

 



 

Портал в Арктику. 
Над головами задних пассажиров находится мощнейший ветродуй:
ледяной ураган, который он создает, добивает до лобового стекла

 

ЗАНИМАЕМ ВЫСОТУ
За неделю непрерывной езды я, что называется, прикатался к этому веселенькому микроавтобусу цвета «чили». Привычно запрыгивал за руль и десантировался обратно. Высоченная посадка здорово помогает не только высматривать зайцев на охоте, но и, например, смотреть поверх крыш автомобилей в городской пробке. Бордюры и асфальтовые выбоины автомобилю нипочем. Динамика соответствует условиям городской толчеи. Одним словом, дизельный «Соболь 4х4» по-настоящему универсален. Он не распугает соседей по потоку и не будет смотреться инопланетянином на офисной парковке. Но с великим удовольствием его владелец, наконец-то удрав из мегаполиса, играючи доберется до охотничьей заимки.

 

 

Размеры шин и дисков для ГАЗ Баргузин

Марка автомобиля: Бренд Acura Alfa Romeo Aston Martin Audi Bentley BMW Brilliance Buick Byd Cadillac Changan Chery Cheryexeed Chevrolet Chrysler Citroen Daewoo Daihatsu Datsun Dodge Dongfeng Ds Dw FAW Ferrari Fiat Ford Foton Gac Geely Genesis Great Wall Hafei Haima Haval Hawtai Honda Hummer Hyundai Infiniti Iran khodro Isuzu Iveco Jac Jaguar Jeep Kia Lamborghini Lancia Land Rover Lexus Lifan Lincoln Lotus Maserati Maybach Mazda Mercedes MG Mini Mitsubishi Nissan Opel Peugeot Pontiac Porsche Ravon Renault Rolls Royce Rolls-royce Rover Saab Seat Skoda Smart SsangYong Subaru Suzuki Tesla Toyota Volkswagen Volvo Vortex (tagaz) ZAZ Zotye АЗЛК ВАЗ ГАЗ ОКА ТаГАЗ УАЗ

Модель: Модель Maxus Volga Siber Баргузин Волга Газель Газель Next Соболь

Модификация: Модификация2. 1 TD2.32.42.52.8 TD2.9

Год: Год19992000200120022003200420052006200720082009201020112012201320142015201620172018201920202021

Кузов: Кузов2217, 22171 Minivan

Автокредит на ГАЗ — Автокредиты — Частным лицам

По полисам СК «Кардиф» пройдите по ссылке.

По полисам СК «ВТБ Страхование»:

  • по страховому продукту «Защита заемщика Автокредита» по ссылке
  • по страховому продукту «ДКАСКО» по ссылке
  • по продуктам страхования «ВместоКАСКО лайт», «МиниКАСКО»,
    «МиниКАСКО+» по ссылке

По полисам других страховых компаний обращайтесь в Центр автокредитования.

Заявления о наступлении страхового события можно подать также в представительствах страховых компаний.

Да, оформление автомобиля возможно на супругу(-га) либо третье лицо (кроме программ по продукту АвтоЭкспресс). При этом, собственник автомобиля будет выступать в качестве залогодателя и поручителя.

Для оформления автомобиля на третье лицо будущему владельцу автомобиля необходимо будет предоставить пакет документов, аналогичный заемщику, при этом к нему будут применяться требования банка, аналогичные другим участникам сделки. Для оформления автомобиля на супругу(-га) достаточно предоставить паспорт РФ.

Срок рассмотрения кредитной заявки от 5 минут до 2-х дней.

Воспользоваться кредитом на покупку автомобиля вы можете в течение 90 календарных дней с даты поступления в банк анкеты-заявления клиента на получение автокредита.

Зависит от условий конкретной программы. Условия по программам автокредитования размещены на сайте банка

Позвоните нам по телефону 8 (800) 700-24-10 (звонок по России бесплатный).
В будни с 04:00 до 22:00, в выходные с 04:00 до 20:00 по московскому времени. Мы постараемся вам помочь.

Уточнить срок, сумму ежемесячного платежа и актуальный остаток задолженности по кредиту можно:

C 1 апреля 2019 года отменена необходимость передачи оригинала ПТС для хранения в Банк при оформления автокредита.

Клиенты, оформившие автокредит в период до 31 марта 2019 года включительно, могут забрать ПТС после полного погашения кредита в рамках кредитного договора.

Сразу после полного погашения автокредита (на следующий день) вы сможете забрать ПТС. Для этого необходимо записаться по телефону 8 (800) 100-24-24 на определенное время для получения ПТС или обратиться в Модуль сопровождения ипотечных кредитов в вашем регионе. Возьмите с собой паспорт гражданина РФ.

Информация о контроле над вооружениями и распространении: Россия

По состоянию на начало 2019 года ядерный арсенал России, по оценкам, насчитывает 6490 боеголовок, в том числе около 2000, списанных и ожидающих демонтажа. По состоянию на мартовский обмен данными по новому СНВ у России было 1461 развернутая стратегическая боеголовка и 524 развернутые межконтинентальные баллистические ракеты, БРПЛ и стратегические бомбардировщики. Сотрудничество между США и Россией в области нераспространения с 2013 года снизилось, хотя некоторые двусторонние усилия по обеспечению безопасности ядерных материалов все еще продолжаются.Число российских организаций, подпадающих под санкции США в области нераспространения, увеличилось с 2014 года, что знаменует начало спада в американо-российских отношениях. Начиная с июня 2014 года Госдепартамент утверждал, что Россия произвела и испытала ракету в нарушение Договора о РСМД 1987 года, а Россия ответила своими собственными обвинениями в нарушениях со стороны США. Россия завершила уничтожение своего химического оружия в соответствии с требованиями Конвенции о запрещении химического оружия в сентябре 2017 года. Она является участником Конвенции о запрещении биологического оружия, но Соединенные Штаты еще в 2016 году утверждали, что не могут быть уверены в том, что Россия соблюдает договор.

Содержание

Основные многосторонние соглашения и договоры о контроле над вооружениями

Режимы экспортного контроля, инициативы по нераспространению и гарантии

Программы, политика и практика ядерного оружия

  • Ядерный арсенал, обзор
  • Системы доставки
  • Системы противоракетной обороны
  • Делящийся материал
  • Запись о распространении
  • Ядерная доктрина

Биологическое оружие

Химическое оружие

Прочая деятельность по контролю над вооружениями и нераспространению

  • Договор о ракетах средней и меньшей дальности (РСМД)
  • Новый СТАРТ
  • Ядерное сокращение сверх нового СНВ
  • Конференция по разоружению (КР)
  • Зоны, свободные от ядерного оружия
  • Саммиты по ядерной безопасности
  • Совместный всеобъемлющий план действий (СВПД)
  • Сирийское химическое оружие

Основные многосторонние соглашения и договоры о контроле над вооружениями

В начало

Режимы экспортного контроля, инициативы по нераспространению и гарантии

В начало

Программы, политика и практика ядерного оружия

Ядерный арсенал, обзор

На начало 2019 года Федерация американских ученых подсчитала, что Россия обладает ядерным арсеналом, состоящим в общей сложности из 6490 боеголовок, в том числе примерно 1070 стратегических и 1820 нестратегических боеголовок на хранении, и примерно 2000 боеголовок, которые были списаны и ожидают демонтаж. Согласно новому договору СНВ, Россия может развернуть не более 1550 подотчетных боеголовок до февраля 2021 года, когда истечет срок действия договора. По состоянию на март 2019 года у России было 1461 развернутая стратегическая боеголовка и 524 развернутые системы стратегической доставки.

По данным Пентагона, Россия имеет активный запас до 2000 тактических (нестратегических) ядерных боеголовок, что намного больше, чем 150 единиц тактического ядерного оружия США, которые развернуты в Европе. Соединенные Штаты и Россия имеют сопоставимое количество стратегических ядерных вооружений.

Системы доставки

Межконтинентальные баллистические ракеты (МБР)

  • По состоянию на 2019 год в России насчитывалось 318 межконтинентальных баллистических ракет, несущих примерно 1165 боеголовок, в том числе:
    • РС-12М (три варианта)
      • РС-12М (Тополь [SS-25 Серп])
      • РС-12М1 ( Тополь-М [SS-27 Mod 1] ) (мобильный)
      • РС-12М2 ( Тополь-М [SS-27 Mod 1] ) (силос)
      • Каждый вариант несет одну боеголовку мощностью 800 кт, дальность действия 10 500–11 000 км.
    • RS-24 Ярс (SS-27 Mod 2)
      • Мобильная и силосная версии.
      • Каждый несет четыре боеголовки MIRV мощностью 100 кт, дальность 10 500 км.
    • RS-18 (SS-19 Стилет)
      • Каждый несет шесть 400-килотонных многоцелевых ракет-носителей с независимым наведением (РГЧИ), дальность действия 10 000 км.
    • RS-20V (SS-18 Satan)
      • Каждый несет десять боеголовок РГЧ мощностью 500-800 кт, дальность действия 10 200-16 000 км.
    • РС-26 Рубеж
      • В разработке. Успешные испытания в мае 2012 года показали дальность действия 5 800 км.
      • Неизвестно, будет ли «Рубеж» нести одиночную боеголовку или РГЧВ.
      • Окончательная разработка и развертывание были отложены до 2027 года.
    • РС-28 (СС-30 Сармат)
      • Также известен как «Сын Сатаны» или «Сатана 2».
      • Россия в настоящее время разрабатывает RS-28 для замены RS-20V к концу десятилетия, развертывание которого ожидается в начале 2020-х годов.
      • Сообщается, что его разрабатывает Ракетное конструкторское бюро Макеева, также известное как Государственный ракетный центр (ГРЦ) Макаев.
      • Предполагается, что «Сармат» будет оборудован 10 MIRV, хотя некоторые источники указывают на завышение 15 MIRV.
    • Баргузин (рельсовая версия SS-27 Mod 2)
      • Представители Министерства обороны России заявили, что он предназначен для возрождения и замены бывших советских ядерных поездов и находится на ранних стадиях разработки проекта.
      • Россия успешно завершила испытание на катапультирование в ноябре 2016 года и ожидает, что ядерные поезда будут введены в эксплуатацию в период с 2018 по 2020 год и останутся в эксплуатации до 2040 года.
      • Окончательная разработка и развертывание были отложены до 2027 года.
  • Все российские межконтинентальные баллистические ракеты были разработаны и приняты на вооружение с 1980-х по 1990-е годы, за исключением РС-24, которая поступила на вооружение в 2010 году, а также РС-26 и РС-28, которые все еще находятся в стадии разработки.
  • В то время как количество российских межконтинентальных баллистических ракет должно упасть ниже 300 к началу 2020-х годов, Россия в настоящее время модернизирует свои ракеты наземного базирования и планирует увеличить долю ракет, оснащенных залповыми боеголовками.

Подводные лодки и баллистические ракеты подводного базирования (БРПЛ)

Подводные лодки:

  • Россия способна доставлять до 720 боеголовок с помощью подводных лодок Delta IV, подводных лодок Delta III и новых подводных лодок класса Borey (для замены устаревших подводных лодок Delta III и IV).
    • Дельта IV
      • В составе Северного флота России.
      • Вооружен 16 ракетами РСМ-54 Синева (SS-N-23 Skiff).
      • По сообщениям, модернизирован для установки новых ракет Р-29РМУ2 Лайнер (модифицированная ракета «Синева»).
    • Delta III
      • В составе Тихоокеанского флота России.
      • Вооружен 16 ракетами РСМ-50 «Волна» (SS-N-18 Stingray).
    • Класс Борея и класс Борей-А
      • На вооружении 16 ракет РСМ-56 «Булава».
      • Россия разрабатывает пять модернизированных подводных лодок класса «Борей-А», которые будут поставлены к середине 2020-х годов.

Баллистические ракеты подводных лодок (БРПЛ):

  • Российские баллистические ракеты, запускаемые с подводных лодок, включают РСМ-50, РСМ-54, РСМ-56 и, как сообщается, Р-29РМУ2 и включают в себя в общей сложности 176 пусковых ракетных установок на всех ПЛАРБ.
    • RSM-50 (SS-N-18 M1 Stingray)
      • Развернут в 1978 году.
      • Оборудован тремя РГЧ 50т, дальность действия 6500-8000 км.
    • РСМ-54 (СС-Н-23 М1 Синева)
      • Развернут в 2007 году.
      • Оснащен четырьмя РГП 100 кт, дальность действия 8300 км.
    • РСМ-56 (СС-Н-32 Булава)
      • Дата развертывания: 2014 г.
      • Оборудован шестью РГЧМ по 100 кт, дальность полета более 8000 км.
      • С момента первых испытаний в 2004 году ракета «Булава» имеет длинный список неудачных запусков, последний из которых был в 2016 году.
    • Р-29РМУ2
      • Несколько источников утверждают, что она поступила на вооружение в 2014 году, некоторые предполагают, что ракета может быть оснащена до 10 боеголовками, однако по другим оценкам, их количество составляет 4 боеголовки.

Стратегические бомбардировщики

  • По состоянию на 2019 год в составе ВВС России имеется 68 дальних бомбардировщиков, которые могут нести в общей сложности 786 боеголовок.
    • Ту-95 МС6
      • Способен нести ядерные стратегические крылатые ракеты Х-55 (АС-15А).
    • Ту-95 МС16
      • Способен нести ядерные стратегические крылатые ракеты Х-55 (АС-15А).
    • Ту-160
      • Может нести крылатые ракеты Х-55 (АС-15Б) или 12 ударных ракет Х-15 (АС-16) малой дальности.
  • Все три самолета классифицируются как тяжелые стратегические бомбардировщики и подпадают под действие нового СНВ.
  • Все три бомбардировщика могут быть оснащены гравитационными бомбами.
  • В ВВС России также имеется многоцелевой сверхзвуковой бомбардировщик средней дальности Ту-22М, который считается тактической платформой доставки ядерного оружия для различных типов крылатых ракет и не ограничивается новым СНВ.
  • Россия приступила к изучению проектов стратегических бомбардировщиков следующего поколения, предназначенных для замены всего парка Ту-95, Ту-160 и Ту-22М. Ожидается, что в рамках программы нового бомбардировщика прототип будет разработан к началу 2020-х годов.

Новые стратегические системы

Россия также работает над разработкой ряда новых вооружений стратегической дальности:

  • «Авангард » — гиперзвуковая планирующая боеголовка, которую может нести «сверхтяжелая» межконтинентальная баллистическая ракета «Сармат»
    • .
  • Кинжал , гиперзвуковая баллистическая ракета, способная выполнять маневры уклонения
  • Пересвет , высокоэнергетическое лазерное оружие
  • Буревестник , крылатая ракета атомная «неограниченной дальности»
  • Poseidon , атомный беспилотный подводный аппарат «неограниченной дальности»

Системы противоракетной обороны

Несмотря на резкую критику со стороны Москвы в адрес У.S. Программа противоракетной обороны, Россия расширяет и модернизирует свои системы противовоздушной и противоракетной обороны. Россия экспортирует многие из этих систем за границу. Система противоракетной обороны А-135 действует в окрестностях Москвы с 1995 года после замены системы А-35 Galosh 1970-х годов. Россия эксплуатирует несколько семейств систем ПВО, каждое из которых состоит из множества вариантов и усовершенствований. К ним относятся системы С-300П, С-300В и С-400. Система С-500 находится в разработке. Более подробную информацию можно найти здесь.

Делящийся материал

Россия публично заявила, что больше не производит расщепляющийся материал (высокообогащенный уран [ВОУ] и плутоний) для оружейных целей.

Высокообогащенный уран (ВОУ)

  • Кремль объявил о прекращении производства ВОУ для оружия в 1989 году и о прекращении производства плутония для оружия в 1994 году.
  • По состоянию на конец 2016 года российские запасы ВОУ оценивались в 679 метрических тонн с погрешностью 120 метрических тонн (что делает их, без учета погрешности, крупнейшими запасами ВОУ).Примерно 20 метрических тонн предназначены для использования в гражданских целях, что является вторым по величине запасом ВОУ гражданского назначения после США.
  • Россия заключила совместную программу в 2013 году, российско-американское соглашение о закупке высокообогащенного урана, в котором Москва разбавила 500 метрических тонн своего избыточного оружейного ВОУ в реакторное топливо, непригодное для бомб, которое затем она продала Соединенным Штатам в качестве легкой воды. реакторное топливо.
  • Вторая финансируемая США программа, Проект преобразования и консолидации материалов (MCC), объединена 16.8 метрических тонн ВОУ к концу 2014 года.

Плутоний

  • В апреле 2010 года Россия закрыла свой последний завод по производству плутония, хотя не исключила возврата к производству выделенного плутония для реакторов на быстрых нейтронах в будущем.
  • В 2012 году остановлен последний завод по переработке оружейного плутония в Железногорске.
  • Его общие запасы плутония на конец 2016 года оцениваются в 185,2 метрических тонны с погрешностью 8 метрических тонн.
    • Запасы оружейного качества оцениваются в 128 ± 8 метрических тонн.
    • 57,2 метрических тонны выделенного реакторного плутония заявлены для использования в гражданских целях.
  • Россия обязалась утилизировать 34 метрических тонны избыточного плутония, начиная с 2018 года, в соответствии с соглашением 2000 года с Соединенными Штатами об обращении с плутонием и его утилизации (PMDA).
    • Однако в октябре 2016 года Россия, сославшись на невыполнение США своих обязательств по соглашению, приостановила реализацию сделки и обусловила возобновление реализации отменой всех U.С. Санкции против России и перестройка сил НАТО. Россия утверждает, что планы США отказаться от конверсии плутония в смешанное оксидное (МОКС) топливо в пользу более дешевого и быстрого метода разбавления не соответствуют условиям сделки, поскольку этот альтернативный метод не изменит состав плутония из оружия. -повышение до реакторного.

Запись о распространении

  • Соединенные Штаты и независимые аналитики уже давно называют Россию ключевым поставщиком ядерных и ракетных товаров и технологий для множества стран, включая государства, вызывающие озабоченность с точки зрения распространения, такие как Иран и Сирия.
    • В ответ Соединенные Штаты часто применяли санкции к российским организациям, которые, как считается, были причастны к такой деятельности по распространению.
    • Начиная с середины 2000-х годов количество и частота российских предприятий, на которые распространяются санкции США в отношении распространения, снизились, возможно, в результате усиления обязательств России по контролю за экспортом чувствительной продукции; однако с 2014 года это число значительно увеличилось.
  • Россия остается источником незаконных технологий, имеющих отношение к ракетному распространению.
  • Обширные бывшие советские комплексы биологического, химического и ядерного оружия, включая бывших ученых, также рассматривались как потенциальный источник оружия, материалов и знаний для других режимов или негосударственных субъектов.
    • Соединенные Штаты и другие страны реализуют программы, направленные на смягчение этой потенциальной угрозы, помогая России и другим бывшим советским республикам обезопасить или уничтожить объекты, материалы и системы вооружений, а также выгодно нанять бывших ученых для работы, не связанной с оружием.
    • Однако с 2013 года сотрудничество между США и Россией в области нераспространения значительно сократилось, несмотря на продолжающееся сотрудничество по очистке оружейных материалов из третьих стран, таких как Польша, в 2016 году.
  • После приостановки PMDA Россия также приостановила свое участие в соглашении о сотрудничестве 2013 года в области ядерных и энергетических исследований и расторгла третье соглашение с 2010 года об изучении вариантов перевода исследовательских реакторов с топлива, пригодного для использования в оружии.

Ядерная доктрина

Согласно военной доктрине России, в последний раз обновленной в декабре 2014 года, Россия «оставляет за собой право применять ядерное оружие в ответ на применение ядерного и других видов оружия массового уничтожения против нее и (или) ее союзников, а также в ответ на агрессию против Российской Федерации с применением обычных вооружений, угрожающих самому существованию государства ».

Представители министерства обороны США заявили, что российская доктрина включает в себя так называемую стратегию «эскалации для деэскалации», которая предусматривает ограниченное применение ядерного оружия первым в попытке положить конец крупномасштабному конфликту с обычными вооружениями на выгодных для России условиях.Однако некоторые эксперты сомневаются, является ли «эскалация эскалации в сторону деэскалации» частью российской доктрины.

Тестирование

Россия (бывший Советский Союз) провела 715 испытаний ядерного оружия. Первое испытание произошло 29 августа 1949 года, а последнее — 24 октября 1990 года. Россия была второй страной, проводившей ядерное испытание, после США.

В начало

B Иологическое оружие

  • Советский Союз поддерживал обширную программу наступательного бактериологического оружия, включая исследования чумы, сибирской язвы, оспы, туляремии, сапа и геморрагической лихорадки.
  • Соединенные Штаты неоднократно выражали озабоченность по поводу статуса унаследованной от России советской программы борьбы с микробами. Однако в 2011 году Россия утверждала, что она соблюдает КБО.
  • Тем не менее, Государственный департамент в апреле 2016 года утверждал, что ежегодные представления России о мерах укрепления доверия в рамках КБО с 1992 года «недостаточно документировали, была ли эта программа [унаследованная советская программа наступательных биологических исследований и разработок] полностью уничтожена или перенаправлена ​​на мирные цели в соответствии с со статьей II КБО.”
  • Отсутствие прозрачности вокруг этой программы не позволяет Соединенным Штатам прийти к более конкретным выводам.

В начало

Химическое оружие

  • После вступления в силу Конвенции о запрещении химического оружия (КХО) 5 декабря 1997 года Россия заявила, что она владеет примерно 40 000 метрических тонн химических агентов, что на тот момент было самым большим количеством в мире. Продолжается спор о том, полностью ли Россия задекларировала все свои объекты, связанные с химическим оружием, и прошлое производство.
  • 27 сентября 2017 г. ОЗХО объявила, что Россия завершила уничтожение всего своего арсенала химического оружия.
  • В 2016 году Госдепартамент заявил, что он «не может подтвердить, что Россия выполнила свои обязательства по Конвенции: в отношении объявления своих ОПХО [объектов по производству химического оружия]; его средства разработки CW; или его запасы ХО ».
  • Великобритания обвинила Россию в убийстве 4 марта 2018 года в Великобритании бывшего российского шпиона Сергея Скрипаля и его дочери Юлии с использованием химического агента Новичок.

В начало

Прочая деятельность по контролю над вооружениями и нераспространению

Договор о ракетах средней и меньшей дальности (РСМД)
Договор 1987 года о РСМД между США и Советским Союзом требует, чтобы Соединенные Штаты и Россия ликвидировали и навсегда отказались от всех своих ядерных и обычных баллистических и крылатых ракет наземного базирования с дальности от 500 до 5 500 километров. По условиям договора Соединенные Штаты и Советский Союз уничтожили в общей сложности 2692 ракеты малой, средней и средней дальности к крайнему сроку его выполнения — 1 июня 1991 года.

Однако в июле 2014 года Государственный департамент США официально признал, что Россия нарушает соглашение, сославшись на производство и испытания Россией незаконной крылатой ракеты наземного базирования. Госдепартамент подтвердил этот вывод в 2015, 2016, 2017 и 2018 годах. В феврале 2019 года США объявили о своем намерении приостановить выполнение своих обязательств и выйти из договора через шесть месяцев, если Россия не вернется к соблюдению. В то время Россия выразила обеспокоенность по поводу У.С. также заявил о своем намерении приостановить свои обязательства по договору. 2 августа США официально вышли из ДРСМД.

Для получения дополнительной информации о Договоре о РСМД посетите информационный бюллетень «Краткий обзор Договора о РСМД».

Новый СНВ
В апреле 2010 года Соединенные Штаты и Россия подписали новый договор о СНВ. Новый договор, известный как Новый договор о сокращении стратегических наступательных вооружений (Новый договор СНВ), вступил в силу 2 февраля.5 ноября 2011 г. и требует, чтобы обе стороны сократили свои арсеналы до 1550 развернутых стратегических ядерных вооружений не более чем на 700 БРПЛ, БРПЛ и бомбардировщиках к 2018 г. Обе стороны выполнили ограничения к крайнему сроку 5 февраля 2018 г., и эти ограничения останутся в силе. до истечения срока действия договора в феврале 2021 года. Кроме того, договор содержит строгие положения о мониторинге и проверке для обеспечения соблюдения соглашения.

Россия неоднократно выражала заинтересованность в продлении договора на пять лет в соответствии с положениями соглашений, но выражала озабоченность по поводу У.S. процедуры исключения пусковых установок баллистических ракет подводных лодок и некоторых бомбардировщиков B-52 из-под ответственности по договору. Президент России Владимир Путин заявил журналистам 6 июня 2019 года, что, хотя Россия «сто раз» заявляла о своей готовности продлить новый СНВ, они готовы допустить прекращение действия договора, если администрация Трампа не заинтересована в продлении соглашения.

Сокращение ядерных боезарядов сверх нового СНВ
В феврале 2013 года президент Обама объявил, что Соединенные Штаты намерены сотрудничать с Россией с целью дальнейшего сокращения развернутых стратегических боеголовок на треть ниже лимита нового СНВ до примерно 1100–1000 развернутых боеголовок.Однако прогресс в достижении таких сокращений был незначительным из-за ухудшения американо-российских отношений после аннексии Крыма Россией и настойчивого требования России, чтобы другие вопросы, такие как ограничения американской противоракетной обороны, были частью переговоров о дальнейших сокращениях. .

Конференция по разоружению (КР)
Россия, наряду с Китаем, придает значительный приоритет на КР переговорам по соглашению о предотвращении гонки вооружений в космическом пространстве (PAROS).Однако США и другие страны выступили против этой инициативы. В соответствии со своей официальной позицией в поддержку запрета на производство расщепляющегося материала для оружейных целей, Россия в марте 2016 года представила КР проект программы работы, призывающий к созданию рабочей группы, чтобы рекомендовать «эффективные меры по запрещению производство расщепляющегося материала для ядерного оружия и других ядерных взрывных устройств ». В 2016 году Россия также предложила КР провести переговоры по новой конвенции, Международной конвенции о борьбе с актами химического терроризма, чтобы заполнить несколько пробелов, которые, по ее утверждениям, существуют в КХО.

Зоны, свободные от ядерного оружия
Правительство России подписало и ратифицировало протоколы, в которых говорится о своем намерении уважать и не угрожать применением ядерного оружия против государств-участников договоров о зонах, свободных от ядерного оружия, в Латинской Америке и южной части Тихого океана. В 2011 году Россия подписала и ратифицировала Протоколы I и II для африканской зоны. В 2014 году он ратифицировал протоколы для зоны Центральной Азии, но еще не ратифицировал протоколы для зоны Юго-Восточной Азии.

Саммиты по ядерной безопасности
Участие России в саммитах по ядерной безопасности включает Саммит по ядерной безопасности 2010 года в Вашингтоне, округ Колумбия, СЯБ 2012 года в Сеуле и СЯБ 2014 года в Гааге. Россия не участвовала в последней СНБ, состоявшейся в Вашингтоне, округ Колумбия, в 2016 году. Российский бойкот СНБ 2016 года произошел на фоне продолжающегося ухудшения американо-российских отношений. Тогда Москва заявила: «Мы не видим дополнительных преимуществ от этих встреч».

Совместный всеобъемлющий план действий (СВПД)
В качестве постоянного члена Совета Безопасности ООН Россия приняла участие в переговорах по СВПД от июля 2015 года, который ограничивает и сворачивает ядерную программу Ирана.Министр иностранных дел России Сергей Лавров заявил, что соглашение «благоприятно скажется на общей ситуации на Ближнем Востоке, в Северной Африке и Персидском заливе». Россия поддержала СВПД на основании поддержки нераспространения. Кроме того, Россия может получить значительные экономические выгоды в Иране после отмены ядерных санкций. Например, в 2016 году Россия завершила поставку Ирану зенитно-ракетной системы С-300 стоимостью 800 миллионов долларов по сделке, которая была приостановлена ​​с 2010 года. Россия продолжала поддерживать СВПД после нарушения администрацией Трампа и выхода из сделка в мае 2018 года.

Сирийское химическое оружие
В сентябре 2013 года, после широкомасштабного применения химического оружия сирийским правительством, Россия достигла соглашения с Соединенными Штатами об учете, проверке, контроле и уничтожении химического оружия Сирии. К июлю 2014 года объявленные сирийские запасы химического оружия были успешно вывезены из страны и помечены для уничтожения после широкомасштабной многосторонней операции. Однако высказывались опасения по поводу точности заявления Сирии.

В сентябре 2014 года Организация по запрещению химического оружия (ОЗХО) подтвердила, что газообразный хлор используется в Сирии. 6 марта 2015 года Совет Безопасности ООН принял резолюцию, осуждающую использование газообразного хлора в Сирии. Россия официально поддержала резолюцию ООН, но заявила, что только ОЗХО может определять нарушения КХО и что она не согласилась с применением санкций в соответствии с главой VII Хартии против Сирии без подтверждения применения химического оружия. В августе 2016 года был опубликован третий отчет Совместного следственного механизма ОЗХО-ООН, в котором было установлено, что сирийское правительство несет ответственность за атаки с применением химического оружия.

В апреле 2017 года еще одна химическая атака была совершена в сирийском городе Хан-Шейхун, где военные самолеты сирийского правительства были обвинены в распространении нервно-паралитического вещества с помощью бомб, в результате чего погибли десятки людей. Россия поддержала режим Асада, утверждая, что авиаудар был нанесен по складу химического оружия оппозиции.В ноябре 2017 года Россия заблокировала продолжение расследования по установлению лиц, применявших химическое оружие в Сирии.

(Подробную хронологию сирийского химического оружия см. В нашем информационном бюллетене здесь.)

В начало

Картирование потенциальных признаков выбросов газа во льду озера Нейто, Ямал, Россия, с использованием радиолокатора с синтезированной апертурой и данных многоспектрального дистанционного зондирования

Менне, М. Дж., Дурре, И., Восе, Р.С., Глисон, Бельгия, и Хьюстон, Т.Г .: Ан Обзор базы данных Global Historical Climatology Network-Daily685

, Журнал атмосферных и океанических технологий, 29, 897–910, https: // doi.org / 10.1175 / JTECH-D-11-00103.1, 2012b.

Nisbet, EG, Dlugokencky, EJ, and Bousquet, P .: Methane on the Rise — Again, Science, 343, 493–495,

https://doi.org/10.1126/science.1247828, 2014.

Nisbet, EG, Manning, MR, Dlugokencky, EJ, Fisher, RE, Lowry, D., Michel, SE, Myhre, CL, Platt, SM, Allen, G., Bousquet,

P., Brownlow, R. , Cain, M., France, JL, Hermansen, O., Hossaini, R., Jones, AE, Levin, I., Manning, AC, Myhre, G., Pyle, JA, 690

Vaughn, BH, Warwick, NJ, and White, JWC: Очень сильный рост атмосферного метана за 4 года 2014–2017: последствия

для Парижского соглашения, Global Biogeochemical Cycles, 33, 318– 342, https://doi.org/10.1029/2018GB006009, 2019.

Otsu, N .: A Threshold Selection Method from Gray-Level Histograms, IEEE Transactions on Systems, Man, and Cybernetics, 9, 62–66,

.

https://doi.org/10.1109/TSMC.1979.4310076, 1979.

Padwick, C., Дескевич, М., Пачифичи, Ф., и Смоллвуд, С .: WorldView-2 pan-sharpening, in: Proceedings of695

the Annual Conference ASPRS 2010, San Diego, CA, USA, vol. 2630, https://www.semanticscholar.org/paper/

WORLDVIEW-2-PAN-SHARPENING-Padwick-Scientist / cef54a1a117157ab3ec336ff83acc62eaafdd3c2, 2010.

Pointchatter, G. Аномалии на озере Нейто, Ямал, Россия, GI_Forum Journal,

8, 47–62, https: // doi.org / 10.1553 / giscience2020_01_s47, 2020.

Pointner, G., Bartsch, A., Forbes, BC, and Kumpula, T .: Роль размера озера и местных явлений для мониторинга грунтового и припайного озерного льда, 700

International Journal of Remote Sensing, 40, 832–858, https://doi.org/10.1080/01431161.2018.1519281, 2019.

Портер, К., Морин, П., Ховат, И., Но, М.-Дж. ., Бейтс, Б., Петерман, К., Кизи, С., Шленк, М., Гардинер, Дж., Томко, К., Уиллис, М.,

Келлехер, К., Клотье, М., Хасби , Э. , Фога, С., Накамура, Х., Платсон, М., Ветхингтон, Майкл, Дж., Уильямсон, К., Бауэр, Г.,

Энос, Дж., Арнольд, Г., Крамер, В., Becker, P., Doshi, A., D’Souza, C., Cummens, P., Laurier, F., and Bojesen, M .: ArcticDEM,

https://doi.org/10.7910/DVN/OHHUKH , дата обращения: 2020-04-01, 2018. 705

Roy, DP, Wulder, MA, Loveland, TR, Woodcock, C., Allen, RG, Anderson, MC, Helder, D., Irons, JR, Johnson, DM, Kennedy,

R. и др .: Landsat-8: Наука и видение продукта для исследования земных глобальных изменений, Дистанционное зондирование окружающей среды, 145, 154–172,

https: // doi.org / 10.1016 / j.rse.2014.02.001, 2014.

Schuler, D. и Lee, J.-S .: Картирование особенностей поверхности океана с использованием биогенных пятен и методов поляриметрического разложения SAR, IEE

Proceedings-Radar , Sonar and Navigation, 153, 260–270, https://doi.org/10.1049/ip-rsn:20045118, 2006.710

Schwietzke, S., Sherwood, OA, Bruhwiler, LM, Miller, JB, Etiope, G . , Dlugokencky, EJ, Michel, SE, Arling, VA, Vaughn,

BH, White, JW, et al .: Пересмотр глобальных выбросов метана из ископаемого топлива на основе базы данных изотопов, Nature, 538, 88–91,

https: // doi.org / 10.1038 / nature19797, 2016.

Соренсен, Т .: Метод установления групп равной амплитуды в социологии растений, основанный на сходстве содержания видов, и его применение

для анализа растительности на датских территориях, http: // www.royalacademy.dk/Publications/High/295_S%C3%B8rensen,%20Thorvald.715

pdf, 1948.

Surdu, CM, Duguay, CR, Brown, LC, и Фернандес Прието, D.: Реакция льда покрытие на мелководных озерах Северного склона Аляски до

современных климатических условий (1950-2011): анализ данных радиолокационного дистанционного зондирования и численного моделирования, Криосфера, 8, 167–180,

https: // doi.org / 10.5194 / tc-8-167-2014, 2014.

Surdu, CM, Duguay, CR, Pour, HK, and Brown, LC: Обнаружение ледяного покрова и вскрытия мелководных озер на севере Аляски720

с космическим РСА, дистанционное зондирование, 7, 6133–6159, https://doi. org/10.3390/rs70506133, 2015.

38

Препринт. Начало обсуждения: 24 Августа 2020

Автор (ы) 2020. Лицензия CC BY 4.0.

Особенности пространственного распределения газовых примесей в атмосфере юго-восточного побережья озера Байкал по маршрутным измерениям в летний период 2018-2019 гг.

  • Цыдыпов В.В. 1
  • Заяханов А.С. 1
  • Жамсуева Г.С. 1
  • Дементьева А.Л. 1
  • Балжанов Т.С. 1
  • Сунрапова И.П. 1
  • Нагуслаев С.А. 1
    • 1 Институт физического материаловедения СО РАН, ул. Сахьяновой, 6, г. Улан-Удэ, 670047, Россия

Ключевые слова: атмосфера; концентрация; маршрутные измерения; озеро Байкал

Аннотация

В работе представлены результаты маршрутных измерений концентраций диоксида серы (SO 2 ), оксидов азота (NO x ), оксида углерода (CO), диоксида углерода (CO 2 ) в атмосфере прибрежной зоны. Байкала летом по маршруту Култук-Турка в 2018 г. и по маршруту Гремячинск-Монахово в 2019 г.В летний период 2018 г. на всем протяжении маршрута в Новом Энхалуке наблюдались повышенные концентрации SO 2 , CO, NO 2 со средними значениями 7,4 г / м 3 , 2,8 мг / м 3 и 11 г. / м 3 соответственно. Анализ полученных данных измерений малых примесей газа на трассе Гремячинск-Монахово показывает, что содержание диоксида серы в Баргузинском заливе в 3 раза превышает данные, полученные в 2018 году на трассе Култук-Турка.Высокий уровень SO 2 обусловлен текущей погодной ситуацией, связанной с пожарами на больших лесных территориях.

Вот как Россия хочет гиперзвуковое оружие

Россия придала столь высокий приоритет своему новому гиперзвуковому ракетоносителю «Авангард», что приостановила реализацию двух других программ создания межконтинентальных баллистических ракет.У Кремля нет средств для разработки и вывода на рынок «Авангарда» при одновременной разработке мобильной межконтинентальной баллистической ракеты РС-26 «Рубеж» и баргузинской железнодорожной мобильной межконтинентальной баллистической ракеты.

«Изначально планировалось включить и« Авангард », и« Рубеж »в государственный план вооружения, но позже стало ясно, что средств не хватит для одновременного финансирования обеих систем», — сообщил ТАСС источник в российской оборонной промышленности. «Авангард» был включен в финальную версию программы как более важный для обеспечения обороноспособности страны.«

Рубеж видимо не отменяют; скорее, и он, и Баргузин приостановлены до 2027 года.

«Все работы на Рубеже и Баргузине приостановлены до конца 2027 года», — сообщил источник ТАСС. «Решение о возобновлении работ будет принято после выполнения текущей программы вооружения».

Рекомендовано: мы летали на борту самого мощного авианосца из когда-либо построенных.

Рекомендуется: вот как Китай вторгнется в Тайвань (и как это остановить).

Рекомендовано: История истребителя F-52.

Русские, вероятно, отдают предпочтение «Авангарду» из-за опасений Кремля, что будущая американская противоракетная оборона может подорвать возможности Москвы для ответного второго удара. Таким образом, русские решили распределить свои ресурсы таким образом, который, по их мнению, обеспечит максимальную возможность для доллара — или в данном случае рубля.

«Российский оборонный истеблишмент считает приоритетной разработку технологий, способных свести на нет американскую противоракетную оборону, — наряду с рядом других технологий, которые делают U.«Высокотехнологичное преимущество неэффективно, например, радиоэлектронная война», — сказал The National Interest исследователь Центра военно-морского анализа Сэмюэл Бендетт.

Первоначально «Авангард» будет размещен на борту ракет УР-100УТТКн, которые были возвращены из Украины после распада Советского Союза в 1991 году. Как только «Сармат» будет готов к работе, «Авангард» будет размещен на этой 200-тонной ракете.

«В начале 2000-х около 30 жидкостных ракет УР-100Н УТТХ были доставлены из Украины в счет« долга за газ »», — сообщил московскому агентству ТАСС источник в российской оборонной промышленности. «После распада СССР они хранились на складах в незаправленном состоянии, то есть были фактически новыми и могли нести боевое дежурство несколько десятков лет. Часть этих ракет в ближайшие годы станет носителем первой серии гиперзвуковых планирующих аппаратов ».

В конце концов, когда массивный «Сармат» — достаточно мощный, чтобы пролететь по маршруту Южного полюса к американским целям — вступит в строй, он также будет использоваться для доставки «Авангарда».«С принятием на вооружение тяжелых ракет РС-28« Сармат »такие машины будут устанавливаться и на них», — сообщил ТАСС источник в ОПК.

«Авангард», по всей видимости, будет оснащен одной массивной термоядерной боеголовкой мощностью более двух мегатонн. При такой высокой мощности «Авангард» будет иметь значительно большую разрушительную силу в отдельной боеголовке, чем типичная современная межконтинентальная баллистическая ракета, у которой меньшая мощность обычно не превышает 500 килотонн.

Как правило, большинство современных межконтинентальных баллистических ракет, за исключением минитмен III, снятых с вооружения, имеют несколько независимых боеголовок. Это говорит о том, что «Авангард» — это прежде всего противодействующее оружие, предназначенное для гарантированного ответного второго удара, предназначенного для обхода противоракетной обороны. Действительно, источник ТАСС ссылается на необходимость уничтожения «особо важных целей». Конечно, массивная межконтинентальная баллистическая ракета, такая как «Сармат» или даже UR-100N UTTKn, при необходимости могла бы нести несколько планирующих машин «Авангард».

Русские утверждают, что контракт на производство оружия «Авангард» уже подписан и что это оружие может быть поставлено в боевую готовность уже в следующем году.

«После того, как будет произведена первая серия планирующих аппаратов и будет успешно проведен управляемый пуск ракеты с этим вооружением, комплекс« Авангард »может быть принят на вооружение уже в конце 2018 года», — сообщил ТАСС источник в обороне. Не позднее чем в 2019 году он будет принят в эксплуатацию и переведен в режим повышенной готовности ».

Заместитель министра обороны России Юрий Борисов ранее заявлял, что Минобороны уже подписало контракт на запуск нового оружия в производство.

«Система« Авангард », о которой упоминал президент [Владимир Путин], хорошо протестирована», — сказал Борисов русскоязычной газете Red Star . «Это произошло благодаря значительным усилиям, потому что температура на поверхности боевой части достигает 2000 градусов [Цельсия]. Он действительно летит по воздуху в окружении плазмы. Таким образом, проблемы, связанные с контролем и защитой системы, были значительными, но в конечном итоге все же были разрешены. Практические испытания подтвердили реализуемость выбранного подхода.Фактически, мы заключили контракт на серийное производство этих систем. Так что это не блеф, а серьезное мероприятие ».

Аналитики крайне скептически относятся к тому, что россияне могут ввести «Авангард» в эксплуатацию к следующему году. На вопрос, есть ли шанс, что Москва выставит на вооружение это оружие к 2019 году, ученый из Центра военно-морского анализа Майкл Кофман категорически ответил: «Нет».

Дэйв Маджумдар — редактор отдела обороны журнала The National Interest . Вы можете следить за ним в Twitter: @davemajumdar .

Россия разработала новый железнодорожный ракетный комплекс «Баргузин», способный буксировать до шести ракет «Ярс» 2712 | оружие оборонная промышленность военная техника UK

Русский военный Источник рассказал о возможностях стратегического ракетного поезда «Баргузин». В стране может появиться пять таких замаскированных мобильных пусковых платформ. в каждом по шесть RS-24 Ярс ракет за пять лет.

«Ядерный поезд» — правильное название БЖРК, сокращение от «Боевой железнодорожный ракетный комплекс» на русском языке — это мобильная платформа для транспортировки и пуска стратегических ядерных ракет.Подобно атомным подводным лодкам, такие поезда сложно уничтожить в превентивный удар из-за их мобильности и способности маскироваться как обычные грузовые поезда.

Как РТ-23 Молодец (по классификации НАТО SS-24 Скальпель), Баргузинский вагоны с ракетами будут замаскированы под вагоны-рефрижераторы. Но поскольку ракета «Ярс» весит примерно вдвое меньше, чем ракета «Молодец». В таком случае автомобилям не потребовались бы усиленные колесные пары для перевозки груза.Это затруднит распознавание поездов с земли.

РТ-23 был Советская межконтинентальная баллистическая ракета (межконтинентальная баллистическая ракета) разработана и произведена КБ «Южное» до 1991 года. Холодный старт, Поставляется в силосном и вагонном вариантах. Это трехступенчатый ракета на твердом топливе и с вектором тяги на первой ступени, с 10 боевыми частями РГЧ мощностью 550 кт каждая.

Разница в весе также означает, что один ядерный поезд будет способен нести больше индивидуальных ракет. По проектам Московский институт теплотехники, оружейная платформа. разработчик, каждый Баргузин сможет буксировать до шести ракет Ярс, сообщил источник.

Что вызывает образование таинственных «ледяных колец» в самом глубоком озере в мире?

Огромные таинственные «ледяные кольца», которые покрывают самое глубокое озеро в мире в зимние и весенние месяцы в Сибири, могут выглядеть как ледяные круги на полях, но это не из-за инопланетной активности, атмосферных условий или даже, как считалось ранее, просачивания пузырьков метана. со дна озера.

Скорее, кажется, что теплые кружащиеся водовороты под толщиной льда озера Байкал ответственны за эти ледяные кольца, некоторые из которых достигают 4 миль (7 километров) в диаметре и могут быть видны из космоса. исследование находит.

Однако разгадать эту загадку было непросто. Международная группа исследователей из Франции, России и Монголии, изучающих ледовые кольца озера с 2010 года, решила приезжать к озеру два раза в год в 2016 и 2017 годах для нового исследования, в ходе которого они пробурили дыры во льду рядом с кольцами, и уронил датчики в воду внизу.Однажды они узнали, что два фургона застряли в ледяных кольцах. Один из них затонул в озере, и его так и не нашли.

По теме: В живом цвете: Галерея потрясающих озер

Фургон, застрявший во льду на восточной границе кольца в Байкале в марте 2016 года. К счастью, его удалось восстановить. на следующий день. Фургону, застрявшему двумя днями ранее, повезло меньше; после прорыва льда пассажиры и водитель скрылись, но машина затонула на дно озера. (Изображение предоставлено Александром Бекетовым)

В холодные месяцы в Сибири замерзает озеро Байкал — крупнейшее пресноводное озеро в мире по объему. Лед настолько толстый, что люди постоянно проезжают по нему, сказал ведущий исследователь Алексей Кураев, доцент Лаборатории исследований пространственной геофизики и океанографии (LEGOS) Федерального университета в Тулузе, Франция.

«Это несложно, — сказал Кураев Live Science. «Это очень длинное озеро, и если вы хотите перейти с одного берега на другой, вам нужно либо 400 километров [248 миль] в одну сторону, либо 400 километров по другому берегу.«Но путешествие по льду составляет всего около 25 миль (40 км)», поэтому выбор очевиден », — сказал он.

Однако, хотя лед толстый снаружи и внутри этих колец тонкого льда, сами кольца По словам Кураева, могут подвергнуть опасности автомобили и их пассажиров.

Спутниковые фотографии показывают загадочные ледяные кольца в сибирском озере Байкал. Исследователи сосредоточили внимание на кольцах в красной пунктирной рамке. Ранее обнаруженные кольца показаны красным, а недавно обнаруженные кольца оранжевого цвета.(Изображение предоставлено: Limnology and Oceanography, 2019; CC BY-NC-ND 4.0; данные Corona и Landsat взяты из Геологической службы США.) , и может длиться от нескольких дней до месяцев, как показывают спутниковые снимки. Однако эти кольца ведут себя непредсказуемо и из года в год появляются в разных частях озера. Более того, они, как правило, появляются в конце апреля, но могут появиться уже в январе или уже в мае, сказал Кураев.

Но ученые не могли понять, как они образовались. Одна из наиболее популярных теорий, на самом деле , о которой сообщила Live Science в 2009 году , предполагала, что парниковый газ метан поднимается с глубокого дна озера, вызывая эти кольца. Но Коураев и его коллеги заметили, что некоторые из этих ледовых колец сформировались на более мелководье озера, в районах, где не было обнаружено выбросов газа.

Проанализировав данные с датчиков, которые они сбросили в озеро, ученые обнаружили, что в озере есть теплые водовороты, текущие по часовой стрелке под его ледяным покровом. По словам Кураева, течения в центре вихрей были не такими сильными, что объясняет, почему в центрах этих колец все еще был толстый лед. Однако течение на краю водоворотов было сильным, что объясняет, почему лед на вершине этого края был тоньше, сказал он.

Датчики показали, что вода в этих водоворотах была на 2–4 градуса по Фаренгейту (на 1-2 градуса Цельсия) теплее окружающей воды. Более того, водовороты имели линзовидную форму — явление, обычное для океанов, но редкое для озер.

Связано: На фотографиях: Волны монстров

Обратите внимание, как ледяные кольца меняют форму с марта по апрель 2016 года. (Изображение от 17 апреля не соответствует другим масштабам.) (Изображение предоставлено: Лимнология и океанография, 2019; CC BY-NC-ND 4.0; спутниковые данные от MODIS и Landsat.)

Но почему эти водовороты вообще образовались? Согласно датчикам, которые находились под водой в течение 1,5 месяцев за один раз, а также спутниковым снимкам в тепловом инфракрасном диапазоне, казалось, что водовороты образовывались каждый раз, прежде чем озеро замерзло. Кроме того, по словам Кураева, сильные ветры, дующие в водах близлежащего Баргузинского залива, могут способствовать их формированию.

Он отметил, что пока эти ледовые кольца были обнаружены только в озере Байкал, а также в близлежащем озере Хубсугул в Монголии и Телецком озере, также в России.

Что касается водителей, которые пересекают замерзшее озеро на своих автомобилях, Кураев сказал, что, хотя трещины легко обнаружить, сами кольца труднее увидеть на уровне земли, потому что они покрыты льдом. В качестве государственной службы Кураев и его коллеги, которые в шутку называют себя Братством ледяных колец, написали буклеты, провели презентации и рассказали о кольцах Службе национальных парков и МЧС России.Они также регулярно обновляют свой веб-сайт о местонахождении вновь образовавшихся ледовых колец, которые видны на спутниковых снимках.

Исследование было опубликовано в журнале «Лимнология и океанография» в октябре 2019 года.

Примечание редактора: эта история была обновлена, чтобы отметить, что исследователи работают на озере с 2010 года. Более того, фургоны, застрявшие в озере, ледовые кольца не принадлежали исследователям.

Первоначально опубликовано на Live Science .

границ | Криоэлектронная томография выявляет сложную ультраструктурную организацию многоклеточных нитчатых бактерий Chloroflexota (Chloroflexi)

Введение

Существует только две группы нитчатых многоклеточных фототрофных бактерий: полифилетическая группа нитчатых цианобактерий и зеленых несернистых бактерий, которые принадлежат к типу Cyanobacteria и Chloroflexota ( Chloroflexi ), соответственно.Несмотря на то, что зеленые бактерии, не содержащие серы, и нитчатые цианобактерии являются филогенетически удаленными линиями, имеющими много различий в своей биологии, их фенотипы часто имеют много значительных сходств, адаптированных к конкретным экологическим нишам. Их многоклеточные филаменты часто образуют плотную «ткань» цианобактериальных матов или биопленок (Bauld, Brock, 1973; Doemel, Brock, 1977; Ley et al. , 2006; Gaisin et al., 2015). Помимо многоклеточной нитчатой ​​морфологии, клетки содержат (бактерио) хлорофиллы, которые необходимы для фототрофного образа жизни.Кроме того, они используют сравнимую поверхностно-зависимую «скользящую» подвижность для миграции через мат или образования агрегатов (Richardson and Castenholz, 1987; Hanada, 2014). Таким образом, нитчатые цианобактерии и зеленые несернистые бактерии, возможно, представляют собой пример конвергентной эволюции, которая привела к сходству фенотипов в филогенетически далеких клонах. Поэтому мы предположили, что изучение различий и сходств между этими двумя группами поможет понять эволюцию морфологических признаков, связанных с многоклеточными фототрофными бактериями.Чтобы иметь возможность сравнивать морфологию между этими двумя типами, сначала необходимо охарактеризовать их ультраструктурные особенности. Однако, в отличие от цианобактерий, клеточная архитектура бактерий Chloroflexota изучена плохо.

Зеленые несернистые бактерии — устаревший термин, используемый для определения фототрофных видов филума Chloroflexota . Большинство фототрофных бактерий Chloroflexota относятся к отряду Chloroflexales (Grouzdev et al., 2018; Thiel et al., 2018). Все бактерии Chloroflexales обладают безветвленной нитчатой ​​многоклеточной морфологией (Hanada, 2014). Их клетки окрашены, потому что они содержат бактериохлорофиллы и каротиноиды. Во всех случаях, кроме одного, не сообщалось о заметных ультраструктурных различиях между клетками отдельного многоклеточного филамента, поэтому остается неясным, происходит ли специализация клеток, как в случае многих видов цианобактерий. Oscillochloris chrysea , у которого терминальные клетки имеют морфологию, отличную от остальной части филамента, является единственным исключением (Горленко, Пивоварова, 1977; Garrity et al., 2001). Напротив, многие нитчатые цианобактерии обладают специализированными клетками, такими как вегетативные клетки, гетероцисты и акинеты. В целом, бактерии Chloroflexales , по-видимому, демонстрируют более простую организацию, чем цианобактерии, хотя эта точка зрения может исходить из методов, которые были применены для их визуализации.

Прогресс в криоэлектронной микроскопии сделал возможным новые успехи в исследовании биологии цианобактериальных клеток, что привело к открытию сложных макромолекулярных деталей (Dai et al., 2018; Раст и др., 2019; Weiss et al., 2019). На сегодняшний день ультраструктурные данные по бактериям Chloroflexales относительно немногочисленны. Действительно, открытие и описание ультраструктурных признаков у бактерий Chloroflexales было ограничено теми, которые легко обнаруживаются с помощью «традиционной» электронной микроскопии, такой как просвечивающая электронная микроскопия с отрицательным окрашиванием (ПЭМ) (Пирсон и Кастенхольц, 1974; Горленко и Пивоварова, 1977). ; Keppen et al., 1994; Hanada et al., 1995, 2002; Gaisin et al., 2019а, б). Хотя этот метод очень проницателен, он обычно не раскрывает более тонкую ультраструктурную сложность биологических образцов.

Криоэлектронная томография (крио-ЭТ) — это метод электронной микроскопии, который позволяет изучать макромолекулярные структуры с разрешением примерно 4 нм и в 3D, сохраняя при этом образец в почти естественном состоянии (Pilhofer et al. , 2010; Бек и Баумейстер, 2016). Cryo-ET ограничивается визуализацией тонких образцов (<700 нм). Таким образом, визуализация более толстых бактерий зависела от достижений в методах разжижения образцов, таких как измельчение крио-сфокусированным ионным пучком (крио-FIB) (Marko et al., 2007). Здесь мы использовали крио-ET и крио-FIB измельчение с последующим крио-ET для изучения ультраструктурной организации термофильных Roseiflexus castenholzii , термофильных Chloroflexus aggregans и недавно описанной мезофильной бактерии « Ca ». Viridilinea mediisalina »(Hanada et al., 1995, 2002; Gaisin et al., 2019a). Мы выбрали эти виды, потому что каждый из них представляет одну из трех основных линий в пределах порядка Chloroflexales : бактериохлорофилл a -содержащий член, родственный Roseiflexus , бактериохлорофилл a и c -содержащий Chlorofrellexated членов. и группа мезофильных бактериохлорофиллов a , c и d -содержащих членов с газовыми пузырьками. Представленные здесь результаты позволяют глубже понять клеточную биологию бактерий Chloroflexales , а также бактерий Chloroflexota в целом. В частности, эти данные предоставляют новую информацию для дискуссии вокруг организации клеточной оболочки в Chloroflexota (Sutcliffe, 2011; Cavalier-Smith and Chao, 2020), механизма их подвижности и прикрепления (Fukushima et al., 2016; Фукусима, 2016) и, наконец, о многоклеточной организации фототрофных бактерий.

Материалы и методы

Бактериальные культуры

Культура R. castenholzii DSM 13941 выращивалась в жидкой среде, состоящей из следующих компонентов (gl –1 ): 0,5 KH 2 PO 4 , 0,5 NH 4 Cl, 0,3 MgCl 2 ⋅6H 2 O, 0,5 KCl, 0,5 NaCl, 0,5 Na 2 SO 4 , 0,2 Na 2 S⋅9H 2 O, 0,3 NaHCO 3 , 2,0 дрожжевой экстракт, 3,0 HEPES. Среда была дополнена растворами витамина Вульфа (10 мл, –1 ) и микроэлементов (10 мл, –1 ) от ATCC. PH среды доводили до 7,7. Культуру поддерживали в стеклянной пробирке с завинчивающимися крышками и резиновыми перегородками при температуре 50,5 ° C при постоянном освещении (лампа накаливания).

Культура C. aggregans DSM 9485 выращивали в жидкой среде, состоящей из следующих компонентов (gl –1 ): 0,5 KH 2 PO 4 , 0,5 NH 4 Cl, 0,3 MgCl 2 ⋅6H 2 O, 0,5 KCl, 0,5 NaCl, 0,5 Na 2 SO 4 , 0.5 Na 2 S⋅9H 2 O, 0,3 NaHCO 3 , 1,5 дрожжевой экстракт, 3,0 HEPES. В среду добавляли 1000-кратный раствор микроэлементов (1 мл, –1 ) и цитрат железа (III) (0,006 г, –1 ), как описано для среды BG-11 (Rippka et al., 1979). PH среды доводили до 7,7. Культуру поддерживали в стеклянном флаконе с завинчивающимися крышками и резиновыми перегородками при температуре 55,0 ° C при постоянном освещении (лампа накаливания).

Культура « Ca . Viridilinea mediisalina »Kir15-3F выращивали в жидкой среде, состоящей из следующих компонентов (gl –1 ): 0,2 KH 2 PO 4 , 0,2 NH 4 Cl, 0,2 MgCl 2 ⋅6H 2 O, 0,3 KCl, 25,0 NaCl, 0,3 Na 2 SO 4 , 0,3 Na 2 S 2 O 3 0,7 Na 2 S⋅9H 2 O, 0,01 CaCl 2 ⋅2H 2 O, 0,6 NaHCO 3 , 0,1 ацетат натрия. В среду входили 100х витаминов МЕМ 10 мл на –1 , 1000х раствор микроэлементов (1 мл на –1 ) и цитрат железа (III) (0.006 г / л –1 ), как описано для среды BG-11 (Rippka et al., 1979). PH среды доводили до 9,26. Культуру поддерживали в стеклянных флаконах с завинчивающимися крышками и резиновыми перегородками при температуре 32 ° C при постоянном освещении [флуоресцентная трубка (JBL SOLAR COLOR T8)].

Для всех штаммов состояние культур (подвижность, целостность клеток, общий вид) проверяли под световым микроскопом Zeiss Axiovert 200M с объективами 10X – 63X NA 1. 4 DIC, а изображения собирали на Hamamatsu ORCA-ER CR4742-95 (1.3 k × 1 k, 6,45 мкм × 6,45 мкм).

Подготовка замороженно-гидратированных образцов

Погружное замораживание выполняли, как описано Weiss et al. (2017). 27 мкл бактериальных образцов смешивали с 5 мкл конъюгата белок А — 10 нМ золота (Cytodiagnostics Inc.). Образцы для измельчения крио-сфокусированным ионным пучком (крио-FIB) замораживали без золотых реперных маркеров. Каплю образца объемом 3,5 мкл наносили на покрытую углеродом ЭМ медную сетку (R2 / 1 или R2 / 2, Quantifoil), которая ранее подвергалась тлеющему разряду в течение 30–45 с при -25 мА с использованием Pelco easiGlowTM (Ted Pella, Inc.). Сетки погружали в жидкий этан-пропан (37% / 63%) с использованием Mark IV Vitrobot (Thermo Fisher Scientific). Пинцет устанавливали в Vitrobot (22,5 ° C, влажность 100%), и сетки промокали в течение 4–7 с с обеих сторон или только с обратной стороны путем установки тефлонового листа (вместо фильтровальной бумаги) на переднюю промокательную поверхность. колодка. Сетки хранили в жидком азоте.

Криофокусированное ионно-лучевое фрезерование

Измельчение

Cryo-FIB использовали для приготовления образцов замороженных погружением клеток R.castenholzii и « Ca . Viridilinea mediisalina », которую затем можно было визуализировать с помощью крио-ЭТ. « Ca . Viridilinea mediisalina »и R. castenholzii были покрыты электронно-плотным внеклеточным матриксом, что резко снизило контрастность изображений. По этой причине их клетки были предварительно обработаны крио-FIB, методом разжижения образца, который по существу не влияет на естественную сохранность образца (Marko et al., 2007). Томограммы C. aggregans были собраны на бактериальных клетках сразу после погружной заморозки, то есть без применения каких-либо конкретных подготовительных стадий.Наш рабочий процесс измельчения крио-ФИП был подробно описан ранее (Medeiros et al., 2018). Применяемые условия для измельчения крио-ФИП были такими же, как описано недавно (Rapisarda et al. , 2019). На сетку фрезеровалось до 7 ламелей. Сетки выгружали и хранили в жидком азоте.

Криоэлектронная томография

Крио-FIB-обработанные R. castenholzii и « Ca . Клетки Viridilinea mediisalina »и необработанные замороженных клеток C. aggregans визуализировали с помощью крио-ET.Изображения были записаны на TEM Titan Krios (Thermo Fisher Scientific), оборудованном фильтром изображения Quantum LS и K2 Summit (Gatan). Микроскоп работал при 300 кВ, а фильтры изображения — с шириной щели 30 эВ. Размер пикселя на уровне образца составлял 4,34 Å. Серия Tilt охватывает диапазон углов от -60 ° до + 60 ° с шагом 2 ° и дефокусировку от -10 до -8 мкм. Суммарная доза в серии наклона составила 110–140 э- / Å 2 . Наклонные серии и 2D-проекционные изображения были получены автоматически с помощью SerialEM (Mastronarde, 2005).Трехмерные реконструкции и сегменты были созданы с использованием пакета программ IMOD (Kremer et al., 1996). Все показанные томографические срезы были взяты из томограмм, которые ранее подвергались деконволюции с помощью фильтра Винера (Тегунов и Крамер, 2019).

Усреднение субтомограммы для S-слоя

Томограмма, используемая для усреднения субтомограммы, не была скорректирована с учетом передаточной функции контраста, поскольку это не было сочтено необходимым для достижения заданного конечного разрешения. Отдельные частицы были идентифицированы визуально и вручную смоделированы с открытыми контурами в 3dmod (Kremer et al., 1996). Ручной сбор частиц и первый этап усреднения субтомограмм были выполнены с помощью программного пакета PEET (Оценка частиц для электронной томографии) на томограммах, которые были разделены на 4 (1k реконструкций). Точки модели, начальный список мотивов и оси вращения частиц были сгенерированы с помощью программы stalkInit из пакета PEET (Nicastro, 2006). Такой подход позволил определить продольную ось каждой структуры как ось y частицы. Отдельные частицы ( n = 1498) были извлечены из томограммы « Ca ».Viridilinea mediisalina »с использованием ПЭТА. Окончательное среднее значение имело размер блока 48 пикселей по × и z и 68 пикселей по оси y для последнего шага данных, разделенных на 2 («2k реконструкция», конечный размер пикселя 9,88 Å). Одиночная частица была выбрана в качестве первой ссылки. Применялась цилиндрическая маска. Была активирована компенсация отсутствующего клина. Начальное среднее значение было выполнено для данных, которые были разделены на 4 («1k реконструкция»), а окончательные списки мотивов были затем переведены и использованы для выполнения нового цикла усреднения субтомограмм на томограммах, которые были разделены на 2 (2k реконструкций).Симметрия C6 была наложена на основе очевидного гексагонального расположения S-слоя и несимметризованного среднего. Кривые корреляции оболочки Фурье были рассчитаны в PEET для оценки разрешения. Модель для визуализации была создана из средних значений и наложена на томографические срезы в UCSF Chimera.

Доступность данных

Репрезентативная томограмма для каждого из трех штаммов была депонирована в EMDB: EMD-10808 (« Ca . Viridilinea mediisalina» Kir15-3F), EMD-10806 ( C.aggregans DSM 9485), EMD-10807 ( R. castenholzii DSM 13941). Среднее значение S-слоя было депонировано в EMDB под номером EMD-10804.

Сравнительный геномный и филогенетический анализ

Поиск с использованием семейства белков, соответствующих структуре клеточной стенки и биосинтезу внутриклеточных гранул, был выполнен в Annotree (AnnoTree v1.1.0; GTDB Bacteria Release 03-RS86) (Mendler et al., 2019). Филогеномный анализ Chloroflexales был проведен с использованием конкатенированного выравнивания 120 однокопийных генов филогенетических маркеров, полученных с помощью программного обеспечения GTDB-Tk version 0.3.3 (Chaumeil et al., 2019). Деревья максимального правдоподобия были рассчитаны с использованием IQ-Tree (Nguyen et al., 2015) с использованием модели LG + F + I + G4, рекомендованной ModelFinder (Kalyaanamoorthy et al., 2017), а поддержка ветвей была оценена с помощью UFBoot2 (Hoang et al., 2018). Список геномов, включенных в анализ, представлен в дополнительной таблице S1. Эволюция генов, кодирующих белки для биогенеза внутриклеточных телец, была изучена путем согласования деревьев белков, построенных на основе выравнивания белков GlpX, Ppk1, PhaC, BchK и GvpN, с деревом видов в рамках алгоритма экономии дупликации-переноса-потери. реализовано в Notung 2.9 (Stolzer et al., 2012). Алгоритм фиксирует дублирование, передачу и потери генов, приводящие к неконгруэнтности дерева, и выявляет все оптимальные решения, чтобы, наконец, сообщить полную и временную историю событий, дающую данные.

Результаты и обсуждение

Архитектура оболочки ячейки

“ Ca . Viridilinea mediisalina, C. aggregans и R. castenholzii , показали типичную нитевидную многоклеточную морфологию при наблюдении под оптическим микроскопом (рис. 1A).Репрезентативные срезы томограмм клеток на конце филамента показаны на рисунке 1B для каждого из трех штаммов. Мы реконструировали 34 томограммы « Ca . Viridilinea mediisalina », 24 томограммы C. aggregans и 31 томограмма R. castenholzii .

Рисунок 1. Сравнительный крио-ET клеточной оболочки бактерий Chloroflexales . Морфология штаммов в световом микроскопе (А) .Срезы томограмм терминальной клетки в многоклеточных филаментах (B) . Срезы томограмм средней части ячеек в « Ca . Viridilinea mediisalina » (C) , C. aggregans (D) , R. castenholzii (E) . Профиль плотности клеточной оболочки в средней части клеток в « Ca . Viridilinea mediisalina » (F) , C. aggregans (G) , R.castenholzii (H) . Срезы томограмм межклеточных переходов в “ Ca . Viridilinea mediisalina » (J) , C. aggregans (K) , R. castenholzii (L) . Срезы томограмм верхушки терминальных ячеек в « Ca . Viridilinea mediisalina » (M) , C. aggregans (N) , R. castenholzii (O) . Профиль плотности оболочки клетки в вершине « Ca .Viridilinea mediisalina »терминальная клетка (P) . S-слой на томограмме без крио-FIB (Q) . Усреднение субтомограммы S-слоя (R) и его изоповерхности (S) . Фибриллярный слой в средней части клеток в « Ca . Viridilinea mediisalina » (T) . В, цитоплазма в клетке; вне, внеклеточное пространство; ЦМ — цитоплазматическая мембрана; EL, внешний слой; ФЛ — фибриллярный слой; F, фибриллы; ИЖ, промежуточный слой; ПР, наружный слой; SL, S-слой; Sp, перегородка.Штанги: 10 мкм (A) , 50 нм (B – T) . Схема бактериального многоклеточного филамента (I) .

Архитектура многослойной клеточной оболочки Chloroflexota долгое время была предметом споров. Среди прочего, некоторые спорные моменты были сосредоточены вокруг некоторых микрофотографий, которые, возможно, не позволяют однозначно определять дискретные слои в клеточной оболочке (Cavalier-Smith, 2006; Sutcliffe, 2011; Cavalier-Smith and Chao, 2020).Наши томограммы показали, что как « Ca . Viridilinea mediisalina »и C. aggregans показали очевидную дидермоподобную клеточную оболочку, тогда как организация клеточной оболочки была другой у R. castelholzii . Из-за этой разницы и из-за отсутствия доказательств биохимических и генетических экспериментов мы решили только явно определить цитоплазматическую мембрану, присвоив более нейтральные термины другим слоям клеточной оболочки: промежуточному слою и внешнему слою.

Для « Ca . Viridilinea mediisalina »и C. aggregans , мы четко различали три слоя: цитоплазматическую мембрану, промежуточный слой и внешний слой (Рисунки 1C, D, F, G, J, K, M, N). Для этих двух штаммов промежуточный слой был характерен для пептидогликанового слоя грамотрицательной бактерии (Tocheva et al., 2011). Внешний вид внешнего слоя у этих двух штаммов напоминает внешний вид типичной грамотрицательной внешней мембраны. Однако внешний слой в с.aggregans оказался немного менее электронно-плотным, чем цитоплазматическая мембрана (Рисунки 1D, K, N). Напротив, для третьего штамма R . castelholzii , мы идентифицировали только две непрерывные плотности на клеточной оболочке: цитоплазматическую мембрану и внешний слой (Рисунки 1E, H, L, O). Примечательно, что внешний слой R . castelholzii напоминал промежуточный слой в C. aggregans и « Ca ». Viridilinea mediisalina ».

Сходство внешнего слоя R . castelholzii и промежуточный слой « Ca . Viridilinea mediisalina »и C. aggregans был четко виден на томограммах перегородки между клетками. Для всех трех штаммов томограммы показали, что каждая клетка была окружена собственной цитоплазматической мембраной (рис. 1J, K, L). В « Ca . Viridilinea mediisalina »и C. aggregans , промежуточный слой наблюдался как непрерывная плотность, которая окружала цитоплазматическую мембрану и слилась с образованием перегородки, разделяемой соседними клетками, как это обычно наблюдается для слоя пептидогликана (Фигуры 1J, K).Наконец, у этих же двух штаммов внешний слой проявлялся как третья и внешняя непрерывная плотность, которая была общей для всех клеток в филаменте и не была связана с перегородкой, образованной промежуточным слоем (Рисунки 1J, K). Такая внешняя мембрана, общая для всех клеток филамента, также наблюдается у нитчатых многоклеточных цианобактерий, которые классифицируются как бактерии дидерм (Hoiczyk and Baumeister, 1995; Nicolaisen et al., 2011). Напротив, в R. castenholzii внешний слой разветвлялся к перегородке аналогично промежуточному слою в « Ca .Viridilinea mediisalina »и C. aggregans (рис. 1L). Учитывая, что как толщина, так и организация перегородки внешнего слоя R. castenholzii напоминают слой пептидогликана « Ca ». Viridilinea mediisalina »и C. aggregans , можно предположить, что внешний слой в R. castenholzii представляет собой пептидогликан и что наружная мембрана отсутствует. Однако этот слой R. castenholzii не напоминал типично толстый пептидогликановый слой грамположительной бактерии (Beeby et al., 2013; Точева и др., 2013).

Хотя наши данные крио-ET предоставляют информативные указания, они не позволяют нам сделать выводы относительно архитектуры клеточной оболочки у этих трех штаммов Chloroflexus . Мы обнаружили, что клеточная оболочка « Ca . Viridilinea mediisalina »и C. aggregans обладали дидермоподобной архитектурой. Однако природа внешнего слоя этих штаммов остается загадочной. Ни биохимические, ни биоинформатические исследования не смогли выявить наличие типичной внешней мембраны у бактерий Chlorolexales .Например, липополисахариды (ЛПС) не были обнаружены у C. aurantiacus и O . trichoides (Knudsen et al., 1982; Meissner et al., 1988; Keppen et al., 2018). Более того, ключевые гены пути биосинтеза ЛПС не были обнаружены у Chlorolexales или у других видов Chloroflexota (Cavalier-Smith, 2006; Sutcliffe, 2010; Antunes et al., 2016; Keppen et al., 2018). Кроме того, мы также проанализировали генома Chloroflexota , включая недавно описанный « Ca .Viridilinea mediisalina »на наличие генов биосинтеза ЛПС (дополнительная таблица S1). Мы не нашли критических генов, таких как lpxC, lpxH, lpxB, lpxK, kdtA, kdsA , kdsB, lolA, lolB, lolCE и lolD (дополнительная таблица S1). Другим признаком архитектуры дидерм является комплекс Bam, который собирает β-бочку на внешней мембране грамотрицательных бактерий (Hagan et al., 2011). Мы не обнаружили никаких гомологов гена bamA в геномах анализируемых здесь штаммов (дополнительная таблица S1), что соответствует предыдущим сообщениям (Sutcliffe, 2010).В заключение, мы можем согласовать эти биохимические и биоинформатические данные с данными нашей микроскопии, заявив, что « Ca . Viridilinea mediisalina »и C. aggregans , возможно, имеют атипичную внешнюю мембрану, в которой отсутствуют многие важные особенности внешней мембраны грамотрицательных бактерий.

Мы были удивлены, увидев обнаженный слой пептидогликана и очевидное отсутствие внешней мембраны на томограммах R. castenholzii , в частности, потому что они принадлежат к тому же филогенетическому классу, что и два других штамма.Примечательно, что геномы R. castenholzii и Roseiflexus sp. RS-1 не содержит генов glgE, glgB, treS, treY treZ для биосинтеза разветвленного α-глюкана (дополнительная таблица S1), который был описан в O. trichoides (Keppen et al., 2018) . Эти гены присутствуют в « Ca . Viridilinea mediisalina »и C. aggregans , а также у других Viridilinea -родственных и других близкородственных видов Chloroflexus (дополнительная таблица S1).Таким образом, штаммы с наружным мембраноподобным слоем имеют пептидогликан, отличный от R. castenholzii . Необходимы дальнейшие исследования, чтобы расшифровать характеристики пептидогликана и то, как они связаны с архитектурой клеточной оболочки в Chloroflexales .

Внешние структуры оболочки клетки

Кроме того, все три штамма Chloroflexales обладали дополнительной внешней плотностью, которая покрывала внешний слой (Рисунки 1M – O).Эта плотность проявлялась в виде аморфного дополнительного слоя толщиной ~ 30–50 нм у C. aggregans и R. castenholzii и была особенно плотной у R. castenholzii (Рисунки 1N, O). В « Ca . Viridilinea mediisalina », однако два других типа структур покрывали внешний слой. Изогнутая вершина терминальных клеток часто была закрыта кристаллической сеткой (дополнительный рисунок S1). Виды сбоку этой структуры показали, что она образована двумя плоскими плотностями на расстоянии 24 нм друг от друга, на расстоянии 15 нм от внешнего слоя (рис. 1M, P).Мы выполнили усреднение субтомограмм, чтобы получить больше структурной информации для повторяющихся элементов этого слоя (дополнительный рисунок S1D). Учитывая, что на видах сверху была видна характерная гексамерная решетка, мы условно описываем ее как S-слой (рис. 1Q, R). Такая гексамерная решетка S-слоя была недавно описана, например, с использованием крио-ET и рентгеновской кристаллографии (Bharat et al., 2017). Среднее значение показало, что вершины гексамерных единиц образованы тримерными штырями (рис. 1S).S-слой образуется только на вершинах. В другом месте на многоклеточной нити « Ca . Viridilinea mediisalina », поверхность внешнего слоя была покрыта плотным фибриллярным слоем, который имел плоскую плотность на ~ 72 нм от внешнего слоя (Рисунок 1T и дополнительные рисунки S1A, B).

Это специфическая субклеточная локализация S-слоя в “ Ca . Viridilinea mediisalina ». Обычно S-слои полностью покрывают поверхность бактериальной клетки (Sleytr et al., 2014). Некоторые многоклеточные нитчатые цианобактерии обладают как S-слоем, так и фибриллярным внешним слоем (Hoiczyk, Baumeister, 1995; Hoiczyk, 1998). Однако у этих цианобактерий сосуществуют оба слоя, и фибриллярный слой покрывает S-слой.

В заключение крио-ЭТ показало, что « Ca . Viridilinea mediisalina »имеет более сложную клеточную оболочку, чем термофильные C. aggregans и R. castenholzii , у которых отсутствует S-слой. Мы предполагаем, что специфическая локализация S-слоя намекает на особую функцию терминальной клетки в многоклеточных филаментах.

Соединения ячейка-ячейка

Мы обнаружили, что R. castenholzii и « Ca . Viridilinea mediisalina »имела перегородочные каналы, соединяющие соседние клетки через их общую перегородку (рис. 2), аналогично перегородочным соединениям у многоклеточных нитевидных гетероцист-образующих цианобактерий (Merino-Puerto et al., 2010; Weiss et al., 2019). Четкие доказательства наличия каналов отсутствовали у C. aggregans . Интересно, что мы не обнаружили гомологов генов цианобактерий, ответственных за биогенез перегородок в геномах Chloroflexota (гены sepJ , fraC и fraD ).В отсутствие гомологов мы предлагаем использовать для этих структур название септальные каналы. В перегородочных каналах имелся прямой проход через клеточную стенку, который создавал углубление на цитоплазматической мембране обеих клеток (рис. 2А, В). В некоторых подробных примерах шляпообразный колпачок закрывает канал на внутренней стороне цитоплазматической мембраны (вставки на фиг. 2C, D). Каплевидные структуры наблюдались на перегородках цианобактерий, где они несут ответственность за закрытие каналов в ответ на стрессовые факторы (Weiss et al., 2019). Существование септальных каналов у Chloroflexales предполагает, что они также способны к быстрому межклеточному обмену метаболитов, подобно многоклеточным нитчатым цианобактериям. Эта гипотеза интересна, учитывая, что быстрый межклеточный обмен метаболитов является особенностью нитчатых цианобактерий, которые образуют метаболически специализированные клетки, такие как гетероцисты (Mullineaux et al., 2008). Однако у бактерий Chloroflexales не было сообщений о такой метаболической клеточной специализации.

Рисунок 2. Срезы томограмм перегородок между двумя “ Ca . Viridilinea mediisalina » (A) и две клетки R. castenholzii (B) . Сегментация клеточной оболочки и септальных каналов по томограммам « Ca . Viridilinea mediisalina » (C) и R. castenholzii (D) : желтая (CM1) и розовая поверхность (CM2) — цитоплазматические мембраны двух соседних клеток, черная поверхность (Ol и IL) — наружная и промежуточная. слой, красные стержни — перегородочные каналы.Вставки в (C, D) показывают репрезентативный вид каналов перегородки. Стрелки указывают на перегородки. (B, D) показаны различные томограммы R. castenholzii . Бары: 100 нм.

Массив пили и рецепторов

Бактерии Chloroflexales также обладают внеклеточными придатками, такими как пили. Ранее сообщалось о длинных пили у C. aggregans и C. islandicus (Fukushima, 2016; Gaisin et al., 2017). Здесь мы показываем, что они также присутствовали в р.castenholzii и « Ca . Viridilinea mediisalina ». Пили закреплялись рядом с перегородками в многоклеточных филаментах (Рисунки 3A – C), аналогично локализации пиля у нитчатых цианобактерий (Khayatan et al., 2015). Было показано, что пили цианобактерий ответственны за «скользящую» подвижность (Khayatan et al., 2015). Штаммы Chloroflexales также способны к поверхностно-зависимой «скользящей» подвижности, а также к активному образованию агрегатов (Hanada et al., 1995, 2002; Gaisin et al., 2019а). Таким образом, мы предполагаем, что пили могут опосредовать подвижность бактерий Chloroflexales .

У цианобактерий подвижность связана с пилями IV типа (Khayatan et al., 2015). Однако геномы « Ca . Viridilinea mediisalina, C. aggregans и R. castenholzii обладают только генами биогенеза пилей Tad (плотной адгезии), такими как rcpC-tadZABC , tadEEG и flp . В самом деле, отсутствует большинство критических генов для системы пилусов типа IV, таких как, например, pilA , pilC и pilG .Большинство бактерий полагаются на систему пилей IV типа для их подвижности (Burrows, 2012). Напротив, тадпили в основном описывались как придатки, которые обеспечивают поверхностную адгезию (Tomich et al., 2007). Эта идея подтверждается прямыми наблюдениями и отсутствием канонической АТФазы ретракции пилей в кластере генов tad (Burrows, 2012). Тем не менее было показано, что на определенном этапе жизненного цикла Caulobacter crescentus тад-пили могут втягиваться (Ellison et al., 2017). Основываясь на этих наблюдениях, мы предполагаем, что тадпили являются основным кандидатом на роль придатков, управляющих поверхностно-зависимой подвижностью у бактерий Chloroflexales .

На указание на активное подвижное поведение у Chloroflexales намекает присутствие структур, напоминающих массивы хеморецепторов, которые обычно связаны с хемотаксисом (Briegel et al., 2009). Мы обнаружили массив вблизи перегородок в « Ca ». Viridilinea mediisalina »(рис. 3D).Большой массив, по-видимому, закрепился в цитоплазматической мембране и простирался на ~ 35 нм в цитоплазме. Он напоминал типичные наборы бактериальных хеморецепторов (Briegel et al., 2009). Ранее Fukushima et al. предположили, что C. aggregans способен к аэротаксису (Fukushima, 2016), а система хемотаксиса в Chloroflexales была предсказана геномным анализом (Wuichet and Zhulin, 2010). Эти предыдущие результаты и изображения массивов, подобных хеморецепторам, представленные здесь, показывают, что бактерий Chloroflexales адаптированы к активной транслокации в окружающей их среде.

Рис. 3. Срезы томограмм клеток в R. castenholzii (A) , C. aggregans (B) , « Ca ». Viridilinea mediisalina » (C, D) . В, цитоплазма в клетке; вне, внеклеточное пространство; ЦМ — цитоплазматическая мембрана; CA, хеморецептороподобный массив; EL, внешний слой; F, фибриллы; ПР, наружный слой; П, пилус. Бары: 100 нм.

Внутриклеточные гранулы

Внутриклеточные органеллы в Chloroflexales ранее были идентифицированы с помощью ПЭМ с отрицательным окрашиванием, и мы смогли сравнить опубликованные микрофотографии с нашими данными крио-ET (Pierson and Castenholz, 1974; Keppen et al., 1994; Ханада и др., 1995, 2002; ван дер Меер и др., 2010; Гайсин и др., 2017, 2019а, б). На наших томограммах мы идентифицировали внутриклеточные тела, такие как запасающие гранулы, хлоросомы и газовые пузырьки, которые показаны на рисунке 4. Кроме того, мы также идентифицировали гены, которые отвечают за биогенез этих органелл (дополнительная таблица S1). Распространение этих генов обсуждается вместе с описанием органелл.

Рисунок 4. Сегментация томограмм р.castenholzii (A) , C. aggregans (B) и « Ca . Viridilinea mediisalina » (C) : розовый — цитоплазматическая мембрана, оранжевый — гранула полигидроксиалканоата, красный — гранула полифосфата, желтый — гранула третьего типа, зеленый — хлоросомы, синий — газовые везикулы, черный — мембранные везикулы. Обозначение штаммов на изображениях: R. castenholzii (Ros), C. aggregans (Chl), « Ca . Viridilinea mediisalina »(Вир).Внутриклеточные гранулы на срезах через томограммы R. castenholzii (D) и « Ca . Viridilinea mediisalina » (E) . Хлоросомы под КМ на срезах (вид сверху) через томограммы C. aggregans (F) и « Ca . Viridilinea mediisalina » (G) . Хлоросомы на срезах (вид в разрезе) на томограмме « Ca . Viridilinea mediisalina » (H) . Газовые везикулы на срезах через томограмму « Ca .Viridilinea mediisalina » (I, J) и профиль плотности мембраны везикул. Газовые везикулы и лист внутриклеточных филаментов на CryoEM image (K) . Внутриклеточные филаменты на срезах через томограмму R. castenholzii (M) . Внутриклеточные пузырьки на срезах через томограмму « Ca . Viridilinea mediisalina » (L) . В, цитоплазма в клетке; вне, внеклеточное пространство; CE, клеточная оболочка; Ch, хлоросома; G, третий тип гранул; GV — газовый пузырек; IF — внутриклеточные филаменты; MV — мембранный пузырек; PHA, гранулы полигидроксиалканоата; ПП, гранулы полифосфата; S, поверхность гранул полигидроксиалканоата.Бары: 100 нм.

Мы обнаружили накопительные гранулы у всех трех бактерий Chloroflexales (рисунки 4A – E). Мы выделили три типа гранул для хранения. Первый тип состоял из относительно больших сферических внутриклеточных телец (дополнительная таблица S2, до ~ 700 нм в « Ca . Viridilinea mediisalina») (рисунки 4D, E). Мы идентифицировали эти структуры как предполагаемые гранулы полигидроксиалканоата, поскольку они обычно демонстрируют характерную электронно-плотную поверхность при крио-ЭТ (Beeby et al., 2012), аналогично тому, что мы наблюдали (Рисунок 4E). Способность продуцировать полигидроксиалканоат подтверждается наличием гена phaC , который кодирует поли-3-гидроксиалканоат-полимеразу (Steinbüchel et al., 1992), в геномах порядка Chloroflexales (дополнительная таблица S1). Второй тип гранул представлял собой более электронно-плотные сферические внутриклеточные тельца (дополнительная таблица S2, до ∼280 нм в « Ca . Viridilinea mediisalina») и были обозначены как полифосфатные гранулы (рис. 4D), в соответствии с ними большинство электронно-плотных гранул в бактериальной клетке как на обычных ЭМ-, так и на криоЭМ-изображениях (Racki et al., 2017). Геномы всех Chloroflexales также содержат ген ppk1 полифосфаткиназы (дополнительная таблица S1), который участвует в биогенезе полифосфатов (Achbergerová and Nahálka, 2011). Мы идентифицировали третий тип гранул, которые выглядели такими же электронно-плотными, как гранулы полигидроксиалканоата, но не имели четкой и регулярной поверхности. В « Ca . Viridilinea mediisalina »и в C. aggregans эти гранулы были шаровидными, но менее сферическими и меньшего размера (дополнительная таблица S2, вплоть до ~ 150 нм в« ​​ Ca .Viridilinea mediisalina »), чем гранулы полигидроксиалканоата (рис. 4E). Кроме того, они показали иннервацию, исходящую внутрь от поверхности (рис. 4E). Мы предполагаем, что это могут быть гранулы гликогена (рисунки 4D, E), на основании присутствия гена glpX , кодирующего фруктозо-1,6-бисфосфатазу, в геномах Chloroflexales (дополнительная таблица S1) и опубликованных экспериментальных данных, указывающих на к хранению внутриклеточной полиглюкозы в C. aurantiacus (Holo and Grace, 1987).В R. castenholzii , в дополнение к гранулам полигидроксиалканоата и полифосфата, мы наблюдали более мелкие гранулы (дополнительная таблица S2, 38 ± 4 нм, до 45 нм), которые были очень однородными по размеру (рис. 4D). Этот третий тип гранул в R. castenholzii казался отличным от гранул третьего типа в C. aggregans и « Ca ». Viridilinea mediisalina », потому что они имели более правильный размер и форму.

Хлоросомы

Хлоросомы — это светособирающие органеллы, состоящие в основном из бактериохлорофилла и обеспечивающие экологическое преимущество в борьбе за световую энергию (Orf and Blankenship, 2013).Их присутствие в C. aggregans и « Ca . Viridilinea mediisalina »ранее была обнаружена с помощью ПЭМ с отрицательным окрашиванием (Hanada et al., 1995; Gaisin et al., 2019a). Биогенез хлоросом прогнозируется у многих видов Chloroflexales из-за присутствия гена bchK (дополнительная таблица S1), который кодирует синтазу бактериохлорофилла c (Frigaard et al., 2005). Как и ожидалось из-за отсутствия гена bchK в геноме, хлоросомы отсутствовали в R.castenholzii томограммы (рис. 4А). Хлоросомы в погружно-замороженных клетках C. aggregans и « Ca . Viridilinea mediisalina »можно было распознать по характерной эллипсоидальной форме (Рисунки 4F, G). « Ca . Viridilinea mediisalina »имела в среднем более широкие хлоросомы, чем C. aggregans (дополнительная таблица S2). Строчки и трубчатая организация хлоросом Chloroflexales были различимы на особенно подробных томограммах « Ca ».Viridilinea mediisalina »(Рисунок 4H). Эти полосы напоминали те, что наблюдались у зеленых серных бактерий (Oostergetel et al., 2007; Ganapathy et al., 2009). Наши томограммы показали, что хлоросомы непосредственно примыкают к цитоплазматической мембране (рис. 4H). Эти данные крио-ЭТ согласуются с ранее сообщенным прямым контактом хлоросом Chloroflexus с цитоплазматической мембраной, который был продемонстрирован с помощью обычного ПЭМ на поврежденных замораживанием клетках (Staehelin et al., 1978).Примыкание хлоросом к цитоплазматической мембране на наших томограммах контрастирует с ситуацией, наблюдаемой на крио-ET-изображениях зеленых серных бактерий, где было показано, что хлоросомы отделены от цитоплазматической мембраны плотностью 8 нм, которая, вероятно, соответствует Fenna- Комплексный белок Мэтьюза-Олсона (FMO) (Кудряшев и др., 2014). Как известно, комплекс FMO отсутствует в Chloroflexales .

Пузырьки газа

При визуализации с помощью ПЭМ с отрицательным окрашиванием пузырьки газа были обнаружены только в мезофильных Chloroflexales , представленных как « Ca .Viridilinea mediisalina »(Горленко, Пивоварова, 1977; Кеппен и др., 1994; Горленко и др., 2014; Гайсин и др., 2019а). Действительно, гены, которые имеют решающее значение для нормального биогенеза газовых пузырьков, gvpA и gvpN (Tashiro et al., 2016), присутствуют только в геномах мезофильных видов (дополнительная таблица S1). В « Ca . Viridilinea mediisalina », газовые пузырьки образовывали цилиндрические компартменты переменной длины, которые были закрыты коническими концами с небольшими закругленными кончиками (Рисунки 4I – K и дополнительная таблица S2).На ясных примерах мы могли различить «ребра» белков Gvp на поверхности газовых пузырьков (рис. 4J), которые имели периодичность 4,8 ± 0,5 нм, что сравнимо с 4,6 нм, о которых сообщалось ранее (McMaster et al., 1996). . Газовые пузырьки в « Ca . Viridilinea mediisalina »располагались вблизи перегородок, как и другие мезофильные Chloroflexales (Горленко, Пивоварова, 1977; Кеппен и др., 1994; Горленко и др., 2014). Несмотря на специфическую локализацию газовых пузырьков в перегородке, они, по-видимому, не были связаны с цитоплазматической мембраной перегородки « Ca ».Viridilinea mediisalina ».

Внутриклеточные нити

Интересно, что мы также обнаружили массивы нитей, образующих листы, которые вместе возникли и были выровнены вдоль газовых пузырьков, а также рядом с лопнувшими пузырьками (Рисунок 4K). Эти нити были волнистыми, с интервалом около 18 нм между последовательными пиками. Соседние волокна в листе находились на расстоянии ~ 18 нм друг от друга. Кроме того, мы обнаружили другой тип волокон у R. castenholzii (рис. 4К). Эти нити образовывали листы около перегородки, а также длинные веретена вдоль цитоплазматической мембраны (рис. 4M).

Везикулы внутриклеточной мембраны

Наконец, мы обнаружили одно- и двухмембранные внутриклеточные везикулы во всех трех проанализированных штаммах (рисунок 4L и дополнительный рисунок S2). Похоже, что везикулы с одной мембраной были сформированы путем инвагинации цитоплазматической мембраны, как видно, например, у C. aggregans (дополнительный рисунок S2B). Мембранные везикулы имели самые разные размеры. Мы предполагаем, что эти внутриклеточные мембранные везикулы являются типичным ультраструктурным признаком Chloroflexales , поскольку они присутствовали во всех клетках, независимо от условий роста, т.е.е. как у мезофильных, так и у термофильных видов.

Соображения эволюции

Внутриклеточные органеллы, такие как накопительные гранулы, хлоросомы и газовые везикулы, были легко прослежены в Chloroflexales , используя не только электронную микроскопию, но и сравнительный геномный анализ. Мы размышляли об эволюции биологических признаков клеток Chloroflexales , анализируя распределение описанных ультраструктурных особенностей и соответствующих генов среди видов Chloroflexales .В связи с этим мы сначала реконструировали филогенетические отношения между бактериями Chloroflexota , используя 120 однокопийных генов филогенетических маркеров из набора данных GTDB (рис. 5A). Во-вторых, мы реконструировали филогенетические деревья для белков GlpX, Ppk1, PhaC, BchK и GvpN (дополнительные рисунки S3 – S7). Распределение соответствующих генов среди геномов Chloroflexota (рисунок 5B и дополнительная таблица S1) уже обсуждалось выше в разделах, посвященных хранящим гранулам, хлоросомам и газовым пузырькам.В-третьих, мы выполнили анализ согласования дерева генов и видов на основе филогенетического дерева GTDB и деревьев белков GlpX, Ppk1, PhaC, BchK и GvpN с использованием программного обеспечения Notung. Вероятность, полученная из анализа согласования, позволила нам реконструировать вероятное наследование генов, относящихся к внутриклеточным органеллам (рис. 5А). Наконец, мы суммировали три основных морфотипа Chloroflexales на основе наших результатов и ранее опубликованных данных ПЭМ (рис. 5C).

Рис. 5. Филогенетическое дерево максимального правдоподобия (черная линия), полученное на основе конкатенированного выравнивания 120 генов филогенетических маркеров с одной копией (набор данных GTDB) (A) . Список геномов, включенных в филогенетический анализ, представлен в дополнительной таблице S1. Распределение генов g lpX , ppk1 , phaC , bchK и gvpN , которые кодируют белки для биогенеза внутриклеточных тел, по типу Chloroflexota , тип (B) .Наследование ключевых генов показано на филогенетическом дереве (цветные линии). Пунктирные цветные линии обозначают гипотетическое наследование клады от общего предка. Схематическое изображение основных морфотипов Chloroflexales (C) .

Мы обнаружили, что гены гранул полифосфата и гликогена не являются уникальными для фототрофных бактерий Chloroflexota . Ген ppk1 был обнаружен в геномах классов Ktedonobacteria , Anaerolineae , Caldilineae (Рисунок 5B и дополнительная таблица S1) и унаследован вертикально от общего предка этих четырех классов согласно филогенетическому анализу. (Дополнительный рисунок S3).Распределение гена glpX и результат согласования дерева генов и видов также указали на вертикальное наследование этого гена с независимыми потерями в некоторых группах, например, Dehalococcoidia (рис. 5A). Однако только бактерий Chloroflexales обладают phaC , критическим геном биогенеза гранул полигидроксиалканоата (рис. 5 и дополнительная таблица S1). На филогенетическом дереве последовательности белка PhaC Chloroflexales сгруппированы внутри клады, образованной бактериями филума Firmicutes (дополнительный рисунок S4).Таким образом, наиболее вероятным сценарием является приобретение генов, ответственных за синтез полигидроксиалканоатов Chloroflexales путем горизонтальной передачи их общему предку от древнего представителя типа Firmicutes (рисунок 5A и дополнительный рисунок S4). Горизонтальный перенос гена phaC в линии Chloroflexales также был сделан с помощью анализа согласования дерева генов и видов. Биогенез и деградация полигидроксиалканоатов в бактериях Chloroflexales в первую очередь зависят от цикла диэлементов и связаны с их фотомиксотрофным метаболизмом (Klatt et al., 2013; Ким и др., 2015). Следовательно, этот признак важен для адаптации бактерий Chloroflexales к фототрофному метаболизму.

Хлоросомы, еще один связанный с фототрофией признак, отсутствуют у бактерий, родственных Roseiflexus , которые образуют базальную филогенетическую ветвь внутри клады Chloroflexales (рис. 5). Гены биогенеза хлоросом были приобретены общим предком бактерий, родственных Chloroflexus и Viridilinea , в соответствии с нашим анализом согласования дерева генов и видов (рис. 5A) и распределением генов csm и bchK (дополнительные Таблица S1).Приобретение этого морфологического признака увеличило приспособляемость бактерий, родственных Chloroflexus и Viridilinea , к фототрофным экологическим нишам, поскольку хлоросомы обеспечивают существенные дополнительные возможности поглощения света клеткой (Orf and Blankenship, 2013).

Наиболее сложный внутриклеточный состав наблюдался в кладе мезофильных видов, родственных Viridilinea (рис. 5C). Мезофильные бактерии, родственные Viridilinea , имеют запасающие гранулы, хлоросомы и, кроме того, газовые пузырьки (рис. 5C).Газовые везикулы описаны только у мезофильных Chloroflexales (Garrity et al., 2001; Hanada, 2014; Grouzdev et al., 2018). Гены биогенеза газовых везикул присутствовали только в геномах видов, родственных Viridilinea , то есть они отсутствовали в других Chloroflexota (рисунок 5B и дополнительная таблица S1). Мы предполагаем, что гены биогенеза газовых везикул были приобретены общим предком бактерий, родственных Viridilinea , от древнего представителя Alphaproteobacteria , согласно результатам филогенетического (дополнительный рисунок S5) анализов согласования дерева видов.Газовые пузырьки увеличивают плавучесть клеток в воде, тем самым позволяя им мигрировать через водную среду, чтобы достичь световой зоны (Walsby, 1994). Следовательно, газовые пузырьки могут способствовать распространению мезофильных бактерий Chloroflexales в освещенной водной среде.

Фототрофия — наиболее значимая синапоморфия, приобретенная общим предком нынешних бактерий Chloroflexales (Shih et al., 2017; Ward et al., 2018). Было высказано предположение, что общий предок Chloroflexales был способен к аэробному дыханию до приобретения фотосинтетических генов (Shih et al., 2017; Ward et al., 2018). Виды Roseiflexus и Chloroflexus также способны переключать свой аноксигенный фототрофный метаболизм на аэробное дыхание (Pierson, Castenholz, 1974; Hanada et al., 1995, 2002; Gaisin et al., 2017). Напротив, виды, родственные Viridilinea , являются облигатными аноксигенными фототрофами и облигатными анаэробами (Keppen et al., 1994; Gorlenko et al., 2014; Gaisin et al., 2019a, b). Мы предполагаем, что три описанных выше события приобретения значительно способствовали эволюции мезофильных родственных Viridilinea бактерий, строго специализирующихся на фототрофии.Возможно, морфологическая сложность этой бактериальной линии возникла в связи с ее приспособленностью к фототрофному образу жизни. Как видно выше, « Ca . Viridilinea mediisalina »имеет более сложную клеточную оболочку, чем C. aggregans и R. castenholzii , поскольку она обладает, например, S-слоем. Таким образом, мезофильные бактерии, родственные Viridilinea , представляют собой интересный пример среди аноксигенных фототрофных бактерий семейств, которые развили метаболическую специализацию наряду со сложной морфологией.

Заключение

Мы обнаружили удивительную степень ультраструктурной сложности многоклеточных нитчатых аноксигенных фототрофных бактерий, принадлежащих к отряду Chloroflexales . Наши данные крио-ET выявили много интересных ультраструктурных особенностей Chloroflexales , предоставив более подробную информацию о ранее известных структурах, а также обнаружив новые (рис. 6). Все клетки имеют цитоплазмы, заполненные внутриклеточными органеллами. Они содержали органеллы, связанные с фототрофным метаболизмом (запасающие гранулы и хлоросомы), миграцию в водной среде (газовые пузырьки и хеморецепторные массивы) и структуры с неизвестными функциями (внутриклеточные мембранные везикулы и нитчатые листы).В целом мы обнаружили, что мезофильный Chloroflexales имеет особенно сложную морфологию. Более того, клеточная оболочка « Ca . Viridilinea mediisalina »обладала чертами, характерными для многоклеточных микроорганизмов, таких как нитчатые цианобактерии, т.е. отличной морфологией терминальных клеток, общей внешней мембраны и перегородочных каналов. Кроме того, примечательно то, что пили закрепляются близко к перегородке, аналогично паттерну закрепления пилей у нитчатых цианобактерий.И организация клеточной оболочки, и разнообразие внутриклеточных телец указывают на то, что мезофильный Chloroflexales демонстрирует особенно сложную клеточную биологию. В заключение, мы надеемся, что ультраструктурные детали, которые мы описали в бактериях Chloroflexales , послужат стимулом для дальнейших исследований клеточной биологии этих замечательных микроорганизмов, учитывая, что функция и эволюция многих обнаруженных морфологических признаков остаются загадочными у этого разнообразного и широко распространенного бактерии. группа.

Рис. 6. Новый взгляд на клеточную ультраструктурную организацию бактерий Chloroflexales .

Заявление о доступности данных

Наборы данных, представленные в этом исследовании, можно найти в онлайн-репозиториях. Названия репозитория / репозиториев и номера доступа можно найти в статье / Дополнительных материалах.

Авторские взносы

ВАГ и РК выполнили экспериментальную работу, обработали данные крио-ЭТ и написали рукопись.DG провела сравнительный геномный анализ и филогенетический анализ. Координировали проект MP, VAG и VMG. Все авторы обсудили результаты и одобрили представленный вариант рукописи.

Финансирование

MP был поддержан Европейским исследовательским советом (679209), Швейцарским национальным научным фондом (31003A_179255) и фондом NOMIS. VAG был поддержан грантом FEMS на исследования и обучение (FEMS-GO-2017-021). Авторы НИЦ биотехнологии поддержаны Российским фондом фундаментальных исследований (научные проекты №19-04-00423).

Конфликт интересов

Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могут быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Благодарности

VAG благодарит Федерацию европейских микробиологических обществ, которая поддержала исследование грантом на исследования и обучение для крио-ET в лаборатории Pilhofer в ETH Zürich. VAG благодарит команду Pilhofer Lab за обмен техническими знаниями и обучение.Мы благодарны доктору Михалу Коближеку за его поддержку и рекомендации. VAG также хотел бы поблагодарить своих коллег из лаборатории Коближека в Алгатехе за их критическое прочтение рукописи. Мы подтверждаем доступ к инструментам на платформе визуализации ETH ScopeM.

Дополнительные материалы

Дополнительные материалы к этой статье можно найти в Интернете по адресу: https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fmicb.2020.01373/full#supplementary-material

Список литературы

Антунес, Л.C., Poppleton, D., Klingl, A., Criscuolo, A., Dupuy, B., Brochier-Armanet, C., et al. (2016). Филогеномный анализ подтверждает наследственное присутствие LPS-внешних мембран у Firmicutes. Элиф 5, e14589. DOI: 10.7554 / eLife.14589

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Баулд Дж. И Брок Т. Д. (1973). Экологические исследования Chloroflexis , скользящей фотосинтетической бактерии. Archiv für Mikrobiologie 92, 267–284.DOI: 10.1007 / BF00409281

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Бек, М., Баумейстер, В. (2016). Криоэлектронная томография: может ли она раскрыть молекулярную социологию клеток в атомных деталях? Trends Cell Biol. 26, 825–837. DOI: 10.1016 / j.tcb.2016.08.006

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Биби М., Чо М., Стуббе Дж. И Дженсен Дж. Дж. (2012). Рост и локализация гранул полигидроксибутирата у ralstonia eutropha. J. Bacteriol. 194, 1092–1099. DOI: 10.1128 / jb.06125-11

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Бхарат, Т.А., Курейсаите-Сизиене, Д., Харди, Г.Г., Эллен, В.Й., Девант, Дж. М., Хаген, В. Дж. И др. (2017). Структура гексагонального поверхностного слоя на клетках Caulobacter crescentus . Нац. Microbiol. 2, 1–6. DOI: 10.1038 / nmicrobiol.2017.59

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Бригель, А., Ортега, Д. Р., Точева, Э. И., Вуич, К., Ли, З., Чен, С. и др. (2009). Универсальная архитектура массивов бактериальных хеморецепторов. Proc. Natl. Акад. Sci. 106, 17181–17186. DOI: 10.1073 / pnas.01106

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Кавальер-Смит, Т. (2006). Укоренение древа жизни с помощью анализа переходов. Biol. Прямой. 1, 19.

Google Scholar

Кавальер-Смит, Т., и Чао, Э. Э. (2020).Многодоменные рибосомные белковые деревья и планктобактериальное происхождение неомура (эукариоты, архебактерии). Protoplasma 257, 621–753. DOI: 10.1007 / s00709-019-01442-7

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Шаумей П. А., Муссиг А. Дж., Гугенгольц П. и Паркс Д. Х. (2019). GTDB-Tk: набор инструментов для классификации геномов с помощью базы данных таксономии генома. Bioinformatics doi: 10.1093 / bioinformatics / btz848 [Epub до печати],

CrossRef Полный текст | PubMed Аннотация | Google Scholar

Дай, В., Chen, M., Myers, C., Ludtke, S.J., Pettitt, B.M., King, J.A., et al. (2018). Визуализация отдельного RuBisCO и его сборки в карбоксисомы в морских цианобактериях с помощью криоэлектронной томографии. J. Mol. Биол. 430, 4156–4167. DOI: 10.1016 / j.jmb.2018.08.013

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Доэмел, В. Н., Брок, Т. Д. (1977). Структура, рост и разложение слоистых водорослевых бактериальных матов в щелочных горячих источниках. заявл.Environ. Microbiol. 34, 433–452. DOI: 10.1128 / aem.34.4.433-452.1977

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Эллисон, К. К., Кан, Дж., Диллард, Р. С., Кизела, Д. Т., Дюкре, А., Берн, К. и др. (2017). Обструкция ретракции пилуса стимулирует обнаружение бактериальной поверхности. Наука. 358, 535–538. DOI: 10.1126 / science.aan5706

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Фригаард, Н. У., Ли, Х., Мартинссон, П., Дас, С.К., Франк, Х. А., Аартсма, Т. Дж. И др. (2005). Выделение и характеристика каротиносом из мутанта Chlorobium tepidum без c бактериохлорофилла. Фотосинт. Res. 86, 101–111.

Google Scholar

Фукусима, С. И. (2016). Анализ скользящей подвижности нитчатой ​​бактерии Chloroflexus aggregans. Докторская диссертация, Токийский столичный университет, Токио.

Google Scholar

Фукусима, С.И., Морохоши, С., Ханада, С., Мацуура, К., и Харута, С. (2016). Скользящая подвижность, управляемая отдельными движениями клеточной поверхности у многоклеточной нитчатой ​​бактерии Chloroflexus aggregans . FEMS Microbiol. Lett. 363, 1–5. DOI: 10.1093 / femsle / fnw056

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Гайсин В.А., Бурганская Е.И., Груздев Д.С., Ашихмин А.А., Кострикина Н.А., Брянцева И.А. и др. (2019a). « Candidatus Viridilinea mediisalina», новая фототрофная бактерия Chloroflexi из сибирского содового озера. FEMS Microbiol. Lett. 366, fnz043. DOI: 10.1093 / femsle / fnz043

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Гайсин В.А., Бурганская Е.И., Груздев Д.С., Осипова Н.С., Ашихмин А.А., Синетова М. и др. (2019b). « Candidatus Oscillochloris fontis»: новая мезофильная фототрофная бактерия Chloroflexota, принадлежащая к повсеместно распространенному роду Oscillochloris . FEMS Microbiol. Lett. 366, fnz097. DOI: 10.1093 / femsle / fnz097

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Гайсин В. А., Калашников А. М., Груздев Д. С., Сухачева М. В., Кузнецов Б. Б., Горленко В. М. (2017). Chloroflexus islandicus sp. nov., термофильная нитчатая аноксигенная фототрофная бактерия из гейзера Строккур (Исландия). Внутр. J. Syst. Evol. Microbiol. 67, 1381–1386. DOI: 10.1099 / ijsem.0.001820

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Гайсин, В.А., Калашников, А. М., Сухачева, М. В., Намсараев, З. Б., Бархутова, Д. Д., Горленко, В. М. и др. (2015). Нитчатые аноксигенные фототрофные бактерии из цианобактериальных матов горячих источников Алла (Баргузинская долина, Россия). Экстремофилы 19, 1067–1076. DOI: 10.1007 / s00792-015-0777-7

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ganapathy, S., Oostergetel, G. T., Wawrzyniak, P. K., Reus, M., Chew, A. G. M., Buda, F., et al. (2009). Чередующиеся син-антибактериохлорофиллы образуют концентрические спиральные нанотрубки в хлоросомах. PNAS. 106, 8525–8530. DOI: 10.1073 / pnas.04106

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Гаррити, Г. М., Холт, Дж. Г., Кастенхольц, Р. В., Пирсон, Б. К., Кеппен, О. И., и Горленко, В. М. (2001). «Тип BVI. Chloroflexi phy. ноя »в Bergey’s Manual of Systematic Bacteriology , ред. Д. Р. Бун, Р. В. Кастенхольц и Г. М. Гаррити (Нью-Йорк, штат Нью-Йорк: Springer), 427–446. DOI: 10.1007 / 978-0-387-21609-6_23

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Горленко, В.М., Брянцева И.А., Калашников А.М., Гайсин В.А., Сухачева М.В., Груздев Д.С. и др. (2014). Candidatus «Chloroploca asiatica» gen. nov., sp. nov., новая мезофильная нитчатая аноксигенная фототрофная бактерия. Microbiol. (Российская Федерация. 83, 838–848. Doi: 10.1134 / S0026261714060083

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Горленко В. М., Пивоварова Т. А. (1977). О принадлежности сине-зеленой водоросли Oscillatoria coerulescens Gicklhorn, 1921 к новому роду хлоробактерий Oscillochloris nov.ген. Изв. Акад. АН СССР. Биологическая 3, 396–409.

Google Scholar

Груздев Д. С., Рысина М. С., Брянцева И. А., Горленко В. М., Гайсин В. А. (2018). Проект геномных последовательностей « Candidatus Chloroploca asiatica» и « Candidatus Viridilinea mediisalina», представителей-кандидатов отряда Chloroflexales : филогенетические и таксономические последствия. Стенд. Genomic Sci. 13, 24.

Google Scholar

Хэган, К.Л., Силхави, Т. Дж., И Кане, Д. (2011). Сборка белка мембраны β-ствола комплексом Bam. Annu. Rev. Biochem. 80, 189–210. DOI: 10.1146 / annurev-biochem-061408-144611

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ханада, С. (2014). «Тип Chloroflexi, семейство Chloroflexaceae и родственные фототрофные семейства Oscillochloridaceae и Roseiflexaceae » в The Prokaryotes , eds E.Розенберг, Э. Ф. ДеЛонг, С. Лори, Э. Стакебрандт и Ф. Томпсон (Берлин: Springer), 515–532. DOI: 10.1007 / 978-3-642-30194-0

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ханада, С., Хираиши, А., Шимада, К., и Мацуура, К. (1995). Chloroflexus агрегатный sp. nov., Нитчатая фототрофная бактерия, которая за счет активного скользящего движения образует плотные клеточные агрегаты . Внутр. J. Syst. Бактериол. 45, 676–681. DOI: 10.1099 / 00207713-45-4-676

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ханада, С., Такаичи, С., Мацуура, К., и Накамура, К. (2002). Roseiflexus castenholzii gen. nov., sp. nov., термофильная, нитчатая фотосинтезирующая бактерия, у которой отсутствуют хлоросомы. Внутр. J. Syst. Evol. Microbiol. 52, 187–193. DOI: 10.1099 / 00207713-52-1-187

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Хоанг Д. Т., Черномор О., Фон Хэзелер А., Минь Б. К. и Винь Л. С. (2018). UFBoot2: улучшение приближения сверхбыстрой начальной загрузки. Мол. Биол. Evol. 35, 518–522. DOI: 10.1093 / molbev / msx281

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Hoiczyk, E. (1998). Структурно-биохимический анализ влагалища Phormidium uncinatum . J. Bacteriol. 180, 3923–3932.

Google Scholar

Холо, Х. и Грейс, Д. (1987). Синтез полиглюкозы в Chloroflexus aurantiacus изучен методом 13С-ЯМР. Arch. Microbiol. 148, 292–297.DOI: 10.1007 / BF00456707

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Каляанамурти, С., Мин, Б.К., Вонг, Т.К., фон Хезелер, А., и Джермейн, Л.С. (2017). ModelFinder: быстрый выбор модели для точных филогенетических оценок. Нац. методы. 14, 587–589. DOI: 10.1038 / nmeth.4285

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Кеппен О.И., Ивановский Р.Н., Стрешинская Г.М., Лебедева Н.В., Шашков А.С., Дмитренок А.S., et al. (2018). Клеточная стенка нитчатой ​​аноксигенной фототрофной бактерии Oscillochloris trichoides . Microbiol. (Соединенное Королевство) 164, 57–64. DOI: 10.1099 / mic.0.000590

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Хаятан, Б., Микс, Дж. К., и Риссер, Д. Д. (2015). Доказательства того, что модифицированная пилусоподобная система типа IV обеспечивает подвижную подвижность и секрецию полисахаридов у нитчатых цианобактерий. Мол. Microbiol. 98, 1021–1036. DOI: 10.1111 / mmi.13205

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ким, Ю. М., Новак, С., Олсен, М. Т., Бекрафт, Э. Д., Вуд, Дж. М., Тиль, В. и др. (2015). Метаболомический анализ хлорофототрофного микробного мата горячих источников приводит к новым гипотезам метаболизма членов сообщества. Фронт. Microbiol. 6: 209. DOI: 10.3389 / fmicb.2015.00209

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Клатт, К.Г., Лю З., Людвиг М., Кюль М., Йенсен С. И., Брайант Д. А. и др. (2013). Временная метатранскриптомическая структура у фототрофного Chloroflexi , населяющего микробный мат в геотермальном источнике. ISME J. 7, 1775–1789. DOI: 10.1038 / ismej.2013.52

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Кнудсен, Э., Янцен, Э., Брин, К., Ормерод, Дж. Г., и Сиревог, Р. (1982). Количественные и структурные характеристики липидов в Chlorobium и Chloroflexus . Arch. Microbiol. 132, 149–154. DOI: 10.1007 / BF00508721

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Кремер, Дж. Р., Мастронард, Д. Н., и Макинтош, Дж. Р. (1996). Компьютерная визуализация данных трехмерного изображения с использованием IMOD. J. Struct. Биол. 116, 71–76. DOI: 10.1006 / jsbi.1996.0013

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Кудряшев М., Актоудианаки А., Дедоглоу Д., Штальберг Х., Циотис Г. (2014).Ультраструктура Chlorobaculum tepidum , выявленная с помощью криоэлектронной томографии. Биохим. Биофиз. Acta — Bioenerg. 1837, 1635–1642. DOI: 10.1016 / j.bbabio.2014.06.002

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Лей, Р. Э., Харрис, Дж. К., Уилкокс, Дж., Спир, Дж. Р., Миллер, С. Р., Бебут, Б. М. и др. (2006). Неожиданное разнообразие и сложность гиперсоленого микробного мата Guerrero Negro. заявл. Environ. Microbiol. 72, 3685–3695.DOI: 10.1128 / AEM.72.5.3685-3695.2006

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Марко М., Шейх К., Шалек Р., Франк Дж. И Маннелла К. (2007). Разжижение замороженных гидратированных биологических образцов сфокусированным ионным пучком для криоэлектронной микроскопии. Нац. Методы 4, 215–217. DOI: 10.1038 / nmeth2014

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Макмастер Т.Дж., Майлз М.Дж. и Уолсби А.Э. (1996). Прямое наблюдение вторичной структуры белка в газовых пузырьках с помощью атомно-силовой микроскопии. Biophys. J. 70, 2432–2436. DOI: 10,1016 / s0006-3495 (96) 79813-2

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Медейрос, Дж. М., Бёк, Д., Вайс, Г. Л., Кугер, Р., Вепф, Р. А., и Пилхофер, М. (2018). Надежный рабочий процесс и оборудование для измельчения крио-сфокусированным ионным пучком образцов для электронной криотомографии. Ультрамикроскопия. 190, 1–11. DOI: 10.1016 / j.ultramic.2018.04.002

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Мейснер, Дж., Краусс, Дж. Х., Юргенс, У. Дж., И Векессер, Дж. (1988). Отсутствие характерного липополисахарида клеточной стенки у фототрофной бактерии Chloroflexus aurantiacus . J. Bacteriol. 170, 3213–3216.

Google Scholar

Мендлер К., Чен Х., Паркс Д. Х., Лобб Б., Хуг Л. А. и Докси А. С. (2019). AnnoTree: визуализация и исследование функционально аннотированного микробного древа жизни. Nucleic. Кислоты. Res. 47, 4442–4448. DOI: 10.1093 / нар / gkz246

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Мерино-Пуэрто, В., Марискаль, В., Муллино, К. В., Эрреро, А., Флорес, Э. (2010). Fra белки, влияющие на целостность филаментов, диазотрофию и локализацию перегородочного белка SepJ в цианобактериях, образующих гетероцисты Anabaena sp. Мол. Microbiol. 75, 1159–1170. DOI: 10.1111 / j.1365-2958.2009.07031.x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Mullineaux, C.W., Mariscal, V., Nenninger, A., Khanum, H., Herrero, A., Flores, E., et al. (2008). Механизм межклеточного молекулярного обмена у цианобактерий, образующих гетероцисты. EMBO J. 27, 1299–1308. DOI: 10.1038 / emboj.2008.66

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Нгуен, Л. Т., Шмидт, Х. А., Фон Хезелер, А., и Мин, Б. К. (2015). IQ-TREE: быстрый и эффективный стохастический алгоритм для оценки филогении максимального правдоподобия. Мол. Биол.Evol. 32, 268–274. DOI: 10.1093 / molbev / msu300

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Николайзен, К., Штраус, М., Флорес, Э., Шлейф, Э., Кюльбрандт, В., Вилк, Л. и др. (2011). Непрерывность внешней мембраны и образование септосом между вегетативными клетками в филаментах Anabaena sp. PCC 7120. Ячейка. Microbiol. 13, 1744–1754. DOI: 10.1111 / j.1462-5822.2011.01655.x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Остергетель, Г.Т., Реус, М., Гомес Макео Чу, А., Брайант, Д. А., Бокема, Э. Дж., И Хольцварт, А. Р. (2007). Методами криоэлектронной микроскопии исследована дальнодействующая организация бактериохлорофилла в хлоросомах Chlorobium tepidum . FEBS Lett. 581, 5435–5439. DOI: 10.1016 / j.febslet.2007.10.045

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Пирсон, Б. К., и Кастенхольц, Р. В. (1974). Фототрофная планирующая нитчатая бактерия горячих источников, Chloroflexus aurantiacus , gen. и sp. ноя . Arch. Microbiol. 100, 5–24. DOI: 10.1007 / BF00446302

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Пилхофер М., Ладинский М. С., МакДауэлл А. В. и Дженсен Г. Дж. (2010). «TEM бактерий: новые открытия криомикроскопии», в Methods in Cell Biology , ed. МИСТЕР. Томас (Кембридж, Массачусетс: Academic Press), 21–45. DOI: 10.1016 / S0091-679X (10) 96002-0

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Раки, Л.Р., Точева, Э. И., Дитерле, М. Г., Салливан, М. К., Дженсен, Г. Дж., И Ньюман, Д. К. (2017). Биогенез полифосфатных гранул временно и функционально связан с выходом из клеточного цикла во время голодания у Pseudomonas aeruginosa . Proc. Natl. Акад. Sci. 114, 2440–2449. DOI: 10.1073 / pnas.1615575114

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Rapisarda, C., Cherrak, Y., Kooger, R., Schmidt, V., Pellarin, R., Logger, L., et al. (2019). In situ и крио-ЭМ структура с высоким разрешением мембранного комплекса бактериальной секреторной системы VI типа. EMBO J. 38, 1–18. DOI: 10.15252 / embj.2018100886

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Раст А., Шаффер М., Альберт С., Ван В., Пфеффер С., Бек Ф. и др. (2019). Биогенные участки тилакоидов цианобактерий образуют участки контакта с плазматической мембраной. Нац. Растения 5, 436–446. DOI: 10.1038 / s41477-019-0399-7

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ричардсон, Л.Л. и Кастенхольц Р. В. (1987). Наблюдайте за вертикальными движениями цианобактерии Oscillatoria terebriformis в микробном мате из горячего источника, богатого сульфидами. заявл. Environ. Microbiol. 53, 2142–2150. DOI: 10.1128 / aem.53.9.2142-2150.1987

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Риппка Р., Деруэллес Дж. И Уотербери Дж. Б. (1979). Родовые назначения, истории штаммов и свойства чистых культур цианобактерий. J. Gen. Microbiol. 111, 1–61.DOI: 10.1099 / 00221287-111-1-1

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ши П. М., Уорд Л. М. и Фишер В. В. (2017). Эволюция 3-гидроксипропионатного бицикла и недавний перенос аноксигенного фотосинтеза в Chloroflexi . PNAS 114, 10749–10754. DOI: 10.1073 / pnas.1710798114

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Стаэелин, Л.А., Голецки, Дж. Р., Фуллер, Р. К., и Дрюс, Г. (1978).Визуализация супрамолекулярной архитектуры хлоросом (везикул типа Chlorobium) в замороженных клетках Chloroflexus aurantiacus . Arch. Microbiol 119, 269–277. DOI: 10.1007 / BF00405406

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Steinbüchel, A., Hustede, E., Liebergesell, M., Pieper, U., Timm, A., and Valentin, H. (1992). Молекулярные основы биосинтеза и накопления полигидроксиалкановых кислот в бактериях. FEMS Microbiol.Lett. 103, 217–230. DOI: 10.1016 / 0378-1097 (92) -D

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Штольцер, М., Лай, Х., Сюй, М., Сатай, Д., Верно, Б., и Дюран, Д. (2012). Выявление дубликатов, потерь, переносов и неполной сортировки по происхождению с небинарными деревьями видов. Биоинформатика. 28, i409 – i415. DOI: 10.1093 / биоинформатика / bts386

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Сатклифф, И. К. (2011). Архитектура клеточной оболочки в Chloroflexi : меняющаяся линия фронта в филогенетической войне за территорию. Environ. Microbiol. 13, 279–282. DOI: 10.1111 / j.1462-2920.2010.02339.x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Таширо Ю., Монсон Р. Э., Рамзи Дж. П. и Салмонд Г. П. К. (2016). Молекулярно-генетический и физический анализ газовых пузырьков у плавучих энтеробактерий. Environ. Microbiol. 18, 1264–1276. DOI: 10.1111 / 1462-2920.13203

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Тиль В., Танк М., и Брайант, Д. А. (2018). Многообразие хлорофототрофных бактерий выявлено в эпоху омиков. Annu. Rev. Plant Biol 69, 21–49. DOI: 10.1146 / annurev-arplant-042817-040500

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Точева, Э. И., Лопес-Гарридо, Дж., Хьюз, Х. В., Фредлунд, Дж., Куру, Э., Ванневенхзе, М. С. и др. (2013). Трансформации пептидогликанов при споруляции Bacillus subtilis . Мол. Microbiol. 88, 673–686.DOI: 10.1111 / mmi.12201

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Точева, Э. И., Матсон, Э. Г., Моррис, Д. М., Муссави, Ф., Лидбеттер, Дж. Р. и Дженсен, Г. Дж. (2011). Ремоделирование пептидогликана и преобразование внутренней мембраны в внешнюю во время споруляции. Cell 146, 799–812. DOI: 10.1016 / j.cell.2011.07.029

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

ван дер Меер, М. Т. Дж., Клатт, К. Г., Вуд, Дж., Брайант, Д. А., Бейтсон, М. М., Ламмертс, Л. и др. (2010). Культивирование и характеристика геномных, пищевых и липидных биомаркеров штаммов Roseiflexus , тесно связанных с преобладающими in situ популяциями, населяющими микробные маты горячих источников Йеллоустона. J. Bacteriol 192, 3033–3042. DOI: 10.1128 / jb.01610-09

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Уорд, Л. М., Хемп, Дж., Ши, П. М., МакГлинн, С. Э., и Фишер, В.W. (2018). Эволюция фототрофии в филюме Chloroflexi за счет горизонтального переноса генов. Фронт. Microbiol. 9: 260. DOI: 10.3389 / fmicb.2018.00260

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Вайс, Г. Л., Кенингер, А. К., Малденер, И., Форчхаммер, К., и Пилхофер, М. (2019). Структура и функция бактериального аналога щелевого соединения. Ячейка. 178, 374–384. DOI: 10.1016 / j.cell.2019.05.055

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Вайс, Г.Л., Медейрос, Дж. М., и Пилхофер, М. (2017). « In situ визуализация систем бактериальной секреции с помощью электронной криотомографии» в Bacterial Protein Secretion Systems. Методы молекулярной биологии , ред. Л. Журне и Р. Каскалес (Нью-Йорк, Нью-Йорк: Humana Press), 353–375. DOI: 10.1007 / 978-1-4939-7033-9_27

CrossRef Полный текст | Google Scholar

.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *